บล็อก เกี่ยวกับ PCR ขั้นสูงช่วยเพิ่มการติดตามการดื้อต่อการวินิจฉัย Mycoplasma Pneumoniae

คุณเคยมีอาการไอที่ไม่หยุดหรือไข้ที่กลับมาอีกครั้ง โดยไม่มีสาเหตุที่ชัดเจนไหม?Mycoplasma pneumoniae, เป็นเชื้อโรคทางเดินหายใจทั่วไป, เป็นสาเหตุหลักของ "โรคสะเก็ดเงินแบบไม่ปกติ" โดยเฉพาะอย่างยิ่งในหมู่เด็กและผู้ใหญ่อายุรุ่นใหม่.อาการคลินิกที่หลากหลาย, และความทนทานต่อยาปฏิชีวนะที่เพิ่มขึ้นเป็นปัญหาสําคัญสําหรับวิธีการวินิจฉัยแบบดั้งเดิมเทคนิคการวินิจฉัยโมเลกุล (molecular diagnostic) 尤其是ปฏิกิริยาโซ่โพลิเมเรซ (PCR) ได้กลายเป็นมาตรฐานทองในการตรวจMycoplasma pneumoniaeอาการติดเชื้อ ด้วยความรู้สึกสูง ความเฉพาะเจาะจง และเวลาตอบสนองอย่างรวดเร็ว พีซีอาร์ ได้ขยายตัวไปยังการตรวจหายีนที่มีความต้านทาน โดยให้การสนับสนุนที่สําคัญต่อการแพทย์แม่นยํา

หลักของMycoplasma pneumoniaeการทดสอบ PCR อยู่ที่การขยายลําดับ DNA ที่เฉพาะสําหรับเชื้อโรค โดยเลียนแบบการจําลอง DNA ของธรรมชาติPCR เพิ่มปริมาณของ DNA เป้าหมายเป็นระดับที่สามารถตรวจสอบได้กระบวนการประกอบด้วย:

• การเก็บตัวอย่าง:สกัดทางเดินหายใจ (ตัวอย่างเช่น คอ, จมูก, จมูก), เผื่อ (ตัวอย่างเช่น กลาก, น้ํายาล้างสะเก็ดเงิน) หรือ น้ํายาในช่องร่างกาย (ตัวอย่างเช่น น้ํายาล้างสะเก็ดเงิน, น้ํายาสมองสันหลัง)โปรโตคอลมาตรฐานรับประกันความสมบูรณ์แบบของตัวอย่าง.
• การสกัดกรดนิวเคลียนการแยก DNA ของเชื้อโรค และการกําจัดสารสกัด เพื่อรักษาความบริสุทธิ์
• การขยาย PCR:การผสมผสานรูปแบบ DNA, primer, nucleotides และ polymerase ในวงจรที่ควบคุมอุณหภูมิ (การลดความร้อน, การผสมผสาน, การขยาย)
• การตีความผล:การตรวจพบผลิตภัณฑ์ที่เพิ่มขึ้นด้วยการใช้ไฟฟ้าเคลียร์เจลหรือ PCR ปริมาณ (qPCR) ผลบวกยืนยันการมีเชื้อโรค

การทดสอบ PCR มีการใช้งานที่กว้างขวาง

• การวินิจฉัยในระยะแรก:สังเกตระดับดีเอ็นเอต่ําสุด แม้แต่ในช่วงก่อนอาการ ทําให้การรักษาได้ทันที
• การวินิจฉัยความแตกต่างการแยกแยกM. pneumoniaeจากโรคปอดเชื้อแบคทีเรียหรือไวรัสที่มีความเฉพาะสูง
• การติดตามการรักษา:การลดน้ําหนัก DNA แสดงถึงการรักษา
• การตรวจสอบโรคระบาด:ติดตามอัตราการติดเชื้อ และรูปแบบการต้านทาน

เมื่อเปรียบเทียบกับเทคนิคที่พัฒนาด้วยพืช พีซีอาร์โดดเด่นในด้าน:

• ความรู้สึก:สังเกตความถี่ของเชื้อโรคที่ต่ํา เหมาะสําหรับการติดเชื้อในช่วงต้น
• ความเฉพาะ:หลีกเลี่ยงการปฏิกิริยาข้ามกับจุลินทรีย์อื่น
• ความเร็ว:ส่งผลในชั่วโมงเมื่อเทียบกับสัปดาห์สําหรับปลูก
• ความหลากหลาย:วิเคราะห์เชื้อโรคที่ไม่สามารถดําเนินชีวิตได้ โดยไม่ถูกผลกระทบจากสภาพการเติบโต

ความต้านทานแมคโรไลด์ (ตัวอย่างเช่น อาซิตรอมไซซิน, เอริทรอมไซซิน) ในM. pneumoniaeเป็นปัญหาที่เร่งด่วน การกลายพันธุ์ในพันธุกรรม 23S rRNA (ตัวอย่างเช่น A2058G) ทําให้การผูกพันยาไม่มีประสิทธิภาพ

• การรักษาที่นําทางระบุยาปฏิชีวนะที่มีประสิทธิภาพ ปรับปรุงผลการรักษา และลดอาการยุ่งยาก
• สุขภาพสาธารณะติดตามแนวโน้มการต้านทาน เพื่อบอกยุทธศาสตร์การควบคุม
• ประสิทธิภาพการใช้จ่าย:ลดการใช้ยาปฏิชีวนะที่ไม่จําเป็น และค่าใช้จ่ายที่เกี่ยวข้อง

การทดสอบ PCR ที่มีเป้าหมาย (เช่น PCR ในเวลาจริง, PCR ดิจิตอล) ชี้แจงการกลายพันธุ์เช่น A2058G โดยระบุระดับความต้านทานสําหรับการรักษาที่เหมาะสมกับตัวบุคคล

ตัวอย่างที่ยอมรับ ได้แก่ สะพายทางเดินหายใจ, น้ํายา (ตัวอย่างเช่น น้ํายาไหลเวียนในกระเพาะสมอง) และ น้ํายากระเพาะสมอง

• ใช้สวาบที่มีปลายสังเคราะห์ที่มีสื่อการขนส่งไวรัส (เช่น M4-RT, E-swab)
• หลีกเลี่ยงการใช้ผ้าห่ม, ไม้, หรือถังปลูกแบบไม่ใช้ยา
• ตราตัวอย่างอย่างชัดเจนด้วยรายละเอียดทางคลินิก และประวัติการใช้ยาปฏิชีวนะ
• เก็บไว้ในอุณหภูมิ 4°C หรือ -20°C หากการทดสอบช้า

• ระยะเวลา:3-4 วันทําการ
• ผล:รายงานว่าเป็น "ลบ" (ไม่มีการตรวจพบ DNA) หรือ "บวก" (การติดเชื้อยืนยัน)

การทดสอบโดยทั่วไปถูกจัดหาจากห้องปฏิบัติการเชี่ยวชาญ (เช่น ห้องปฏิบัติการการแพทย์ Mayo) รหัส CPT ที่เกี่ยวข้องประกอบด้วย 87581 และ 87798 หมายเหตุ: การอนุมัติของรัฐนิวยอร์กอาจแตกต่างกัน

การทดสอบ PCR เพิ่มเติมด้วยการวิเคราะห์พันธุกรรมความต้านทานM. pneumoniaeโดยการทําให้การวินิจฉัยในระยะต้นและการรักษาที่ปรับปรุงได้ มันแก้ปัญหาทั้งความไม่แน่นอนในการวินิจฉัยและความทนทานต่อยาปฏิชีวนะพวกเขาสัญญาว่าจะมีเครื่องมือที่ดีกว่านี้ ที่จะต่อสู้กับเชื้อโรคทางเดินหายใจ.