وبلاگ در باره فناوری PCR تشخیص تهدید خاموش بروسلا را افزایش می دهد

آیا تا به حال به این فکر کرده اید که دانشمندان چگونه می توانند میکروسکوپی های بیماری زا را که در حیوانات، مواد غذایی یا محیط پنهان شده اند شناسایی کنند؟,ما تکنولوژی واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) را بررسی می کنیم که یک ابزار آزمایشگاهی حیاتی است که به عنوان یک "مایکروسکوپ مولکولی" برای تشخیص بروسلا، یکی از خطرناک ترین تهدیدهای باکتریایی در پزشکی عمل می کند.

بروسلا: یک بیماری زا پنهان

بروسلا، عامل عامل بروسلوز (همچنین به عنوان تب مالتا یا تب مدیترانه نیز شناخته می شود) ، ممکن است به طور گسترده ای شناخته نشود، اما چالش های قابل توجهی برای بهداشت عمومی ایجاد می کند.این باکتری حیوانات مختلف را آلوده می کند و از طریق راه های مختلف به انسان منتقل می شودعفونت ها می توانند منجر به تب، خستگی، درد مفاصل و در موارد شدید، عوارض قلبی عروقی یا عصبی شوند.روش های تشخیص سنتی اغلب سرعت و حساسیت مورد نیاز برای تشخیص به موقع را ندارند، که تکنیک های پیشرفته مولکولی را ضروری می کند.

تکنولوژی PCR: نیروگاه تقویت مولکولی

تصور کنید که به دنبال یک دانه شن مخصوص در ساحل هستید. کار غیرممکن بدون تقویت. تکنولوژی PCR این چالش را با تکثیر نمایی توالی DNA هدف حل می کند.تبدیل مقدار کمی از مواد ژنتیکی به مقادیر قابل تشخیصبرای تشخیص بروسلا، PCR کمی در زمان واقعی (qPCR) نشان دهنده یک جهش تکنولوژیکی است که تقویت را با اندازه گیری همزمان مبتنی بر فلورسنت ترکیب می کند.

علم پشت qPCR در زمان واقعی

برخلاف PCR معمولی، qPCR در زمان واقعی سیگنال های فلورسنت را در طول هر چرخه تقویت نظارت می کند.افزایش فلورسنت به طور مستقیم با مقدار اولیه DNA ارتباط دارداین رویکرد دو مزیت مهم را ارائه می دهد:

• تشخیص کیفی (موجودیت یا عدم وجود DNA بروسلا)
• تخمین نیمه کمی بار باکتریایی

این قابلیت ها برای تشخیص بالینی، نظارت بر درمان و تحقیقات اپیدمیولوژیک بسیار ارزشمند هستند.

پروتکل آزمایش PCR بروسلا

آزمایشگاه وزارت خدمات بهداشتی ایالت تگزاس (DSHS) از یک پروتکل آزمایش دقیق (رویه #: BTA0025، CPT: 87798) برای تشخیص بروسلا پیروی می کند.این آزمایش PCR در زمان واقعی گونه های متعدد بروسلا را شناسایی می کند که شاملب. سقط جنین,B. canis,B. melitensisوB. suis.

الزامات نمونه

• الگوی های فرهنگی:فرهنگ های خالص از آگر یا صفحات
• نمونه های بالینی:خون کامل، سرم یا سایر ماتریس های مناسب
• نمونه های محیطی:نمونه های هوا، آب، خاک یا گرد و غبار
• محصولات غذایی:محصولات شیرینی تازه یا منجمد از جمله شیر و پنیر
• نمونه های دامپزشکی:نمونه های خون یا بافت حیوانی

دستکاری و حمل نمونه

• الگوی های فرهنگی:در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگه دارید (در یخچال)
• نمونه های محیطی:
  • حروف، پودرها، مایعات، مواد گیاهی: دمای اتاق
  • شیر، پنیر، خون حیوانی: 2-8°C (برخیز)
• بافت های حیوانی:در دمای -20 درجه سانتیگراد نگه دارید

تمام نمونه ها نیاز به بسته بندی سه گانه دارند که مطابق با مقررات IATA و CFR 49 برای حمل و نقل مواد عفونی است. اقدامات احتیاطی جهانی در هنگام دست زدن به تمام نمونه ها اعمال می شود.

مراحل مهم قبل از ارسال

1. برچسب گیری کامل نمونه با:
   • نمونه های انسانی: دو شناسه خاص بیمار (نام، DOB، شماره پرونده پزشکی)
   • نمونه های غیر انسانی: شناسه های تطبیقی در نمونه ها و فرم های ارائه
2. اطلاع رسانی اجباری به تیم تهدیدات زیستی در شماره ۵۱۲ ۶۸۹-۵۵۳۷

جدول زمانی آزمایش و تفسیر نتایج

آزمایشگاه نتایج اولیه را در عرض یک روز پس از دریافت نمونه ارائه می دهد. گزارش های نهایی ممکن است بسته به پیچیدگی نمونه 1-21 روز طول بکشد.محدودیت های آزمایش شامل نتایج منفی کاذب احتمالی ناشی از ذخیره سازی یا حمل نامناسب یا مهار کننده ها در ماتریس های نمونه است..

پیامدهای بهداشت عمومی

• مداخلات بالینی به موقع برای افراد آلوده
• اقدامات موثر مهار شیوع
• نظارت بر مخازن حیوانات و آلودگی محیط زیست
• برنامه های تضمین ایمنی مواد غذایی

هنگامی که این آزمایش با شناسایی قطعی گونه های بروسلا ترکیب شود، ویژگی های جامع بیماری زا را برای کاربردهای بالینی و اپیدمیولوژیکی فراهم می کند.