Em 8 de outubro de 2025, uma equipe da Faculdade de Ciências Animais da Universidade Agrícola do Sul da China publicou sua mais recente pesquisa na revista de microbiologia de renome internacional *Microbiology Spectrum*, identificando e analisando sistematicamente um novo circovírus suíno — PCV5 — intimamente associado a doenças respiratórias, diarreia e distúrbios reprodutivos em porcos.
Destaques da Pesquisa
* **Novo Vírus:** PCV5 mostra baixa homologia (apenas 26,2%) com os PCV1–PCV4 conhecidos em termos de estrutura genômica, sequências de proteínas Rep e Cap. A análise filogenética indica que ele não pertence à família Circoviridae, mas está mais intimamente relacionado aos circovírus associados a fezes de focas.
* **Ampla Prevalência:** Em 70 fazendas de porcos em cinco províncias do sul do meu país, o PCV5 foi detectado em 24,3% das fazendas, e os testes sorológicos mostraram que 66,84% dos porcos carregavam anticorpos PCV5.
* **Forte Patogenicidade:** A carga viral do PCV5 está positivamente correlacionada com a gravidade da doença, com altas cargas virais observadas no intestino e no tecido cerebral, sugerindo sua potencial capacidade de cruzar a barreira hematoencefálica.
• Avanço Tecnológico: A equipe de pesquisa estabeleceu com sucesso um sistema de cultura in vitro para PCV5, purificou partículas virais com um diâmetro de aproximadamente 20 nm e desenvolveu um método de detecção ELISA altamente sensível, utilizando proteínas Cap truncadas para auto-montagem em partículas semelhantes a vírus.
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Esta pesquisa, financiada em conjunto pelo Projeto de Inovação Tecnológica de Melhoramento Agrícola da Província de Guangdong e pelo Programa Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Chave, viu a equipe de pesquisa concluir a pesquisa epidemiológica, análise genômica, cultura in vitro e análise de patogenicidade do PCV5 após mais de dois anos de pesquisa sistemática. As descobertas fornecem dados cruciais para uma compreensão mais profunda da evolução e dos mecanismos patogênicos dos vírus DNA CRESS.
Introdução
Os circovírus suínos (PCVs) têm sido um patógeno significativo em doenças suínas globalmente. PCV2, PCV3 e PCV4 são conhecidos por causar perdas severas, incluindo imunossupressão, dermatite-nefropatia e distúrbios reprodutivos. Este estudo indica que os sistemas de controle de circovírus existentes em fazendas de porcos estão enfrentando novos desafios.
Resultados da Pesquisa
1. Características Epidemiológicas:
De outubro de 2021 a junho de 2023, a equipe de pesquisa conduziu monitoramento em 70 fazendas de porcos em cinco províncias: Guangdong, Guangxi, Hunan, Yunnan e Hainan. A positividade para PCV5 foi detectada em 17 fazendas de porcos. As pesquisas sorológicas mostraram que 66,84% dos rebanhos de porcos tinham anticorpos PCV5, com uma taxa positiva de até 71,37% em porcas.
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Figura 1. Distribuição geográfica e estrutura genômica do PCV5
(A) A área azul representa a região onde o PCV5 foi monitorado, e os círculos vermelhos indicam os locais das fazendas de porcos confirmadas como infectadas com PCV5. Um total de 17 fazendas de porcos nas províncias de Guangxi, Guangdong, Hunan, Yunnan e Hainan testaram positivo para PCV5. (B) O PCV5 tem um genoma circular de fita simples (2904 nt), incluindo o gene Cap (1182 nt), o gene Rep (1056 nt) e uma estrutura de alça de haste (haste: 9 nt, alça: 17 nt).
2. Características Genômicas e Evolucionárias:
O genoma do PCV5 tem 2904 nt de comprimento, contendo regiões gênicas Cap (1182 nt) e Rep (1056 nt) mais longas e estruturas de alça de haste estendidas. Suas proteínas Rep e Cap compartilham apenas 26,2% e 20,8% de homologia de aminoácidos com os membros conhecidos da família PCV, respectivamente. Evolutivamente, está mais intimamente relacionado ao circovírus associado a leões-marinhos (FSfaCV). A semelhança da proteína Cap entre 12 cepas de PCV5 e FSfaCV varia de 89,1% a 99,2%.
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Figura 2. Localização subcelular de Cap e Rep do PCV5
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Figura 3. Relações genéticas entre cepas de PCV5 e PCV1, PCV2, PCV3, PCV4, PCLV e vários circovírus humanos.
A identidade da sequência de aminoácidos das sequências Rep (A) e Cap (B) de 12 cepas de PCV5 com outros circovírus. Asteriscos pretos representam PCV1, PCV2, PCV3, PCV4 e PCLV, e círculos azuis representam a cepa FSfaCV (número de acesso KF246569.1).
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Figura 4. Árvore filogenética construída com base na sequência de aminoácidos da proteína Rep do vírus DNA CRESS.
As cepas de PCV5 são marcadas com círculos vermelhos, e os círculos pretos representam cinco circovírus suínos: PCV1, PCV2, PCV3, PCV4 e PCLV.
3. Características bioquímicas e morfológicas:
A proteína Rep do PCV5 possui os domínios típicos de endonuclease, oligomerização e helicase dos vírus DNA CRESS, e exibe atividade ATPase; as partículas virais são icosaédricas não envelopadas, com aproximadamente 20 nm de diâmetro, e a proteína Cap truncada pode se auto-montar em partículas semelhantes a vírus.
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Figura 5. Expressão solúvel de Rep do PCV5 e determinação da atividade ATPase
(A) Comparação estrutural de Rep do PCV5 e Rep do PCV2. Azul, ciano, amarelo e laranja representam pontuações de teste de diferença de distância local predita (pLDDT) extremamente alta, confiável, baixa e extremamente baixa, respectivamente (intervalo pLDDT 0-100, refletindo a distribuição de confiança do resíduo). N e C representam o N-terminal e o C-terminal da proteína, respectivamente.
(B) Resultados de eletroforese do Rep do PCV5 de comprimento total. M é o marcador de peso molecular da proteína. A faixa 1 é a amostra antes da indução, a faixa 2 é a amostra após a indução, a faixa 3 é a amostra sobrenadante após a indução e a faixa 4 é a amostra de precipitado após a indução.
(C) PCV5 Rep Expressão estável de NΔ118 no sistema procariótico do plasmídeo PGEX-GST; faixa 1: amostra antes da indução; faixa 2: precipitado após a indução; faixa 3: tampão de permeação da coluna de níquel; faixas 4-6: tampões de eluição de imidazol de 30mM, 50mM e 300mM, respectivamente; (D) Concentração de proteína e resultados de eletroforese após purificação por peneira molecular; (E) Ensaio de atividade ATPase de PCV5 Rep NΔ118.
4. Evidências de Patogenicidade:
O PCV5 está associado a doenças respiratórias, diarreia e distúrbios reprodutivos em leitões e pode causar doença associada ao circovírus suíno (PCVAD). Ele infecta amplamente múltiplos órgãos, incluindo coração, fígado, baço, pulmões, rins, cérebro e intestinos, e pode cruzar a barreira hematoencefálica; o número de cópias virais está intimamente relacionado à gravidade da doença, com o dano mais significativo ocorrendo no íleo. Camundongos infectados com PCV5 não apresentam sintomas clínicos e o vírus é indetectável, tornando-os inadequados como modelo de doença PCV5.
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Figura 6. Valores de CT do vírus PCV5 em órgãos de 12 leitões
Resumo
Este estudo não apenas confirmou a existência e a patogenicidade do PCV5 pela primeira vez, mas também quebrou a estrutura de classificação existente dos circovírus suínos, fornecendo uma nova perspectiva para o estudo da diversidade dos vírus DNA CRESS. A alta prevalência e a patogenicidade generalizada do PCV5 no sul da China representam novos desafios para o atual sistema de prevenção e controle da doença do circovírus suíno, e também lançam as bases para o desenvolvimento de reagentes de diagnóstico e vacinas direcionadas.
Pesquisas futuras esclarecerão ainda mais as rotas de transmissão do PCV5, o risco de infecção cruzada entre espécies e os mecanismos de coinfecção com outros patógenos, fornecendo suporte teórico para a formulação de estratégias científicas de prevenção e controle.
Pessoa de Contato: Mr. Huang Jingtai
Telefone: 17743230916