คุณ เคย สงสัย ไหม ว่า นัก วิทยาศาสตร์ จะ ทํา อย่าง ไร เพื่อ บีรณาการ รหัส หลัก ของ ชีวิต?ในหมู่เทคนิคเหล่านี้การเรียงลําดับ Sanger (ที่รู้จักกันในชื่อการเรียงลําดับปลายโซ่) ถือว่าเป็นความสําเร็จที่สําคัญ ที่วางรากฐานในการแก้ความลึกลับทางพันธุกรรม
วิธีการที่สร้างปฏิวัตินี้ ถูกพัฒนาขึ้นในปี 1977 โดยนักชีวเคมีชาวอังกฤษ เฟรดริค แซงเกอร์ และเพื่อนร่วมงานของเขาความฉลาดของเทคนิคนี้ อยู่ที่ความเรียบง่ายอย่างอลังการ: การใช้ DNA polymerase เพื่อสังเคราะห์เส้น DNA ใหม่โดยรวมนิวเคลโอไตด์ปลายพิเศษ (ddNTPs)
ddNTPs เหล่านี้ขาดกลุ่ม 3'-ไฮดรอ็กซิล, ส่งผลให้การสิ้นสุดของโซ่ทันทีเมื่อรวมไปในสาย DNA ที่กําลังเติบโต. โดยการรวม ddNTPs แตกต่างกันสี่ (ddATP, ddTTP, ddCTP,และ ddGTP) รายละเอียดมีสีหลอดสีหรือไอโซโทปรังสีที่แตกต่างกัน นักวิจัยสร้างชิ้นส่วน DNA ความยาวที่แตกต่างกัน, แต่ละตัวจบด้วย ddNTP รายการ
จากนั้นชิ้นส่วน DNA จะถูกแยกตามขนาด ผ่านการเคลียร์อิเล็กทรโฟเรซส์เจล โดยชิ้นส่วนที่สั้นกว่าจะอพยพเร็วขึ้น โดยการตรวจพบเครื่องหมายปลายของชิ้นส่วนเหล่านี้นักวิทยาศาสตร์สามารถสร้างรหัสฐานของรหัสดีเอ็นเอเดิมการนําไปใช้ในช่วงแรกขึ้นอยู่กับการติดป้ายไอโซโทปรังสีและการถ่ายภาพเจล เป็นกระบวนการที่ยากลําบาก ความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีในภายหลังนําการติดป้ายฟลอเรเซ็นต์และการสแกนเลเซอร์ทําให้อัตโนมัติที่ปรับปรุงประสิทธิภาพและความแม่นยําอย่างสําคัญ.
เครื่องเรียงลําดับเซนเกอร์ที่ทันสมัยสามารถประมวลผลตัวอย่างหลายตัวพร้อมกัน โดยผลิตอิเล็กทรโฟโรแกรมอย่างรวดเร็ว (ที่เรียกว่า "รอยสูงสุด") ที่แสดงภาพลําดับ DNA
ถึงแม้ว่าจะถูกก้าวข้ามในเรื่องของผลิตด้วยเทคโนโลยีการเรียงลําดับที่มีผลิตสูง (เช่นการเรียงลําดับรุ่นต่อไป)การเรียงลําดับ Sanger ยังคงมีข้อดีสําคัญที่ทําให้มันมีความสําคัญต่อเนื่องด้วยความแม่นยําที่สูงกว่า ความยาวในการอ่านที่ค่อนข้างยาว (500-1000 คู่ฐาน) โปรต็อกอลที่ตรงไปตรงมา และมีประสิทธิภาพต่อค่าใช้จ่ายสําหรับโครงการขนาดเล็กมันยังคงเป็นสิ่งจําเป็นสําหรับการใช้งานมากมาย.
เทคนิคนี้เป็นมาตรฐานทองคําสําหรับการตรวจสอบการลอกพันธุกรรม การตรวจหาการกลายพันธุ์ การกําหนดพันธุกรรม การรับรองผลิตภัณฑ์ PCR และการศึกษาพันธุกรรมขนาดเล็กการ สนับสนุน ของ สมาคม ยังคง สนับสนุน การวิจัยพันธุกรรม, การวินิจฉัยทางการแพทย์ และความก้าวหน้าในด้านชีววิทยา
ผู้ติดต่อ: Mr. Huang Jingtai
โทร: 17743230916