مدونة حول مجموعة الـ Ultramarathonrt الجديدة تعزز كفاءة تحليل الحمض النووي النووي الطويل

لدى الباحثين الذين يعانون من هياكل RNA معقدة أو محتوى GC مرتفع أو خيوط طويلة بشكل استثنائي تضعف كفاءة PCR النسخ العكسي (RT-PCR) الآن حلًا رائدًا.يُمثّل جهاز UltraMarathonRT® Two-Step RT-PCR Kit من RNAConnect قفزة كبيرة إلى الأمام في تحليل التعبير الجيني، دراسات كاملة على الأشكال العضوية، وأبحاث الجينوم الفيروسي.

مجموعة UltraMarathonRT® تقدم نهجا جديدا لنسخة RNA العكسية وتضخيم PCR. تكمن ابتكاراتها الأساسية في إنزيم UltraMarathonRT® النسخة العكسية،الذي يحتوي على نشاط هليكازي جوهري قادر على تفكيك الهياكل الثانوية والثالثة المعقدة لـ RNA دون الحاجة إلى تجريد الحرارةهذا التقدم التكنولوجي يمكّن التحويل الفعال حتى لأكثر قوالب الحمض النووي الحمض النووي صعوبة إلى الحمض النووي المركزي المستقر.

بالمقارنة مع طرق RT-PCR التقليدية، يظهر نظام UltraMarathonRT® أداءً ملحوظًا مع قوالب RNA طويلة تتجاوز 10 كيلوباسات، حيث يتطلب أقل من 0.1 بيكوجرام من المواد الأساسيةتثبت هذه الحساسية الاستثنائية قيمتها بشكل خاص عند العمل مع عينات الحمض النووي النووي المحدودة.

بعد تجميع الحمض النووي المشترك، يحافظ البوليمراز الحمض النووي عالي الوفاء على دقة صارمة أثناء التضخيم.هذا المزيج من الإنزيمات يدعم توليد سلاسل الحمض النووي المشترك حتى 30 كيلوباس مع تقليل الأخطاء الناجمة عن PCR إلى أدنى حدلضمان تمثيل دقيق للقالب الأصلي للRNA.

إن دقة النظام تجعله مناسبًا لتطبيقات متنوعة بما في ذلك تحديد ملف تعبير الجينات الشامل وتوصيف الصيغة العضوية التفصيلية وتحليل الجينوم الفيروسي الكامل.يمكن للباحثين الآن الحصول على بيانات موثوق بها حتى من أهداف الحمض النووي الريبوزي المعقدة من حيث الهيكل أو منخفضة الكثرة.

مجموعة UltraMarathonRT® تعالج تحديًا حاسمًا في علم الأحياء الجزيئية من خلال تمكين التضخيم الناجح من كميات الحمض النووي الريبوزي الدقيقة.الطرق التقليدية غالبا ما تتطلب كمية ميكروغرام من المواد المدخلة للقوالب الرنا الطويلة، في حين أن هذه التكنولوجيا الجديدة تحقق إشارات قابلة للكشف من 1 بيكوجرام فقط من مجموع الRNA أو mRNA.

هذا الاختراق يزيد بشكل كبير من جدوى البحث في سيناريوهات ذات مادة بيولوجية محدودة، مثل مجموعات الخلايا النادرة أو العينات السريرية حيث قد تكون الحفاظ على الحمض النووي الريبوزي أقل من المثالي.

• تحليل التعبير الجيني:يوفر الكشف الحساس لكل من الكمية الروتينية وقياس النصوص النصية منخفضة الكثرة، بما في ذلك تحليل الرنا الحيوي الرئيسي الكامل.
• خصائص الأيزوفورم:يسمح بدراسة شاملة لمختلفات التوصيل البديلة من خلال تحويل cDNA الكامل الكفاءة.
• علم الجينوم الفيروسييسهل تسلسل الجينوم الفيروسي الكامل من أدخال الحمض النووي الحمضي النووي الحد الأدنى، مما يعزز أبحاث علم الفيروسات.
• استنساخ جزئي:يسهل سير عمل الاستنساخ من خلال توليد جودة عالية، إدراجات كاملة من الحمض النووي.

تتضمن مجموعة RT-PCR ذات الخطوتين UltraMarathonRT® جميع المكونات اللازمة للاستخدام الفوري، وتتضمن عازلات محسّنة، وأنزيمات عالية الأداء، وأساسيات متخصصة.النسخة العكسية تظهر استقرار استثنائي، والحفاظ على نشاط 90٪ بعد 20 دورة التجمد والذوبان، مما يوفر مزايا عملية لتدفقات العمل في المختبر.

هذا التقدم التكنولوجي يمثل حقبة جديدة في تحليل الحمض النووي الريبوزي، مما يوفر للباحثين قدرات غير مسبوقة لدراسة المواد الوراثية المعقدة بثقة ودقة.