وبلاگ در باره کیت Ultramarathonrt جدید کارایی تجزیه و تحلیل RNA طولانی را افزایش می دهد

محققانی که با ساختارهای پیچیده RNA، محتوای GC بالا، یا رشته‌های فوق‌العاده طولانی که کارایی PCR معکوس رونویسی (RT-PCR) را مختل می‌کنند، دست و پنجه نرم می‌کنند، اکنون راه‌حلی پیشگامانه دارند. کیت RT-PCR دو مرحله‌ای UltraMarathonRT® از RNAConnect گامی مهم در جهت تجزیه و تحلیل بیان ژن، مطالعات ایزوفرم تمام طول و تحقیقات ژنوم ویروسی است.

کیت UltraMarathonRT® رویکردی نوین به رونویسی معکوس RNA و تکثیر PCR معرفی می‌کند. نوآوری اصلی آن در آنزیم ترانس کریپتاز معکوس UltraMarathonRT® نهفته است که دارای فعالیت هلیکازی ذاتی است که قادر به باز کردن ساختارهای ثانویه و سوم پیچیده RNA بدون نیاز به دناتوراسیون حرارتی است. این پیشرفت تکنولوژیکی تبدیل کارآمد حتی چالش‌برانگیزترین الگوهای RNA را به cDNA پایدار امکان‌پذیر می‌سازد.

در مقایسه با روش‌های معمول RT-PCR، سیستم UltraMarathonRT® عملکرد قابل توجهی با الگوهای RNA طولانی بیش از ۱۰ کیلوبایت نشان می‌دهد و به حداقل ۰.۱ پیکوگرم ماده اولیه نیاز دارد. این حساسیت استثنایی به ویژه هنگام کار با نمونه‌های RNA محدود ارزشمند است.

پس از سنتز cDNA، پلیمراز DNA با وفاداری بالای کیت، دقت دقیقی را در طول تکثیر حفظ می‌کند. این ترکیب آنزیمی از تولید رشته‌های cDNA تا ۳۰ کیلوبایت پشتیبانی می‌کند و در عین حال خطاهای ناشی از PCR را به حداقل می‌رساند و اطمینان از نمایش وفادارانه الگوی RNA اصلی را تضمین می‌کند.

دقت این سیستم آن را برای کاربردهای متنوعی از جمله پروفایل جامع بیان ژن، مشخصات دقیق ایزوفرم و تجزیه و تحلیل کامل ژنوم ویروسی مناسب می‌سازد. محققان اکنون می‌توانند حتی از اهداف RNA پیچیده ساختاری یا با فراوانی کم، داده‌های قابل اعتماد دریافت کنند.

کیت UltraMarathonRT® با امکان تکثیر موفقیت‌آمیز از مقادیر ناچیز RNA، یک چالش حیاتی در زیست‌شناسی مولکولی را برطرف می‌کند. روش‌های سنتی اغلب به مقادیر میکروگرم ماده ورودی برای الگوهای RNA طولانی نیاز دارند، در حالی که این فناوری جدید سیگنال‌های قابل تشخیص را تنها از ۱ پیکوگرم کل RNA یا mRNA به دست می‌آورد.

این پیشرفت امکان‌پذیری تحقیقات را در سناریوهایی با مواد بیولوژیکی محدود، مانند جمعیت‌های سلولی نادر یا نمونه‌های بالینی که حفظ RNA ممکن است بهینه نباشد، به طور قابل توجهی افزایش می‌دهد.

• تجزیه و تحلیل بیان ژن: تشخیص حساس را برای سنجش کمی معمول و اندازه‌گیری رونوشت‌های با فراوانی کم، از جمله تجزیه و تحلیل mRNA تمام طول، فراهم می‌کند.
• مشخصات ایزوفرم: مطالعه جامع انواع مختلف برش جایگزین را از طریق تبدیل کارآمد cDNA تمام طول امکان‌پذیر می‌سازد.
• ژنتیک ویروسی: توالی‌یابی کامل ژنوم ویروسی را از حداقل ورودی RNA تسهیل می‌کند و تحقیقات ویروس‌شناسی را پیش می‌برد.
• کلونینگ مولکولی: گردش کار کلونینگ را با تولید درج‌های cDNA تمام طول با کیفیت بالا ساده می‌کند.

کیت RT-PCR دو مرحله‌ای UltraMarathonRT® شامل تمام اجزای لازم برای استفاده فوری است و دارای بافرهای بهینه‌شده، آنزیم‌های با کارایی بالا و پرایمرهای تخصصی است. ترانس کریپتاز معکوس پایداری استثنایی را نشان می‌دهد و پس از ۲۰ چرخه انجماد-ذوب، ۹۰٪ فعالیت خود را حفظ می‌کند و مزایای عملی را برای گردش کار آزمایشگاهی ارائه می‌دهد.

این پیشرفت تکنولوژیکی دوران جدیدی را در تجزیه و تحلیل RNA رقم می‌زند و قابلیت‌های بی‌سابقه‌ای را برای محققان در مطالعه مواد ژنتیکی پیچیده با اطمینان و دقت فراهم می‌کند.