ブログ について 科学 者 たち は 汚染 を 防ぐ ため の PCR 技術 を 改良 し て い ます

PCR実験で 説明できない結果に 苛まれましたか? 細心の注意を払って プロトコルに従ったにもかかわらず 不特定な帯が現れ 反応が過度に重くなっています原因はPCR汚染 分子生物学の沈黙した破壊者かもしれないこの目に見えない敵は 予告なしに実験を損なって 時間のかかる精密な作業を 不確実なデータに変えるのですしかし,汚染を理解し,予防することで,結果の精度を回復できます..

PCR汚染は,外来DNAが無意識に増幅プロセスに入ると発生します.これらの汚染物質は,サンプル,試料,実験機器,皮膚細胞や粘膜細胞を通して導入されると これらの異なったDNA配列は 増幅標的となり 実験の有効性を損なう 偽陽性を生成します

有効な汚染対策には,実験作業過程全体にわたって体系的な対策が必要であり,分子侵入者に対する包括的な戦闘計画が必要です.

• 区分された運行:明らかに分離された作業場を設置する.試料の準備のための"クリーンゾーン",サンプル処理のための"半汚染ゾーン",増幅のための"汚染ゾーン".設備や人材は ゾーン間を 越えてはならない.
• 紫外線消毒:作業面,遠心分離機,パイペット,PCR機器をUV光で定期的に照射して残ったDNAを分解します.
• 陽気気圧:環境汚染物質の侵入を防ぐために,実験室の空気流を外へ移動させなければならない.
• 個人保護:ラボコート,手袋,マスク を 履く.特に 異なる サンプル や 試料 を 扱う 間 に 頻繁に 手袋 を 交換 する.

• 品質制御された試料:DNase のない認定された商業用 PCR キットを使用します.社内製剤については,無菌技術に従い,DNase で治療してください.
• 専門用品:DNase/RNase の証明されたチューブ,尖端,プレートのみを使用します.通常のプラスチック用品で置き換えることはありません.
• アリクォート戦略汚染の可能性を最小限に抑えるために,無菌な条件で,散布反応剤を単一用部分に分割する.

• 前向きのパイペット:流体のパイペット樽に収縮するのを防ぐために,パイペットの先端を常に上向きに移動させる.
• フィルタリングしたヒント:エアロゾール 耐えるパイペットの先端を用いることで,汚染が広がる可能性を抑える.
• コントロール反応:検査の各行に,陽性対照群 (既知の標的DNAを持つ) と陰性対照群 (テンプレートなし) を含む.陰性対照群の増幅は,直ちに調査を必要とする汚染信号である.

• 体系的な清掃適当な溶液 で 作業 面,設備,床 を 定期的に 消毒 し て ください.
• 酵素浄化疑わしい汚染物質をDNase Iで処理して,望ましくないDNAを分解します.

PCR 汚染 は 恐ろしく ながら 勝てない.厳格 な 品質 管理,規律 的 な 技術,そして 絶えず 警戒 し て いる こと に よっ て,研究 者 たち は この 目 に 見え ない 脅威 を 無効 に する こと が でき ます.これらの措置の実施により,信頼性の高い増幅結果が確保されます.堅実な科学的結論の基礎を設けている.