وبلاگ در باره دستورالعمل های جدید برای آزمایش و تشخیص آنفولانزای پرندگان

با تشدید تهدیدات ویروس آنفولانزای پرندگان (AIV) در سطح جهانی، تشخیص به موقع و دقیق برای کنترل مؤثر بیماری ضروری شده است. به ویژه برای آنفولانزای پرندگان با پاتوژن بالا (HPAI)، پتانسیل انتقال سریع و خطرات عفونت متقاطع گونه‌ای، تشخیص زودهنگام را حیاتی می‌سازد. فناوری واکنش زنجیره‌ای پلیمراز کمی بلادرنگ (Real-time PCR)، با حساسیت بالا، ویژگی و قابلیت پاسخگویی سریع، به عنوان استاندارد طلایی برای تشخیص RNA ویروس آنفولانزای پرندگان (AIV) ظهور کرده است. این راهنمای جامع، پروتکل‌های آزمایش PCR آنفولانزای پرندگان (AIPCR)، رویه‌های جمع‌آوری نمونه و دستورالعمل‌های ارسال را برای حمایت از مؤسسات تحقیقاتی، آزمایشگاه‌های تشخیص دامپزشکی و متخصصان دام شرح می‌دهد.

AIPCR از PCR کمی فلورسانس بلادرنگ برای تقویت و نظارت بر توالی‌های ژنومی خاص ویروس آنفولانزای پرندگان (AIV) از طریق پرایمرها و پروب‌های هدفمند استفاده می‌کند. با اندازه‌گیری سیگنال‌های فلورسانس انباشته شده، آزمایش حضور RNA ویروسی را به صورت کیفی و کمی شناسایی می‌کند. مزایای کلیدی عبارتند از:

• حساسیت بالا:غلظت‌های حداقل RNA ویروسی را برای تشخیص عفونت زودهنگام تشخیص می‌دهد
• ویژگی استثنایی:با پروب‌های خاص توالی، بین زیرگونه‌ها/سویه‌های ویروس آنفولانزای پرندگان (AIV) تمایز قائل می‌شود
• پردازش سریع:نتایج را در عرض چند ساعت برای پاسخگویی به موقع به شیوع بیماری ارائه می‌دهد
• قابلیت کمی:شدت فلورسانس را با بار ویروسی برای ارزیابی شدت مرتبط می‌کند

کاربردهای این فناوری فراتر از طیور به پستاندارانی است که مستعد عفونت ویروس آنفولانزای پرندگان (AIV) هستند، از جمله تشخیص‌های اخیر HPAI در جمعیت گاو که در آن AIPCR برای مهار بیماری مؤثر بود. نظارت محیطی نیز در صورت لزوم ممکن است از این روش استفاده کند.

آزمایش استاندارد AIPCR معمولاً نتایج را در عرض۱-۳ روز کاریپس از دریافت نمونه ارائه می‌دهد. برای موارد فوری:

• پردازش در همان روز (نمونه‌های غیر گاوی):نیاز به ارسال الکترونیکی فرم‌ها و شماره‌های پیگیری قبل از رسیدن محموله دارد. نمونه‌ها باید تا ساعت ۱۱:۰۰ صبح به وقت شرقی در روز آزمایش به آزمایشگاه برسند و تمام طرف‌های ظرف حمل و نقل باید به وضوح با نمادهای "X" بزرگ با ماژیک سیاه علامت‌گذاری شوند.
• گزارش‌دهی آخر هفته:برای موارد پرخطر با پیامدهای مهم بهداشت عمومی در دسترس است.

مدیریت صحیح نمونه، نتایج قابل اعتماد آزمایش را تضمین می‌کند:

• سواب:از لوله‌های حمل و نقل ویروسی استریل و مهر و موم شده با چند قطره نرمال سالین استفاده کنید اگر محیط مخصوص در دسترس نیست. محیط‌های حمل و نقل ژل باکتریایی اکیداً ممنوع است.
• بافت‌های تنفسی:در ظروف استریل ضد نشت و مقاوم در برابر شکستن قرار دهید.

• سواب:۳-۵.۵ میلی‌لیتر محیط حمل و نقل
• بافت‌ها:مواد کافی برای استخراج کامل اسید نوکلئیک

• یکپارچگی RNA را از طریق حمل و نقل زنجیره سرد (بسته‌های یخ یا یخ خشک) حفظ کنید
• تحویل سریع برای حفظ پایداری اسید نوکلئیک

• تمام ظروف را با منبع، تاریخ جمع‌آوری و اطلاعات حیوان برچسب‌گذاری کنید
• فرم‌های ارسال را با جزئیات بالینی و اطلاعات تماس تکمیل کنید
• نمونه‌های غیر مطابق ممکن است منجر به تأخیر در پردازش و هزینه‌های اضافی شوند

برای ارسال در مقیاس بزرگ، آزمایشگاه‌ها هماهنگی قبلی را برای اطمینان از تخصیص منابع کافی توصیه می‌کنند.

تمام نتایج مثبت برای آزمایش تأییدی در آزمایشگاه‌های مرجع تعیین شده تحت آزمایش قرار می‌گیرند. روش هدف‌گیری اسید نوکلئیک منحصراً از فناوری PCR بلادرنگ استفاده می‌کند.

آزمایش AIPCR ابزاری حیاتی در نظارت بر آنفولانزای پرندگان است که دقت مولکولی را با کارایی عملیاتی ترکیب می‌کند. رعایت پروتکل‌های استاندارد جمع‌آوری، حمل و نقل و ارسال، دقت تشخیص را به حداکثر می‌رساند و پایه‌ای برای مهار به موقع شیوع و حفاظت از سلامت حیوانات فراهم می‌کند. ارتباط پیشگیرانه با مراکز آزمایشگاهی، استفاده بهینه از منابع را تضمین می‌کند، به ویژه برای نیازهای آزمایش حجیم یا تخصصی.