في المشهد الواسع للبحوث الجينومية، تلعب تقنيات تسلسل الحمض النووي دورًا محوريًا. من بينها، يظل تسلسل سانجر طريقة أساسية، تقدر بثقتها ودقة.عنصر رئيسي لهذه التقنية تسلسل الدورة يتيح تضخيم خطي لقطع الحمض النووي المستهدفة من خلال التشويه المتكرر، التهوية، وتوسيع ردود الفعل في دورة حرارية، تليها تحليل الكهرباء الشعرية.مبنية على هذا الإطار القوي لترتيب الدورة، تقدم للباحثين حلول متنوعة مصممة خصيصًا لاحتياجات تجريبية مختلفة.
يعتمد تسلسل سانجر على استراتيجيات كيميائية رئيسية: كيمياء بداية الصبغة وكيمياء إنهاء الصبغة.فهم تمييزاتها ومزاياها أمر بالغ الأهمية لاختيار مجموعة التسلسل المثلى.
توفر سلسلة BigDye® من Thermo Fisher Scientific حلول متخصصة لمختلف متطلبات التسلسل. يسلط دليل الاختيار التالي الضوء على مقاييس الأداء الرئيسية:
| الخصوصية/التطبيق | BigDye® Direct | (بيج داي) (تيرميناتور V3)1 | (بيج داي) المُنهِي (في 1).1 |
|---|---|---|---|
| جميع أنواع التسلسل | xx | xx | xx |
| دقة عالية من البرايمر القريب | xx | | xx* |
| التوافق مع M13 Primer | xx† | x | x |
| القراءات الطويلة (> 650 bp) | x | xx | x |
| الكشف عن القواعد المختلطة | xx | x | xx |
| النماذج الغنية بالمخاطر/الصعبة | x | x | x |
* عند استخدام بوليمر POP-6TM
†تتطلب مبدئيات ذات ذيل M13 أثناء تضخيم PCR
يسهل دمج M13 أو غيرها من المبدئيات العالمية ذات الذيل تدفقات العمل عن طريق توحيد عمليات الاستنساخ والتسلسل ، مما يقلل من التباين الإجرائي.
يستخدم هذا التطبيق لاكتشاف المتغيرات مقابل تسلسلات المرجعية، ويستفيد من مجموعات ذات قدرات قوية على استدعاء القاعدة الأولى وإكتشاف القاعدة المختلطة.يضمن تسلسل شظايا PCR ثنائي الاتجاه بيانات عالية الجودة.
يعمل تسلسل سانجر كمعيار ذهبي لتأكيد نتائج تسلسل الجيل التالي، وخاصة للتحقق من المناطق المستهدفة التي تم تكبيرها بواسطة PCR.
تحويل البيسولفيت يميز بين السيتوسينات الميثيلة (التي يتم الاحتفاظ بها كـ C) من غير الميثيلة (التي يتم تحويلها إلى T). يجب أن تحل مجموعات فعالة الإشارات المختلطة بدقة لتحديد حالات الميثيل.وتشمل الاستراتيجيات تسلسل منتجات PCR المعالجة بالبيسولفيت مباشرة أو تحليل الشظايا المستنسخة.
اتصل شخص: Mr. Huang Jingtai
الهاتف :: 17743230916
Arabic
