ในภูมิทัศน์ที่กว้างใหญ่ของการวิจัยพันธุกรรม เทคโนโลยีการเรียงลําดับ DNA มีบทบาทสําคัญ ในหมู่เหล่านี้ การเรียงลําดับ Sanger ยังคงเป็นวิธีการมุมก้อน ที่มีคุณค่าสําหรับความน่าเชื่อถือและความแม่นยําส่วนประกอบสําคัญของเทคนิคนี้ การเรียงลําดับวงจร ทําให้การกระตุ้นเส้นตรงของชิ้นส่วน DNA เป้าหมายผ่านการปรับปรุง, การผสมผสานและการขยายปฏิกิริยาในวงจรความร้อนสร้างขึ้นบนกรอบการเรียงลําดับวงจรที่แข็งแรงนี้, ให้ผู้วิจัยหลากหลายทางแก้ไขที่ปรับปรุงให้กับความต้องการการทดลองที่หลากหลาย
การเรียงลําดับ Sanger ขึ้นอยู่กับกลยุทธ์เคมีหลักสองอย่าง: เคมีพริมเมอร์สีและเคมีพริมเมเตอร์สีการเข้าใจความแตกต่างและข้อดีของพวกเขาเป็นสิ่งสําคัญในการเลือกชุดเรียงลําดับที่ดีที่สุด.
ซีรีย์ BigDye® ของ Thermo Fisher Scientific ให้บริการกับการแก้ไขที่เชี่ยวชาญสําหรับความต้องการการเรียงลําดับที่แตกต่างกัน
| ความเฉพาะ/การใช้ | BigDye® Direct | บิ๊กได เทอร์มิเนเตอร์ V31 | บิ๊กได เทอร์มิเนเตอร์ V11 |
|---|---|---|---|
| ประเภทการเรียงลําดับทั้งหมด | xx | xx | xx |
| ความละเอียดสูงของไพรเมอร์-ใกล้เคียง | xx | รางวัล | xx* |
| ความเหมาะสมของ M13 Primer | xx† | x | x |
| อ่านความยาว (>650 bp) | x | xx | x |
| การตรวจพบฐานผสม | xx | x | xx |
| กรณีที่มี GC รวย/ยาก | x | x | x |
*เมื่อใช้พอลิมเลอร์ POP-6TM
†ต้องการพริมเมอร์ M13 ในระหว่างการขยาย PCR
การนํา M13 หรือเครื่องพิมพ์สกัดหางทั่วไปอื่น ๆ เข้าร่วมทําให้กระแสการทํางานเรียบง่ายขึ้น โดยการมาตรฐานกระบวนการคลอนและเรียงลําดับ, ลดความแตกต่างของขั้นตอน
ใช้ในการค้นหาตัวแปรกับลําดับอ้างอิง แอปพลิเคชั่นนี้ได้รับประโยชน์จากชุดที่มีความสามารถในการเรียกฐานแรกที่แข็งแกร่งและการตรวจจับฐานผสมผสานการเรียงลําดับสองทิศของชิ้นส่วน PCR รับประกันข้อมูลที่มีคุณภาพสูง.
การเรียงลําดับ Sanger เป็นมาตรฐานทองสําหรับการยืนยันผลการเรียงลําดับรุ่นต่อไป โดยเฉพาะสําหรับการตรวจสอบภูมิภาคเป้าหมายที่ขยายด้วย PCR
การแปลงบิสซัลฟิตแยกซิตอซีนเมธีล (ถูกเก็บเป็น C) จากซิตอซีนที่ไม่ได้เมธีล (ถูกแปลงเป็น T) คิตที่มีประสิทธิภาพต้องแก้สัญญาณผสมให้ถูกต้องเพื่อกําหนดภาวะเมธีลกลยุทธ์ประกอบด้วยการเรียงลําดับโดยตรงของผลิตภัณฑ์ PCR ที่ได้รับการรักษาด้วยบีซัลฟิต หรือการวิเคราะห์ชิ้นส่วนคลอน.
ผู้ติดต่อ: Mr. Huang Jingtai
โทร: 17743230916
Thai
