Em 15 de janeiro de 2026, a equipe do Professor Yu Zhijun da Faculdade de Ciência e Tecnologia Biológica da Universidade de Jinan, em colaboração com o Instituto de Pesquisa de Aves da Academia de Ciências Agrícolas de Shandong e a Universidade Normal de Shandong, publicou um artigo de pesquisa intitulado "Caracterização Genética e Perspectivas Evolutivas de Novos Vírus da Influenza Suína H1N1 Identificados em Suínos na Província de Shandong, China" na revista internacional de virologia *Viruses* (MDPI).
Este estudo detectou dois vírus da influenza suína H1N1 (SD6591 e SD6592) em amostras de suínos da cidade de Linyi e do condado de Shanghe, cidade de Jinan, província de Shandong, em 2019, e completou seu sequenciamento de genoma completo e análise filogenética. O estudo descobriu que os genes PA e M2 da cepa SD6591 apresentaram alta homologia com o vírus H1N1 humano, sugerindo que esta cepa pode exibir características de recombinação gênica entre vírus da influenza humana e suína. A cepa SD6592, no entanto, foi altamente homóloga ao vírus da influenza suína, não apresentando características óbvias de recombinação gênica entre hospedeiros, e suas características genéticas foram relativamente conservadas.
Este estudo fornece evidências epidemiológicas moleculares para a compreensão da evolução entre espécies de vírus da influenza suína na província de Shandong, enfatizando a importância de fortalecer continuamente a vigilância da influenza suína e a avaliação de risco zoonótico.
Destaques da Pesquisa
* **Revelação de um Novo Genótipo de Reassortimento Humano-Suíno:** A análise genômica da cepa SD6591 mostrou que seus genes PA e M2 são altamente homólogos aos vírus sazonais H1N1 humanos, enquanto outros genes são derivados principalmente de vírus suínos, indicando que é um novo vírus de reassortimento humano-suíno.
* **Implicação de uma Rede Complexa de Transmissão Interespécies:** A análise filogenética revelou que o gene M2 de SD6591 se agrupa no mesmo ramo evolutivo que os vírus H1N1 caninos, sugerindo um possível ciclo multihospedeiro entre suínos, cães e humanos, destacando a necessidade de incluir animais de companhia no sistema de vigilância.
* **Confirmação da Capacidade Potencial de Infecção de Células Humanas:** Experimentos in vitro com cepas ativas altamente homólogas confirmaram que o vírus pode se replicar eficientemente em células epiteliais pulmonares humanas (A549), fornecendo evidências experimentais diretas de seu risco zoonótico potencial.
• Uma estratégia inovadora de validação funcional foi adotada: Em resposta ao desafio de não conseguir isolar vírus vivos devido à preservação de amostras, o estudo utilizou de forma inovadora cepas existentes com alta homologia genômica (>91%) para validação de substituição funcional in vitro, fornecendo uma solução viável para estudos de características virais em circunstâncias semelhantes.
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Este estudo realizou testes de ácido nucleico para o vírus da influenza suína subtipo H1N1 em 200 amostras de tecido pulmonar de suínos coletadas em 2019 em Liaocheng, Linyi, Jinan e Qingdao, na província de Shandong. Duas amostras positivas (SD6591 e SD6592) foram detectadas. A sequência completa do genoma viral foi obtida por sequenciamento de alto rendimento, e suas características evolutivas genéticas foram sistematicamente analisadas usando comparação de homologia e análise filogenética. Este estudo visa fornecer dados básicos para a vigilância epidemiológica molecular do vírus da influenza suína na província de Shandong e fornecer uma base científica para avaliar seu risco de transmissão entre espécies e formular estratégias de prevenção e controle direcionadas.
Introdução
Os vírus influenza A têm um amplo espectro de hospedeiros, infectando múltiplas espécies, incluindo humanos, aves e suínos. O vírus da influenza suína (SIV) não só causa perdas econômicas significativas para a indústria de criação de suínos, mas também representa uma ameaça persistente à saúde pública devido ao papel biológico único dos suínos como "vasos de mistura" para vírus influenza, o que lhes permite gerar continuamente novos vírus recombinantes e se espalhar entre espécies.
Resultados da Pesquisa
1. SD6591 exibe características únicas de recombinação gênica de origem humana:
O gene PA da cepa SD6591 mostra a maior homologia (96,99%) com o vírus H1N1 humano de 2009. Enquanto o gene M2 mostra a maior homologia (98,96%) com a cepa H1N1 Liaoning derivada de suínos, seu agrupamento gênico está altamente correlacionado com vírus H1N1 sazonais humanos. Seis segmentos gênicos, PB2, PB1, NP, NA, HA e NEP, são altamente homólogos a vírus H1N1 suínos clássicos. Este padrão de combinação gênica "6+2" sugere que o vírus pode ser um produto de recombinação gênica entre vírus da influenza humana e suína. Notavelmente, o gene M2 mostra afinidade tanto por vírus H1N1 suínos quanto caninos (A/canine/Korea/MV1/2012) na árvore filogenética e se agrupa no mesmo ramo evolutivo, sugerindo que este gene pode ter entrado na população suína através da transmissão cruzada entre cães e suínos.
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Tabela 1. Cepas com a maior homologia para cada gene em relação a SD6591.
2. SD6592 mantém as características genômicas do vírus H1N1 porcino clássico:
Ao contrário de SD6591, todos os oito segmentos gênicos da cepa SD6592 compartilham mais de 98% de homologia com o vírus H1N1 porcino, e são mais intimamente relacionados ao isolado de Pequim de 2018 A/swine/Beijing/0301/2018 (H1N1). Esta característica genômica altamente conservada indica que esta cepa estabeleceu uma cadeia de transmissão estável na população suína local e ocupa um nicho ecológico persistente.
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Tabela 2. Cepas com a maior homologia em relação a SD6592.
3. Nenhum sinal significativo de recombinação detectado na análise de recombinação:
A análise SimPlot sugeriu características semelhantes a quimeras no gene PA de SD6591 e nos genes NA e NP de SD6592. No entanto, verificações adicionais usando múltiplos algoritmos no pacote de software RDP5, incluindo RDP, GENECONV e BootScan (com um limite de valor p corrigido <0,05), não mostraram sinal de recombinação estatisticamente significativo. As diferenças de sequência relacionadas são mais provavelmente devidas ao acúmulo gradual de mutações pontuais ou sequências ancestrais não amostradas, indicando que atualmente não há evidências claras para apoiar a existência de um evento de recombinação recente nesta linhagem.
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Figura 1. Resultados da análise de recombinação do gene PA de SD6591.
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Figura 2. Resultados da análise de recombinação dos genes NA e NP de SD6592.
4. Substitutos Altamente Homólogos Possuem Capacidade de Replicação em Múltiplos Hospedeiros:
A equipe de pesquisa realizou validação funcional in vitro usando um isolado de H1N1 de 2018 (A/swine/China/Qingdao/2018) com >91% de homologia genômica com SD6591/SD6592. Os resultados de Western blot e qRT-PCR mostraram que o vírus poderia se replicar eficientemente em células epiteliais suínas (PK-15), caninas (MDCK) e humanas (A549), com cinética de replicação semelhante à cepa controle PR8. Esses resultados sugerem em nível celular que este tipo de vírus da influenza suína tem o potencial de infectar células de múltiplas fontes hospedeiras.
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Tabela 3. Identidade de nucleotídeos (%) entre o fragmento gênico SD6591 e duas cepas de referência H1N1.
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Tabela 4. Identidade de nucleotídeos (%) entre o fragmento gênico SD6592 e duas cepas de referência H1N1.
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Figura 3. Cinética de replicação dos vírus 2018-H1N1 e PR8 em diferentes linhagens celulares.
5. Características evolutivas do gene M2 sugerem atenção a sítios relacionados à resistência a medicamentos:
O gene M2 de SD6591 mostra a maior homologia (97,93%) com o vírus H1N1 pandêmico de 2009 e se agrupa no mesmo ramo evolutivo que o vírus H1N1 canino (A/canine/Korea/MV1/2012) na análise filogenética. Estudos anteriores mostraram que vírus influenza humanos neste ramo evolutivo comumente carregam sítios de mutação chave associados à resistência à amantadina (como S31N). Este histórico genético sugere a necessidade de prestar atenção às características moleculares potenciais relacionadas à resistência a medicamentos da cepa SD6591, e é necessária uma verificação experimental adicional de sítios e funções chave da proteína M2.
Resumo
Este estudo completou a análise do genoma completo de dois vírus da influenza suína H1N1 da província de Shandong. Utilizando uma estratégia inovadora de "substituição funcional de vírus homólogos", correlacionamos suas características de sequência com seu fenótipo de replicação in vitro, confirmando que o vírus da influenza suína H1N1 circulante em populações suínas ainda possui o potencial de infecção de células multihospedeiras entre espécies, mesmo na ausência de eventos de recombinação gênica significativos detectáveis. Esta descoberta ressalta a importância crucial de fortalecer a vigilância genômica do vírus da influenza suína e validar as características fenotípicas de cepas representativas para a detecção oportuna de mutações adaptativas potenciais e o alerta precoce de surtos de influenza novos.
Pessoa de Contato: Mr. Huang Jingtai
Telefone: 17743230916