مدونة حول ليكسوجين تطلق مجموعة تسلسل عالية النتيجة لتحضير مكتبة أسرع

في عالم البحوث المتسارعة في علوم الحياة، حيث تحدد الدقة التجريبية بشكل مباشر النجاح، قدمت تحسين دورة PCR منذ فترة طويلة تحديًا حاسمًا للباحثين.موثوقية البيانات المتسلسلة عالية النطاق - حجر الزاوية للبحوث البيولوجية الحديثة - تعتمد بشكل أساسي على جودة إعداد المكتبة، مع تعزيز PCR بمثابة خطوة محورية.

غالبًا ما يواجه الباحثون معضلة مستمرة عند تحديد دورات PCR المثلى.مشكلة خاصة مع عينات محدودة أو أهداف منخفضة الوفرة، مما قد يسبب فقدان البيانات الحرجة. على العكس من ذلك ، فإن الإفراط في إعادة التدوير يقدم منتجات وقطع أثرية غير محددة تشوه ملفات تعبير الجينات ، مما قد يؤدي إلى استنتاجات خاطئة.

هذا التوازن الحساس بين كفاءة التضخيم والحفاظ عليه يتطلب تقليديًا نهجًا واسعًا من التجربة والخطأ ،استهلاك الوقت والموارد الثمينة مع تقديم نتائج غير متسقة.

لمواجهة هذه التحديات في جميع أنحاء الصناعة،مجموعة PCR الإضافية وإعادة التضخيم V2، مصممة لتحقيق دقة غير مسبوقة في إعداد مكتبة cDNA لأنظمة QuantSeq V2 و QuantSeq-Pool و CORALL V2.

تتيح قدرة الكمية الثورية على اكتشاف QPCR ، باستخدام صبغة SYBR Green I ، مراقبة حركية التضخيم في الوقت الحقيقي. وهذا يسمح للباحثين:

• تحديد أرقام دورات PCR في النقاط النهائية بدقة علمية
• القضاء على التخمينات والتقديرات التجريبية
• لمنع كل من التحفيز المنخفض والتحفيز المفرط

يتضمن مزيج PCR المحسّن البوليمراز عالية الوفاء والبرامر المتوافق مع Illumina (بدون رموز الشريط) ، يدعم ما يصل إلى 96 تفاعل qPCR لكل مجموعة.تم تصميم وظيفة qPCR هذه خصيصًا لمنتجات Lexogen من الجيل الحالي ولا ينصح بها في الإصدارات السابقة من QuantSeq أو CORALL.

وبالإضافة إلى تحسين الدورة ، يحتوي المجموعة على نظام إعادة تضخيم متخصص (RE) الذي:

• يعزز إنتاج المكتبة عندما يثبت التضخيم الأولي أنه غير كاف
• يحسن الكشف عن النصوص النصية ذات الكثرة المنخفضة
• يدعم تطبيقات لوحات التخصيب

تحافظ وظيفة إعادة التضخيم هذه على التوافق عبر خط منتجات Lexogen بأكمله ، بما في ذلك جميع إصدارات CORALL و QuantSeq ، ومستحضرات LUTHOR ، ومكتبات RNA-Seq الصغيرة.

مجموعة وظائف مزدوجة توفر:

• 96 ردود فعل qPCRلتحسين الدورة
• ردود فعل إعادة التضخيملتحسين الغلة

تتضمن التوافق:

• المكورال RNA-Seq V2 مع UDI (الفئة 171-186)
• QuantSeq V2 مع UDI (الفئة 191-196)
• كوانت سيك بول (الفئة 139)

المجموعة غير متوافقة بشكل خاص مع منتجات TeloPrime (الفئة 013).

يُمثل مجموعة "ليكسوجن" V2 قفزة كبيرة إلى الأمام في تكنولوجيا إعداد المكتبات، حيث يُقدم للباحثين:

• تحديد دورة PCR القائم على البيانات
• خيارات مرنة لتحسين العائد
• التوافق بين سير العمل المبسط
• جاهزية منصة إيلومينا

من خلال القضاء على تحديات تحسين PCR التقليدية، يسمح هذا الابتكار للعلماء بالتركيز على الاكتشاف البيولوجي بدلاً من التحسين التقني،من المحتمل تسريع الاختراقات في تحليل التعبير الجيني والبحث في الترانسكتروميكس.