No mundo acelerado da pesquisa em ciências da vida, onde a precisão experimental determina diretamente o sucesso, a otimização do ciclo de PCR tem apresentado há muito um desafio crítico para os pesquisadores.A fiabilidade dos dados de sequenciamento de alto rendimento - a pedra angular da investigação biológica moderna - depende fundamentalmente da qualidade da preparação da biblioteca, com a amplificação da PCR servindo como seu passo fundamental.
O enigma do ciclo da PCR: equilibrar rendimento e precisão
Os investigadores enfrentam frequentemente um dilema persistente na determinação dos ciclos de PCR ideais.particularmente problemático com amostras limitadas ou metas de baixa abundânciaPor outro lado, a sobreciclagem introduz produtos e artefatos inespecíficos que distorcem os perfis de expressão genética, levando potencialmente a conclusões errôneas.
Este delicado equilíbrio entre a eficiência e a fidelidade da amplificação exige tradicionalmente abordagens de tentativa e erro.Consumindo tempo e recursos valiosos, ao mesmo tempo em que produz resultados inconsistentes.
A solução inovadora da Lexogen: o Kit de Reamplificação e Recomposição de PCR V2
Para enfrentar estes desafios em toda a indústria, a Lexogen apresenta o seu inovadorKit de Reamplificação e Recomposição de PCR V2, projetado para trazer precisão sem precedentes para a preparação da biblioteca de cDNA para sistemas QuantSeq V2, QuantSeq-Pool e CORALL V2.
Optimização do ciclo habilitada por qPCR
A capacidade revolucionária de detecção de qPCR do kit, utilizando corante SYBR Green I, permite o monitoramento em tempo real da cinética de amplificação.
- Determinar os números dos ciclos de PCR dos pontos finais com precisão científica
- Elimine as suposições e as estimativas empíricas
- Evitar artefatos de subamplificação e superamplificação
A mistura de PCR otimizada inclui polimerase de alta fidelidade e primers compatíveis com Illumina (sem códigos de barras), suportando até 96 reações qPCR por kit.Esta função qPCR foi projetada especificamente para produtos Lexogen da atual geração e não é recomendada para versões anteriores do QuantSeq ou do CORALL.
Capacidade de reamplificação da biblioteca
Além da otimização do ciclo, o kit apresenta um sistema de primer de reamplificação (RE) especializado que:
- Aumenta o rendimento da biblioteca quando a amplificação inicial é insuficiente
- Melhora a detecção de transcrições de baixa abundância
- Suporta aplicações de painéis de enriquecimento
Esta função de reamplificação mantém a compatibilidade em toda a linha de produtos da Lexogen, incluindo todas as versões CORALL e QuantSeq, preparações LUTHOR e pequenas bibliotecas de RNA-Seq.
Especificações técnicas e compatibilidade
O kit de dupla função fornece:
-
96 reacções qPCRpara otimização do ciclo
-
Reacções de reamplificaçãopara melhorar o rendimento
A compatibilidade inclui:
- CORAL RNA-Seq V2 com UDI (Cat. 171-186)
- QuantSeq V2 com UDI (Cat. 191-196)
- QuantSeq-Pool (Cat. 139)
O kit é especificamente incompatível com os produtos TeloPrime (Cat. 013).
Avançar na pesquisa genômica por meio da precisão
O kit V2 da Lexogen representa um salto significativo na tecnologia de preparação de bibliotecas, oferecendo aos investigadores:
- Determinação do ciclo de PCR baseada em dados
- Opções flexíveis de melhoria do rendimento
- Compatibilidade simplificada do fluxo de trabalho
- Preparação da plataforma Illumina
Ao eliminar os desafios tradicionais de otimização de PCR, esta inovação permite que os cientistas se concentrem na descoberta biológica em vez da otimização técnica,potencialmente acelerando avanços na análise da expressão genética e na investigação da transcriptómica.
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