Blog circa Mlabs Introduce PCR in Tempo Reale per una Diagnosi più Rapida della Tubercolosi

La tubercolosi (TB), causata dal complesso Mycobacterium tuberculosis (MTBC), rimane una delle sfide sanitarie pubbliche più persistenti per l'umanità. Sebbene il trattamento abbia compiuto progressi significativi nell'era degli antibiotici, una diagnosi tempestiva e accurata, in particolare in contesti con risorse limitate, continua a essere una barriera critica per un efficace controllo della malattia.

I metodi diagnostici tradizionali per la TB presentano limitazioni significative:

• Coltura batterica: Sebbene considerata il gold standard, richiede 2-8 settimane per i risultati, un ritardo inaccettabile per i casi in rapida progressione.
• Microscopia da striscio di espettorato: Rapida ma insensibile, rileva solo casi con ≥10.000 batteri/mL.
• Test cutanei alla tubercolina/IGRAs: Rilevano l'infezione ma non possono distinguere tra malattia attiva e latente.

Il test DNA PCR in tempo reale di MLabs affronta queste sfide attraverso:

• Velocità: Risultati in 2-4 giorni rispetto alle settimane per la coltura
• Sensibilità: Rileva fino a 10-100 copie di DNA/reazione
• Specificità: Mira precisamente a sequenze specifiche dell'MTBC
• Quantificazione: Fornisce un carico batterico stimato

Il test utilizza:

1. Primer/sonde specifici che mirano a sequenze conservate dell'MTBC
2. Monitoraggio della fluorescenza in tempo reale durante l'amplificazione PCR
3. Valori di ciclo di soglia (Ct) per stimare la quantità iniziale di DNA

Il saggio identifica tutti i principali membri dell'MTBC:

• M. tuberculosis (principale patogeno umano)
• M. bovis (incluso il ceppo vaccinale BCG)
• M. africanum (ceppi dell'Africa occidentale)
• M. microti (ceppi adattati ai roditori)
• Altre rare varianti dell'MTBC

Nota: Sebbene rilevi tutti i membri dell'MTBC, il test non può differenziare tra specie specifiche all'interno del complesso.

Il test svolge molteplici ruoli diagnostici:

• Screening rapido di casi sospetti di TB
• Test su campioni respiratori (espettorato, BAL, lavaggi bronchiali)
• Analisi di campioni di tessuto (freschi o FFPE)
• Uso complementare alla coltura (per la speciazione e la DST)

Risultati positivi indicano il rilevamento di DNA dell'MTBC ma richiedono correlazione clinica. Risultati negativi non escludono completamente la TB a causa di potenziali:

• Bassi carichi batterici
• Problemi di campionamento
• Inibitori della PCR

Il test può rilevare mutazioni nel gene katG

• associate alla resistenza all'isoniazide, sebbene:
• L'assenza di mutazioni non garantisce la sensibilità
• Esistono altri meccanismi di resistenza

Requisiti del Campione

• Per risultati ottimali: Campioni respiratori:
• ≥1 mL in contenitore sterile Campioni di tessuto:
• ≥5 mm freschi o FFPE Trasporto:

• Dettagli Operativi
• Test disponibile quotidianamente (inclusi i fine settimana)
• Tempi di risposta: 2-4 giorni lavorativi

Codice CPT: 87556