Blog về Mlabs giới thiệu PCR thời gian thực để phát hiện bệnh lao nhanh hơn

Lao phổi (TB), do phức hợp Mycobacterium tuberculosis (MTBC) gây ra, vẫn là một trong những thách thức sức khỏe cộng đồng dai dẳng nhất của nhân loại. Mặc dù việc điều trị đã tiến bộ đáng kể trong kỷ nguyên kháng sinh, chẩn đoán kịp thời và chính xác—đặc biệt là ở những nơi có nguồn lực hạn chế—vẫn là một rào cản quan trọng đối với việc kiểm soát bệnh hiệu quả.

Các phương pháp chẩn đoán lao truyền thống đối mặt với những hạn chế đáng kể:

• Nuôi cấy vi khuẩn: Mặc dù được coi là tiêu chuẩn vàng, nhưng cần 2-8 tuần để có kết quả—một sự chậm trễ không thể chấp nhận được đối với các trường hợp tiến triển nhanh.
• Soi kính hiển vi phết đờm: Nhanh chóng nhưng kém nhạy, chỉ phát hiện các trường hợp có ≥10.000 vi khuẩn/mL.
• Xét nghiệm da bằng tuberculin/IGRA: Phát hiện nhiễm trùng nhưng không thể phân biệt bệnh đang hoạt động với bệnh tiềm ẩn.

Xét nghiệm DNA PCR thời gian thực của MLabs giải quyết những thách thức này thông qua:

• Tốc độ: Kết quả trong 2-4 ngày so với vài tuần đối với nuôi cấy
• Độ nhạy: Phát hiện chỉ với 10-100 bản sao DNA/phản ứng
• Độ đặc hiệu: Nhắm mục tiêu chính xác các trình tự đặc trưng của MTBC
• Định lượng: Cung cấp tải lượng vi khuẩn ước tính

Xét nghiệm sử dụng:

1. Các mồi/đầu dò đặc hiệu nhắm mục tiêu các trình tự MTBC được bảo tồn
2. Giám sát huỳnh quang thời gian thực trong quá trình khuếch đại PCR
3. Giá trị chu kỳ ngưỡng (Ct) để ước tính lượng DNA ban đầu

Xét nghiệm xác định tất cả các thành viên chính của MTBC:

• M. tuberculosis (mầm bệnh chính ở người)
• M. bovis (bao gồm cả chủng vắc xin BCG)
• M. africanum (các chủng Tây Phi)
• M. microti (các chủng thích nghi với động vật gặm nhấm)
• Các biến thể MTBC hiếm gặp khác

Lưu ý: Mặc dù phát hiện tất cả các thành viên MTBC, xét nghiệm không thể phân biệt giữa các loài cụ thể trong phức hợp.

Xét nghiệm phục vụ nhiều vai trò chẩn đoán:

• Sàng lọc nhanh các trường hợp nghi lao
• Xét nghiệm mẫu hô hấp (đờm, dịch rửa phế quản, dịch rửa phế quản)
• Phân tích mẫu mô (tươi hoặc FFPE)
• Sử dụng bổ sung với nuôi cấy (để định loài và DST)

Kết quả dương tính cho thấy phát hiện DNA MTBC nhưng cần tương quan lâm sàng. Kết quả âm tính không loại trừ hoàn toàn bệnh lao do khả năng:

• Tải lượng vi khuẩn thấp
• Các vấn đề lấy mẫu
• Chất ức chế PCR

Xét nghiệm có thể phát hiện gen katG đột biến liên quan đến kháng isoniazid, mặc dù:

• Không có đột biến không đảm bảo độ nhạy
• Có các cơ chế kháng thuốc khác
• DST dựa trên nuôi cấy vẫn là tiêu chuẩn cuối cùng

Để có kết quả tối ưu:

• Mẫu hô hấp: ≥1 mL trong lọ vô trùng
• Mẫu mô: ≥5 mm tươi hoặc FFPE
• Vận chuyển: Bảo quản lạnh (2-8°C) trong vòng 7 ngày

• Xét nghiệm có sẵn hàng ngày (bao gồm cả cuối tuần)
• Thời gian xử lý: 2-4 ngày làm việc
• Mã CPT: 87556

Sự tiến bộ về phân tử này đại diện cho một bước nhảy vọt đáng kể trong chẩn đoán lao, cho phép phát hiện sớm hơn và bắt đầu điều trị sớm hơn, đồng thời bổ sung cho các phương pháp truyền thống để quản lý bệnh nhân toàn diện.