কোম্পানির খবর একটি সিচুয়ান দল একটি নতুন রিকম্বিন্যান্ট PRRSV অত্যন্ত রোগ সৃষ্টিকারী ভাইরাস স্ট্রেন আবিষ্কার করেছে: ভ্যাকসিন এবং বন্য প্রকারের পুনর্মিলন

2025 সালের 2 জুলাই, সাউথওয়েস্ট ইউনিভার্সিটি ফর ন্যাশনালিটিজের কলেজ অফ অ্যানিমেল সায়েন্স অ্যান্ড ভেটেরিনারি মেডিসিনের ঝাং ঝিডং এবং ঝো লং-এর নেতৃত্বে একটি দল, সিচুয়ান একাডেমি অফ অ্যানিমেল সায়েন্সের সহযোগিতায়, আন্তর্জাতিক জার্নাল *ফ্রন্টিয়ার্স ইন ভেটেরিনারি সায়েন্স*-এ তাদের সর্বশেষ গবেষণা প্রকাশ করেছে। তারা একটি নতুন শূকর প্রজনন ও শ্বাসযন্ত্রের সিন্ড্রোম ভাইরাস (PRRSV) স্ট্রেন আবিষ্কার করেছে, যার নাম GX2024। এটি একটি বন্য-প্রকার ভাইরাস এবং একটি পরিবর্তিত লাইভ ভাইরাস ভ্যাকসিনের (MLV) সংমিশ্রণে তৈরি হয়েছে। এই স্ট্রেনটি চীনের সিচুয়ান প্রদেশের একটি শূকর খামার থেকে আলাদা করা হয়েছিল এবং শূকরছানাদের মধ্যে অত্যন্ত উচ্চ রোগ সৃষ্টিকারী ক্ষমতা (100% মৃত্যুহার) দেখিয়েছিল।

গবেষণার প্রধান বিষয়গুলি

• চীনে L1C.5 RFLP-1-4-4 টাইপ PRRSV পুনর্সংযোজন স্ট্রেনের অত্যন্ত মারাত্মক বৈশিষ্ট্য প্রথম আবিষ্কার

• এই স্ট্রেনটি তিনটি উৎস থেকে পুনর্গঠিত হয়েছে: একটি NADC30-এর মতো বন্য-প্রকার স্ট্রেন (L1C.5) + একটি অত্যন্ত রোগ সৃষ্টিকারী JXA1-এর মতো স্ট্রেন (L8E) + একটি বাণিজ্যিক লাইভ ভ্যাকসিন স্ট্রেন RespPRRS MLV (L5A)

• শূকরছানাদের সংক্রমণ উচ্চ জ্বর (40–42°C), গুরুতর ফুসফুসের রক্তক্ষরণ এবং শোথ সৃষ্টি করে এবং সমস্ত শূকরছানা 14 দিনের মধ্যে মারা যায়।

• এটি প্রমাণ করে যে বর্তমান MLV ভ্যাকসিনগুলি বন্য-প্রকার স্থানীয় অঞ্চলে পুনর্গঠন এবং অনাক্রম্যতা এড়ানোর ঝুঁকি তৈরি করে।

2024 সালে, একটি গবেষণা দল সিচুয়ানের একটি শূকর খামারে গর্ভপাত এবং মৃত বাচ্চা প্রসব এবং শূকরছানাদের তীব্র মৃত্যু লক্ষ্য করে। কোষ পৃথকীকরণ এবং সম্পূর্ণ জিনোম সিকোয়েন্সিং বিশ্লেষণ নিশ্চিত করেছে যে নতুন স্ট্রেন GX2024 PRRSV-2 বংশের L1C.5 প্রকারের অন্তর্গত।

পরবর্তী জেনেটিক বিশ্লেষণ প্রকাশ করেছে যে এই স্ট্রেনটি একটি নতুন মাল্টিপ্লেক্স রিকম্বিন্যান্ট ভাইরাস, যা একটি NADC30-এর মতো বন্য-প্রকার স্ট্রেন, একটি অত্যন্ত রোগ সৃষ্টিকারী JXA1-এর মতো স্ট্রেন এবং একটি পরিবর্তিত লাইভ ভাইরাস ভ্যাকসিন স্ট্রেন (MLV) থেকে সহ-পুনর্গঠিত হয়েছে।

প্রাণী পরীক্ষার মাধ্যমে জানা গেছে যে GX2024 অত্যন্ত রোগ সৃষ্টিকারী; সংক্রমিত শূকরছানা অল্প সময়ের মধ্যে মারা যায়, গুরুতর রক্তক্ষরণজনিত নিউমোনিয়া এবং ফুসফুসের শোথ দেখা যায়, উল্লেখযোগ্যভাবে লসিকা গ্রন্থি বৃদ্ধি ও রক্তক্ষরণ হয়, ভাইরাসের লোড দ্রুত বৃদ্ধি পায় এবং সিরাম অ্যান্টিবডির মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পায়।

ভূমিকা

শূকর প্রজনন ও শ্বাসযন্ত্রের সিন্ড্রোম (PRRS) বিশ্বব্যাপী শূকর শিল্পের সবচেয়ে ধ্বংসাত্মক ভাইরাল রোগগুলির মধ্যে একটি। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, NADC30-এর মতো (L1C) স্ট্রেনটি চীনা শূকর খামারগুলিতে ধীরে ধীরে প্রভাবশালী স্ট্রেন হয়ে উঠেছে, যেখানে RFLP টাইপ 1–4-4-এর আবির্ভাব বিশ্বব্যাপী মনোযোগ আকর্ষণ করেছে।

বিভিন্ন বংশের স্ট্রেন এবং লাইভ ভ্যাকসিনের সহাবস্থানের কারণে, PRRSV জিন পুনর্গঠন ঘটনাগুলি ঘন ঘন ঘটে, যা জটিল ভাইরাল মিউটেশন এবং ভ্যাকসিন নিয়ন্ত্রণে অসুবিধা সৃষ্টি করে।

গবেষণার ফলাফল

1. নতুন স্ট্রেন GX2024-এর পৃথকীকরণ এবং সনাক্তকরণ:

· RespPRRS MLV ভ্যাকসিন দিয়ে টিকা দেওয়া সিচুয়ানের একটি শূকর খামার থেকে গুরুতর শ্বাসকষ্টের লক্ষণযুক্ত শূকরছানাদের ফুসফুসের টিস্যু সংগ্রহ করা হয়েছিল। PRRSV স্ট্রেন GX2024-কে Marc-145 কোষ এবং শূকর অ্যালভিওলার ম্যাক্রোফেজ (iPAMs) ব্যবহার করে আলাদা করা হয়েছিল, যার সম্পূর্ণ-দৈর্ঘ্যের জিনোম 15018 nt (GenBank অ্যাক্সেসন নম্বর: PV362838)।

চিত্র 1. PRRSV GX2024-এর ভাইরাস পৃথকীকরণ

(a) iPAM এবং Marc-145 কোষগুলিকে PRRSV GX2024 দিয়ে স্থাপন করা হয়েছিল এবং সংক্রমণের 60 ঘন্টা পরে সনাক্ত করা হয়েছিল; (b) GX2024 আইসোলেটের প্লেক পরীক্ষা iPAM কোষ ব্যবহার করে করা হয়েছিল, ভাইরাসের স্টক দ্রবণের 10⁻¹⁰-গুণ লঘুতা সহ; (c) iPAM এবং Marc-145 কোষগুলিকে ষষ্ঠ প্রজন্মের ভাইরাস কালচার দিয়ে 48 ঘন্টার জন্য সংক্রমিত করা হয়েছিল এবং অ্যান্টি-N PRRSV মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে IFA করা হয়েছিল। কোষের নিউক্লিয়াসগুলিকে DAPI দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। স্কেল বার = 75 μm।

• এই স্ট্রেনের NSP2 জিনের 131টি অ্যামিনো অ্যাসিডের একটি বিচ্ছিন্ন বিলুপ্তি রয়েছে, যা NADC30 স্ট্রেনের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ (অবস্থান 322-432-এ 111টি অ্যামিনো অ্যাসিড বিলুপ্ত, অবস্থান 483-এ 1টি অ্যামিনো অ্যাসিড বিলুপ্ত এবং অবস্থান 504-522-এ 19টি অ্যামিনো অ্যাসিড বিলুপ্ত), এবং GP5 প্রোটিনের অনন্য অ্যামিনো অ্যাসিড মিউটেশন রয়েছে (P¹⁵→L¹⁵, F²³→S²³, ইত্যাদি), যা দেশে এবং বিদেশে L1C স্ট্রেন থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা।

চিত্র 2. NSP2 এবং GP5-এর একাধিক ক্রম অ্যামিনো অ্যাসিড সারিবদ্ধকরণ

(a) GX2024 এবং NADC30-এর মতো স্ট্রেনের NSP2-এর অ্যামিনো অ্যাসিড অবস্থানে 322–432, 483 এবং 504–522-এ তিনটি বিচ্ছিন্ন বিলুপ্তি (নীল অঞ্চল) বিদ্যমান। হালকা লাল অঞ্চলগুলি অত্যন্ত রোগ সৃষ্টিকারী শূকর প্রজনন ও শ্বাসযন্ত্রের সিন্ড্রোম ভাইরাস (HP-PRRSV, JXA1-এর মতো স্ট্রেন)-এ অ্যামিনো অ্যাসিড বিলুপ্তি নির্দেশ করে। (b) GX2024 স্ট্রেন এবং চীন ও মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের 17টি L1C PRRSV রেফারেন্স স্ট্রেনের GP5 অ্যামিনো অ্যাসিড সিকোয়েন্সের একাধিক ক্রম সারিবদ্ধকরণ। বেগুনি বাক্সগুলি সংকেত পেপটাইড অঞ্চল নির্দেশ করে, লাল বাক্সগুলি হাইপারভেরিয়েবল অঞ্চল (HVR1 এবং 2) নির্দেশ করে এবং হলুদ বাক্সগুলি ট্রান্সমেমব্রেন ডোমেন (TM1, 2, এবং 3) নির্দেশ করে।

2. জিনোমিক পুনর্গঠন বিশ্লেষণ ট্রিপল পুনর্গঠন উৎস নিশ্চিত করে:

RDP4 এবং SimPlot সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে বিশ্লেষণ GX2024 জিনোমে পাঁচটি পুনর্গঠন ব্রেকপয়েন্ট প্রকাশ করেছে, যা ORF1a, ORF1b, ORF3 এবং ORF4 অঞ্চলে অবস্থিত:

· ORF1a (1-1868nt) এবং ORF1b (3565-9392nt) অঞ্চলগুলি JXA1-এর মতো (L8E) স্ট্রেনের সাথে সর্বোচ্চ সমতা দেখিয়েছে;

· ORF3 (12688-13172nt) অঞ্চলটি RespPRRS MLV ভ্যাকসিন স্ট্রেনের সাথে 90.1% সমতা দেখিয়েছে, যা এর মূল VR-2332 স্ট্রেনের চেয়ে বেশি;

· অবশিষ্ট অঞ্চলগুলি (1869-3564nt, 9393-12687nt, ইত্যাদি) NADC30-এর মতো (L1C.5) স্ট্রেনের সাথে অত্যন্ত সমজাতীয় ছিল, যা এটিকে একটি ট্রিপল পুনর্গঠন স্ট্রেন হিসাবে নিশ্চিত করে।

সারণী 1. GX2024 এবং 11টি PRRSV রেফারেন্স স্ট্রেনের মধ্যে নিউক্লিওটাইড অভিন্নতার তুলনা

সারণী 2. GX2024-এ সনাক্ত করা পুনর্গঠন ঘটনার তথ্য

চিত্র 3. GX2024 আইসোলেটের জিনোমিক পুনর্গঠন বিশ্লেষণ

3. রোগ সৃষ্টিকারী পরীক্ষা: 100% প্রাণঘাতকতা উচ্চ ঝুঁকি তুলে ধরে

PRRSV অ্যান্টিবডিবিহীন 9টি চার-সপ্তাহ বয়সী শূকরছানার উপর একটি চ্যালেঞ্জ পরীক্ষা করা হয়েছিল (5টি পরীক্ষিত, 4টি নিয়ন্ত্রণ):

· পরীক্ষিত শূকরছানাগুলি 3য় দিনে 40℃-এর উপরে উচ্চ জ্বর তৈরি করে এবং 4-14 দিনের মধ্যে শ্বাসকষ্ট, অ্যাটাক্সিয়া এবং ডায়রিয়ার মতো লক্ষণ দেখা যায়। সমস্ত শূকরছানা 14 দিনের মধ্যে মারা যায় (মৃত্যুহার 100%); নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে কোনো অস্বাভাবিকতা দেখা যায়নি।

চিত্র 4. শূকরছানাদের মধ্যে PRRSV আইসোলেট GX2024-এর রোগ সৃষ্টিকারী বিশ্লেষণ

(a) এই গবেষণার প্রাণী পরীক্ষার নকশা। (b) GX2024 দিয়ে স্থাপন করা এবং RPMI-1640 মাধ্যম দিয়ে অসংক্রমিত শূকরছানাদের মলদ্বার তাপমাত্রা। ক্লিনিকাল জ্বরের কাটঅফ মান 40.0℃ নির্ধারণ করা হয়েছিল। (c) চ্যালেঞ্জ পরীক্ষার সময় 3, 7, 10 এবং 14 দিনের ক্লিনিকাল লক্ষণের স্কোর। স্কোরগুলির মধ্যে ক্লিনিকাল লক্ষণ, শ্বাসকষ্টের লক্ষণ এবং স্নায়বিক লক্ষণ অন্তর্ভুক্ত ছিল। (d) পরীক্ষিত শূকরছানাদের বেঁচে থাকা এবং মৃত্যুর বক্ররেখা। (e) চ্যালেঞ্জ পরীক্ষার সময় পরীক্ষিত শূকরছানাদের গড় সাপ্তাহিক ওজন বৃদ্ধি।

প্যাথলজিকাল পরীক্ষায় পরীক্ষিত শূকরছানাদের ফুসফুসের টিস্যুতে গুরুতর একত্রীকরণ, শোথ এবং রক্তক্ষরণ দেখা গেছে, অ্যালভিওলার সেপ্টার পুরুত্ব, এপিথেলিয়াল কোষের নেক্রোসিস, লসিকা গ্রন্থির কর্টেক্স এবং মেডুলার অস্পষ্ট সীমানা, লিম্ফোসাইটের হ্রাস এবং রক্তক্ষরণ; ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি ফুসফুস এবং লসিকা গ্রন্থিতে প্রচুর পরিমাণে PRRSV অ্যান্টিজেনের উপস্থিতি নিশ্চিত করেছে।

চিত্র 5. পরীক্ষিত শূকরছানাদের ফুসফুস এবং লসিকা গ্রন্থির ক্ষত পর্যবেক্ষণ

• ভাইরাল লোড সনাক্তকরণ দেখিয়েছে যে সিরাম ভাইরাল লোড চ্যালেঞ্জের 7 দিন পরে শীর্ষে পৌঁছেছে এবং ফুসফুসের টিস্যুতে ভাইরাল লোড অন্যান্য টিস্যুর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। তদুপরি, সমস্ত পরীক্ষিত শূকরছানা 7 দিনের মধ্যে PRRSV-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি তৈরি করেছে (S/P>0.4)।

চিত্র 6. সিরাম এবং টিস্যুতে ভাইরাল লোড এবং শূকর প্রজনন ও শ্বাসযন্ত্রের সিন্ড্রোম ভাইরাস (PRRSV) নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ

সংক্ষিপ্তসার

এই গবেষণায় প্রথমবারের মতো একটি অত্যন্ত রোগ সৃষ্টিকারী L1C.5 RFLP-1-4-4 PRRSV স্ট্রেন সম্পর্কে জানানো হয়েছে, যা একটি বন্য-প্রকার স্ট্রেন এবং একটি ভ্যাকসিন স্ট্রেন থেকে পুনর্গঠিত হয়েছে, যা শূকরছানাদের জন্য অত্যন্ত মারাত্মক। এই স্ট্রেনের আবির্ভাব বর্তমান PRRS ভ্যাকসিন নিয়ন্ত্রণ কৌশলগুলির জন্য একটি গুরুতর চ্যালেঞ্জ তৈরি করে, যা ভাইরাস নজরদারি জোরদার করা, ভ্যাকসিনের নকশা অপ্টিমাইজ করা এবং জৈব নিরাপত্তা এবং সমন্বিত প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণ ব্যবস্থার উপর জোর দেওয়ার প্রয়োজনীয়তা তুলে ধরে।