कंपनी की खबर एक सिचुआन टीम ने एक नए पुनर्संयोजन PRRSV अत्यधिक रोगजनक वायरस स्ट्रेन की खोज की: वैक्सीन और जंगली-प्रकार का पुनर्संयोजन

2 जुलाई, 2025 को, साउथवेस्ट यूनिवर्सिटी फॉर नेशनलिटिज़ के कॉलेज ऑफ एनिमल साइंस एंड वेटरनरी मेडिसिन के झांग झिदोंग और झोउ लॉन्ग के नेतृत्व में एक टीम ने सिचुआन एकेडमी ऑफ एनिमल साइंसेज के सहयोग से, अंतरराष्ट्रीय जर्नल *फ्रंटियर्स इन वेटरनरी साइंस* में अपना नवीनतम शोध प्रकाशित किया, जिसमें एक नए पोर्सिन रिप्रोडक्टिव एंड रेस्पिरेटरी सिंड्रोम वायरस (PRRSV) स्ट्रेन की सूचना दी गई, जिसका नाम GX2024 है, जो एक जंगली प्रकार के वायरस और एक संशोधित जीवित वायरस वैक्सीन (MLV) के संकरण का परिणाम है। इस स्ट्रेन को चीन के सिचुआन प्रांत के एक सुअर फार्म से अलग किया गया था, और इसने सूअरों में अत्यधिक उच्च रोगजनकता (100% मृत्यु दर) का प्रदर्शन किया।

अनुसंधान मुख्य बातें

• चीन में L1C.5 RFLP-1-4-4 प्रकार के PRRSV पुनर्संयोजक स्ट्रेन की अत्यधिक घातक विशेषताओं की पहली खोज

• यह स्ट्रेन तीन स्रोतों से पुनर्संयोजित किया गया था: एक NADC30-जैसे जंगली प्रकार का स्ट्रेन (L1C.5) + एक अत्यधिक रोगजनक JXA1-जैसे स्ट्रेन (L8E) + एक वाणिज्यिक जीवित वैक्सीन स्ट्रेन RespPRRS MLV (L5A)

• सूअरों में संक्रमण से उच्च बुखार (40–42°C), गंभीर फुफ्फुसीय रक्तस्राव और एडिमा हुआ, और सभी सूअरों की 14 दिनों के भीतर मृत्यु हो गई।

• यह दर्शाता है कि वर्तमान MLV टीके जंगली प्रकार के स्थानिक क्षेत्रों में पुनर्संयोजन और प्रतिरक्षा से बचने का जोखिम पैदा करते हैं।

2024 में, एक शोध टीम ने सिचुआन के एक सुअर फार्म में सूअरों में गर्भपात और मृत जन्म और सूअरों में तीव्र मृत्यु दर की खोज की। सेल अलगाव और संपूर्ण-जीनोम अनुक्रमण विश्लेषण ने पुष्टि की कि नया स्ट्रेन GX2024 PRRSV-2 वंशावली के L1C.5 प्रकार का है।

आगे के आनुवंशिक विश्लेषण से पता चला कि यह स्ट्रेन एक नया मल्टीप्लेक्स पुनर्संयोजक वायरस है, जो एक NADC30-जैसे जंगली प्रकार के स्ट्रेन, एक अत्यधिक रोगजनक JXA1-जैसे स्ट्रेन और एक संशोधित जीवित वायरस वैक्सीन स्ट्रेन (MLV) से सह-पुनर्संयोजित है।

पशु चुनौती प्रयोगों से पता चला कि GX2024 अत्यधिक रोगजनक है; संक्रमित सूअरों की थोड़े समय में मृत्यु हो गई, जिससे गंभीर रक्तस्रावी निमोनिया और फुफ्फुसीय एडिमा, लिम्फ नोड्स का महत्वपूर्ण विस्तार और रक्तस्राव, वायरल लोड में तेजी से वृद्धि, और सीरम एंटीबॉडी के स्तर में महत्वपूर्ण वृद्धि हुई।

परिचय

पोर्सिन रिप्रोडक्टिव एंड रेस्पिरेटरी सिंड्रोम (PRRS) वैश्विक सुअर उद्योग में सबसे विनाशकारी वायरल बीमारियों में से एक है। हाल के वर्षों में, NADC30-जैसे (L1C) स्ट्रेन धीरे-धीरे चीनी सुअर फार्मों में प्रमुख परिसंचारी स्ट्रेन बन गया है, जबकि RFLP प्रकार 1–4-4 का उद्भव वैश्विक ध्यान आकर्षित कर रहा है।

स्ट्रेन और जीवित टीकों की विभिन्न वंशों के सह-अस्तित्व के कारण, PRRSV जीन पुनर्संयोजन की घटनाएं बार-बार होती हैं, जिससे जटिल वायरल उत्परिवर्तन और वैक्सीन नियंत्रण में कठिनाइयाँ आती हैं।

अनुसंधान परिणाम

1. नए स्ट्रेन GX2024 का अलगाव और पहचान:

· गंभीर श्वसन लक्षण दिखाने वाले सूअरों के फेफड़ों के ऊतकों को सिचुआन के एक सुअर फार्म से एकत्र किया गया था, जिसे RespPRRS MLV वैक्सीन से टीका लगाया गया था। PRRSV स्ट्रेन GX2024 को Marc-145 कोशिकाओं और पोर्सिन एल्वियोलर मैक्रोफेज (iPAMs) का उपयोग करके अलग किया गया था, जिसमें 15018 nt (GenBank एक्सेस नंबर: PV362838) का पूर्ण-लंबाई वाला जीनोम था।

चित्र 1. PRRSV GX2024 का वायरस अलगाव

(a) iPAM और Marc-145 कोशिकाओं को PRRSV GX2024 के साथ टीका लगाया गया और संक्रमण के 60 घंटे बाद पता लगाया गया; (b) GX2024 आइसोलेट का प्लेक परख iPAM कोशिकाओं का उपयोग करके किया गया, जिसमें वायरस स्टॉक सॉल्यूशन का 10⁻¹⁰ तनुकरण था; (c) iPAM और Marc-145 कोशिकाओं को छठी पीढ़ी के वायरस कल्चर से 48 घंटे के लिए संक्रमित किया गया, और एंटी-N PRRSV मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करके IFA किया गया। सेल नाभिक को DAPI से रंगा गया। स्केल बार = 75 μm।

• इस स्ट्रेन के NSP2 जीन में 131 अमीनो एसिड का एक असंतत विलोपन है, जो NADC30 स्ट्रेन के अनुरूप है (322-432 पर 111 aa विलोपित, 483 पर 1 aa विलोपित, और 504-522 पर 19 aa विलोपित), और GP5 प्रोटीन में अद्वितीय अमीनो एसिड उत्परिवर्तन हैं (P¹⁵→L¹⁵, F²³→S²³, आदि), जो घर और विदेश में L1C स्ट्रेन से काफी अलग हैं।

चित्र 2. NSP2 और GP5 का एकाधिक अनुक्रम अमीनो एसिड संरेखण

(a) GX2024 और NADC30-जैसे स्ट्रेन के NSP2 में अमीनो एसिड स्थिति 322–432, 483, और 504–522 पर तीन असंतत विलोपन (नीले क्षेत्र) मौजूद हैं। हल्के लाल क्षेत्र अत्यधिक रोगजनक पोर्सिन रिप्रोडक्टिव एंड रेस्पिरेटरी सिंड्रोम वायरस (HP-PRRSV, JXA1-जैसे स्ट्रेन) में अमीनो एसिड विलोपन को दर्शाते हैं। (b) GX2024 स्ट्रेन और चीन और संयुक्त राज्य अमेरिका से 17 L1C PRRSV संदर्भ स्ट्रेन के GP5 अमीनो एसिड अनुक्रमों का एकाधिक अनुक्रम संरेखण। बैंगनी बक्से सिग्नल पेप्टाइड क्षेत्र को दर्शाते हैं, लाल बक्से हाइपरवेरिएबल क्षेत्र (HVR1 और 2) को दर्शाते हैं, और पीले बक्से ट्रांसमेम्ब्रेन डोमेन (TM1, 2, और 3) को दर्शाते हैं।

2. जीनोमिक पुनर्संयोजन विश्लेषण ट्रिपल पुनर्संयोजन उत्पत्ति की पुष्टि करता है:

RDP4 और SimPlot सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके विश्लेषण से पता चला कि GX2024 जीनोम में पाँच पुनर्संयोजन ब्रेकपॉइंट हैं, जो ORF1a, ORF1b, ORF3, और ORF4 क्षेत्रों में स्थित हैं:

· ORF1a (1-1868nt) और ORF1b (3565-9392nt) क्षेत्रों ने JXA1-जैसे (L8E) स्ट्रेन के साथ उच्चतम समरूपता दिखाई;

· ORF3 (12688-13172nt) क्षेत्र ने RespPRRS MLV वैक्सीन स्ट्रेन के साथ 90.1% समरूपता दिखाई, जो इसके मूल VR-2332 स्ट्रेन से अधिक है;

· शेष क्षेत्र (1869-3564nt, 9393-12687nt, आदि) NADC30-जैसे (L1C.5) स्ट्रेन के साथ अत्यधिक समरूप थे, जिससे इसकी ट्रिपल पुनर्संयोजन स्ट्रेन के रूप में पुष्टि हुई।

तालिका 1. GX2024 और 11 PRRSV संदर्भ स्ट्रेन के बीच न्यूक्लियोटाइड पहचान की तुलना

तालिका 2. GX2024 में पता चली पुनर्संयोजन घटना की जानकारी

चित्र 3. GX2024 आइसोलेट का जीनोमिक पुनर्संयोजन विश्लेषण

3. रोगजनकता प्रयोग: 100% घातक दर उच्च जोखिम को उजागर करती है

PRRSV एंटीबॉडी के बिना 9 चार सप्ताह के सूअरों (5 को चुनौती दी गई, 4 नियंत्रण) पर एक चुनौती प्रयोग आयोजित किया गया:

· चुनौती दिए गए सूअरों में तीसरे दिन 40℃ से ऊपर उच्च बुखार विकसित हुआ, और चौथे से 14वें दिन तक श्वसन संकट, एटैक्सिया और दस्त जैसे लक्षण दिखाई दिए। सभी सूअरों की 14 दिनों के भीतर मृत्यु हो गई (मृत्यु दर 100%); नियंत्रण समूह में कोई असामान्यताएं नहीं दिखाई दीं।

चित्र 4. सूअरों में PRRSV आइसोलेट GX2024 का रोगजनकता विश्लेषण

(a) इस अध्ययन का पशु प्रयोग डिजाइन। (b) GX2024 और RPMI-1640 माध्यम से असंक्रमित सूअरों का मलाशय तापमान। नैदानिक बुखार के लिए कटऑफ मान 40.0℃ पर सेट किया गया था। (c) चुनौती प्रयोग के दौरान तीसरे, सातवें, 10वें और 14वें दिन नैदानिक लक्षण स्कोर। स्कोर में नैदानिक लक्षण, श्वसन लक्षण और न्यूरोलॉजिकल लक्षण शामिल थे। (d) टीका लगाए गए सूअरों के जीवित रहने और मृत्यु दर वक्र। (e) चुनौती प्रयोग के दौरान टीका लगाए गए सूअरों का औसत साप्ताहिक वजन बढ़ना।

रोग संबंधी परीक्षा में चुनौती दिए गए सूअरों के फेफड़ों के ऊतकों में गंभीर समेकन, एडिमा और रक्तस्राव, एल्वियोलर सेप्टा का मोटा होना, उपकला कोशिका नेक्रोसिस, लिम्फ नोड्स के कॉर्टेक्स और मेडुला के बीच धुंधली सीमाएं, कम लिम्फोसाइट्स और रक्तस्राव दिखाया गया; इम्यूनोहिस्टोकैमिस्ट्री ने फेफड़ों और लिम्फ नोड्स में बड़ी मात्रा में PRRSV एंटीजन की उपस्थिति की पुष्टि की।

चित्र 5. टीका लगाए गए सूअरों में फेफड़ों और लिम्फ नोड के घावों का अवलोकन

• वायरल लोड का पता लगाने से पता चला कि सीरम वायरल लोड चुनौती के 7 दिन बाद अपने चरम पर पहुंच गया, और फेफड़ों के ऊतकों में वायरल लोड अन्य ऊतकों की तुलना में काफी अधिक था। इसके अलावा, सभी चुनौती दिए गए सूअरों ने 7 दिनों के भीतर PRRSV-विशिष्ट एंटीबॉडी का उत्पादन किया (S/P>0.4)।

चित्र 6. सीरम और ऊतकों में वायरल लोड और पोर्सिन रिप्रोडक्टिव एंड रेस्पिरेटरी सिंड्रोम वायरस (PRRSV) विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाना

सारांश

यह अध्ययन पहली बार एक अत्यधिक रोगजनक L1C.5 RFLP-1-4-4 PRRSV स्ट्रेन की रिपोर्ट करता है जो एक जंगली प्रकार के स्ट्रेन और एक वैक्सीन स्ट्रेन से पुनर्संयोजित है, जो सूअरों के लिए बेहद घातक है। इस स्ट्रेन का उद्भव वर्तमान PRRS वैक्सीन नियंत्रण रणनीतियों के लिए एक गंभीर चुनौती प्रस्तुत करता है, जो मजबूत वायरस निगरानी, अनुकूलित वैक्सीन डिजाइन, और जैव सुरक्षा और एकीकृत रोकथाम और नियंत्रण उपायों पर जोर देने की आवश्यकता को उजागर करता है।