Em 2 de julho de 2025, uma equipe liderada por Zhang Zhidong e Zhou Long, da Faculdade de Ciências Animais e Medicina Veterinária da Universidade do Sudoeste para Nacionalidades, em colaboração com a Academia de Ciências Animais de Sichuan, publicou sua mais recente pesquisa na revista internacional *Frontiers in Veterinary Science*, relatando uma nova cepa do vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV), denominada GX2024, resultante da hibridização de um vírus selvagem e uma vacina de vírus vivo modificado (MLV). Essa cepa foi isolada de uma granja na província de Sichuan, China, e exibiu patogenicidade extremamente alta (100% de mortalidade) em leitões.
Destaques da Pesquisa
• Primeira descoberta das características altamente virulentas da cepa recombinante PRRSV do tipo L1C.5 RFLP-1-4-4 na China
• Esta cepa foi recombinada a partir de três fontes: uma cepa selvagem semelhante à NADC30 (L1C.5) + uma cepa altamente patogênica semelhante à JXA1 (L8E) + uma cepa de vacina viva comercial RespPRRS MLV (L5A)
• A infecção de leitões causou febre alta (40–42°C), hemorragia pulmonar grave e edema, e todos os leitões morreram em 14 dias.
• Isso demonstra que as vacinas MLV atuais representam um risco de recombinação e fuga imunológica em áreas endêmicas de vírus selvagens.
Em 2024, uma equipe de pesquisa descobriu abortos e natimortos em porcas e mortalidade aguda em leitões em uma granja em Sichuan. O isolamento celular e a análise de sequenciamento do genoma completo confirmaram que a nova cepa GX2024 pertence ao tipo L1C.5 da linhagem PRRSV-2.
Análises genéticas adicionais revelaram que esta cepa é um novo vírus recombinante múltiplo, co-recombinado a partir de uma cepa selvagem semelhante à NADC30, uma cepa altamente patogênica semelhante à JXA1 e uma cepa de vacina de vírus vivo modificado (MLV).
Experimentos de desafio em animais mostraram que o GX2024 é altamente patogênico; os leitões infectados morreram em um curto período, exibindo pneumonia hemorrágica grave e edema pulmonar, linfonodos significativamente aumentados e hemorrágicos, um rápido aumento da carga viral e um aumento significativo nos níveis de anticorpos séricos.
Introdução
A síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRS) é uma das doenças virais mais destrutivas na indústria suína global. Nos últimos anos, a cepa semelhante à NADC30 (L1C) tornou-se gradualmente a cepa circulante dominante em granjas chinesas, enquanto o surgimento do tipo RFLP 1–4-4 atraiu a atenção global.
Devido à coexistência de diferentes linhagens de cepas e vacinas vivas, os eventos de recombinação genética do PRRSV são frequentes, levando a mutações virais complexas e dificuldades no controle da vacina.
Resultados da Pesquisa
1. Isolamento e identificação da nova cepa GX2024:
· O tecido pulmonar de leitões que apresentavam sintomas respiratórios graves foi coletado de uma granja em Sichuan que havia sido vacinada com a vacina RespPRRS MLV. A cepa PRRSV GX2024 foi isolada usando células Marc-145 e macrófagos alveolares suínos (iPAMs), com um genoma completo de 15018 nt (número de acesso GenBank: PV362838).
Figura 1. Isolamento do vírus PRRSV GX2024
(a) Células iPAM e Marc-145 foram inoculadas com PRRSV GX2024 e detectadas 60 horas após a infecção; (b) O ensaio de placa do isolado GX2024 foi realizado usando células iPAM com uma diluição de 10⁻¹⁰ da solução estoque do vírus; (c) Células iPAM e Marc-145 foram infectadas com cultura viral de sexta geração por 48 horas, e a IFA foi realizada usando anticorpo monoclonal anti-N PRRSV. Os núcleos celulares foram corados com DAPI. Barra de escala = 75 μm.
• O gene NSP2 desta cepa tem uma deleção descontínua de 131 aminoácidos, consistente com a cepa NADC30 (111 aa deletados nas posições 322-432, 1 aa deletado na posição 483 e 19 aa deletados nas posições 504-522), e a proteína GP5 tem mutações únicas de aminoácidos (P¹⁵→L¹⁵, F²³→S²³, etc.), que são significativamente diferentes das cepas L1C em casa e no exterior.
Figura 2. Alinhamento múltiplo de sequência de aminoácidos de NSP2 e GP5
(a) Três deleções descontínuas (regiões azuis) existem nas posições de aminoácidos 322–432, 483 e 504–522 em NSP2 de GX2024 e cepas semelhantes a NADC30. As regiões em vermelho claro indicam deleções de aminoácidos no vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína altamente patogênico (HP-PRRSV, cepa semelhante a JXA1). (b) Alinhamento múltiplo de sequência das sequências de aminoácidos GP5 da cepa GX2024 e 17 cepas de referência PRRSV L1C da China e dos Estados Unidos. Caixas roxas indicam regiões de peptídeos sinal, caixas vermelhas indicam regiões hipervariáveis (HVR1 e 2) e caixas amarelas indicam domínios transmembranares (TM1, 2 e 3).
2. A análise de recombinação genômica confirma a origem da tripla recombinação:
A análise usando o software RDP4 e SimPlot revelou cinco pontos de interrupção de recombinação no genoma GX2024, localizados nas regiões ORF1a, ORF1b, ORF3 e ORF4:
· As regiões ORF1a (1-1868nt) e ORF1b (3565-9392nt) mostraram a maior homologia com a cepa semelhante a JXA1 (L8E);
· A região ORF3 (12688-13172nt) mostrou 90,1% de homologia com a cepa da vacina RespPRRS MLV, maior do que sua cepa parental VR-2332;
· As regiões restantes (1869-3564nt, 9393-12687nt, etc.) foram altamente homólogas com a cepa semelhante a NADC30 (L1C.5), confirmando-a como uma cepa de tripla recombinação.
Tabela 1. Comparação da identidade de nucleotídeos entre GX2024 e 11 cepas de referência PRRSV
Tabela 2. Informações sobre o evento de recombinação detectado em GX2024
Figura 3. Análise de recombinação genômica do isolado GX2024
3. Experimento de patogenicidade: 100% de letalidade destaca alto risco
Um experimento de desafio foi conduzido em 9 leitões de quatro semanas de idade sem anticorpos PRRSV (5 desafiados, 4 controles):
· Os leitões desafiados desenvolveram febre alta acima de 40℃ no dia 3, e sintomas como dificuldade respiratória, ataxia e diarreia apareceram nos dias 4-14. Todos os leitões morreram em 14 dias (taxa de mortalidade de 100%); o grupo controle não apresentou anormalidades.
Figura 4. Análise de patogenicidade do isolado PRRSV GX2024 em leitões
(a) Desenho experimental animal deste estudo. (b) Temperatura retal de leitões inoculados com GX2024 e não infectados com meio RPMI-1640. O valor de corte para febre clínica foi definido em 40,0℃. (c) Pontuações dos sintomas clínicos nos dias 3, 7, 10 e 14 durante o experimento de desafio. As pontuações incluíram sintomas clínicos, sintomas respiratórios e sintomas neurológicos. (d) Curvas de sobrevivência e mortalidade de leitões inoculados. (e) Ganho médio de peso semanal de leitões inoculados durante o experimento de desafio.
O exame patológico mostrou consolidação grave, edema e hemorragia no tecido pulmonar de leitões desafiados, espessamento dos septos alveolares, necrose das células epiteliais, limites borrados entre o córtex e a medula dos linfonodos, diminuição dos linfócitos e hemorragia; a imuno-histoquímica confirmou a presença de grandes quantidades de antígeno PRRSV nos pulmões e linfonodos.
Figura 5. Observação de lesões pulmonares e de linfonodos em leitões inoculados
• A detecção da carga viral mostrou que a carga viral sérica atingiu seu pico 7 dias após o desafio, e a carga viral no tecido pulmonar foi significativamente maior do que em outros tecidos. Além disso, todos os leitões desafiados produziram anticorpos específicos para PRRSV em 7 dias (S/P>0,4).
Figura 6. Carga viral no soro e tecidos e detecção de anticorpos específicos para o vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV)
Resumo
Este estudo relata pela primeira vez uma cepa PRRSV L1C.5 RFLP-1-4-4 altamente patogênica recombinada a partir de uma cepa selvagem e uma cepa de vacina, que é extremamente letal para leitões. O surgimento desta cepa representa um sério desafio para as atuais estratégias de controle de vacinas PRRS, destacando a necessidade de vigilância viral reforçada, design de vacinas otimizado e ênfase na biossegurança e medidas integradas de prevenção e controle.
Por favor verifique seu email!