أخبار الشركة عن تم اكتشاف فيروس متلازمة الجهاز التنفسي والتناسلي الخنزيري الجديد L1A/C RFLP 1-3-4 في الصين، مما تسبب في

متلازمة العسر التنفسي التناسلي للخنازير (PRRS)، التي يسببها فيروس PRRS، هي واحدة من أكثر أمراض الخنازير تدميراً في جميع أنحاء العالم. في السنوات الأخيرة، انتشرت سلالات متعددة من السلالة 1 على نطاق واسع في الولايات المتحدة، في حين أن سلالات L1 RFLP 1-3-4 تم الإبلاغ عنها بشكل أقل شيوعًا في الصين.

في الآونة الأخيرة، نشر باحثون من جامعة تيانجين الزراعية وجامعة تيانجين للطب الصيني التقليدي بشكل مشترك دراسة في Elsevier حول متغير PRRSV المؤتلف بنمط L1A/C RFLP 1–3–4 وحللوا جينومه.

مقدمة

متلازمة العسر التنفسي التناسلي للخنازير (PRRS) هو مرض معد خطير يسببه فيروس PRRS. وينقسم إلى نوعين رئيسيين، النوع الأوروبي والأمريكي الشمالي. تُستخدم أنظمة تصنيف RFLP والسلالات بشكل شائع لتحليل التنوع الوراثي لـ PRRSV-2. السلالة 1 (L1) منتشرة في الولايات المتحدة، مع أنماط RFLP شائعة من 1-3-4 و 1-4-4 و 1-7-4. في الصين، تسود سلالة 1-4-4 L1C، لكن نسبتها تتناقص سنويًا. على الرغم من الإبلاغ عنها بشكل أقل شيوعًا، إلا أن 1-3-4 لها خصائص استعمار معوية فريدة وقد تصبح سلالة مهيمنة جديدة، مما يشكل تهديدًا خطيرًا لصناعة الخنازير.

نتائج البحث

1. عزل L1 PRRSV من الخنازير الصغيرة المصابة بالإسهال في مزارع الخنازير في تيانجين

من مايو إلى يونيو 2024، تم جمع عينات مصل الدم من الخنازير الصغيرة المرضعة في ثلاث مزارع خنازير في تيانجين بعد إصابتها بإسهال حاد. كانت عينات مصل الدم إيجابية لـ L1 PRRSV باستخدام عزل خلايا PAM وسلبية للعديد من فيروسات الخنازير الشائعة. أظهرت العزلات تجميعًا وتفتتًا نموذجيًا للخلايا وتم تنقيتها وتسميتها TJ2401 و TJ2402 و TJ2406. كشف تحليل التألق المناعي عن تألق أخضر، مع قيم TCID₅₀ تبلغ 1×10^6.34 و 1×10^6.25 و 3×10^5.0/0.1 مل على التوالي.

الشكل 1. عزل وتحديد سلالات PRRSV TJ2401 و TJ2402 و TJ2406

(أ-د) بعد 48 ساعة من الإصابة. (هـ-ح) تم وضع علامة عليه باستخدام جسم مضاد لبروتين N. مقياس الرسم، 100 μm.

الخلاصة: تم عزل فيروس متلازمة العسر التنفسي والتناسلي للخنازير (PRRSV) L1 بنجاح من عينات الخنازير الصغيرة المرضعة المصابة بإسهال حاد في تيانجين بين مايو ويونيو 2024. تم تأكيد فوعته العالية من خلال تأثير الخلايا واختبارات التألق المناعي.

2. الخصائص الوراثية وتحليل الأنواع الفرعية لسلالات PRRSV L1 المعزولة

كشف تسلسل الجينوم كامل الطول للعزلات TJ2401 و TJ2402 و TJ2406 عن نمط حذف في NSP2 يتوافق مع النوع الفرعي L1 (يشبه NADC30). كشف تحليل علم الوراثة العرقي للجينوم بأكمله عن علاقة وثيقة مع المجموعة الفرعية L1.8. أدى تحليل RFLP لجين ORF5 إلى تعيين TJ2401 إلى النوع الفرعي L1A، و TJ2402 و TJ2406 إلى النوع الفرعي L1C.

الشكل 2. تسلسلات NSP2 وشجرة علم الوراثة العرقي لـ TJ2401 و TJ2402 و TJ2406

(أ) نمط حذف NSP2 لـ TJ2401 و TJ2402 و TJ2406 مطابق لنمط NADC30.

(ب) العزلات الثلاثة مرتبطة ارتباطًا وثيقًا بـ PRRSV L1.8 (يشبه NADC30).

(ج) ينتمي TJ2401 إلى L1A، بينما ينتمي TJ2402 و TJ2406 إلى L1C.

الخلاصة: جميع العزلات الثلاثة، TJ2401 و TJ2402 و TJ2406، هي L1 (تشبه NADC30) PRRSV، تنتمي إلى الأنواع الفرعية L1A و L1C على التوالي.

3. خصائص إعادة التركيب وتحليل أجزاء الجينات الرئيسية لسلالات PRRSV المعزولة

كشف تحليل إعادة التركيب أن TJ2401 و TJ2402 و TJ2406 أظهرت جميعها خصائص إعادة التركيب. شارك TJ2401 و TJ2402 جزءًا جينيًا مشتركًا (1-1970 nt) من فيروسات L8 (تشبه JXA1)، مما قد يساهم في اعتلالهم السريري المماثل. من ناحية أخرى، كان TJ2406 متماثلًا في المقام الأول لسلالة NADC30 واحتوى على أجزاء مؤتلفة مقيدة.

الشكل 3. شجرة علم الوراثة العرقي مبنية على أساس جينومات PRRSV التمثيلية

الخلاصة: جميع عزلات PRRSV الثلاثة هي سلالات مؤتلفة. يشارك TJ2401 و TJ2402 جزء L8، مما قد يؤدي إلى اعتلال سريري مماثل.

4. تحليل العلامات السريرية وديناميكيات الفيروس للعزلات الثلاثة في الخنازير الصغيرة

أظهرت الخنازير الصغيرة التي تم تلقيحها بـ TJ2401 أو TJ2402 أو TJ2406 ارتفاعًا في درجة حرارة الجسم والإسهال الشديد وزيادة في درجات الأعراض السريرية وانخفاضًا في زيادة الوزن اليومية والتحول المصلي في اليوم الحادي عشر. تم رفع الأحمال الفيروسية في المصل والمسحات الشرجية بشكل كبير، بينما لم تظهر المجموعة الضابطة أي أعراض أو اختبارات فيروسية إيجابية.

الشكل 4. المؤشرات السريرية والنتائج الفيروسية والمناعية في الخنازير الصغيرة

(أ) الخنازير الصغيرة التي تم تلقيحها بـ TJ2401 أو TJ2402 أو TJ2406 كان لديها جميعًا درجات حرارة مرتفعة في الجسم.

(ب) انخفضت زيادة الوزن اليومية للخنازير الصغيرة بشكل كبير.

(ج) في اليوم الحادي عشر بعد الإصابة، حققت الخنازير الصغيرة تحولًا مصليًا لأجسام مضادة PRRS (العتبة 0.4).

(د) زاد الحمل الفيروسي في المصل بعد 5 أيام من الإصابة وبلغ ذروته في اليوم الحادي عشر.

(هـ) كان الحمل الفيروسي في المسحات الشرجية متسقًا مع الحمل الفيروسي في المصل.

(و) كان الفيروس موجودًا في أنسجة متعددة، وأبرزها في الأمعاء.

الخلاصة: تسببت TJ2401 و TJ2402 و TJ2406 جميعها في ظهور علامات سريرية كبيرة والتهابات فيروسية في الخنازير الصغيرة، بينما لم يتم ملاحظة أي تشوهات في المجموعة الضابطة.

5. تحليل مقارن لعزلات PRRSV على علم الأمراض الرئوي والمعوي في الخنازير الصغيرة

تم قتل الخنازير الصغيرة في جميع المجموعات الثلاث بشكل إنساني في اليوم الحادي والعشرين بعد الإصابة لتشريح الجثة. أظهرت النتائج أن الخنازير الصغيرة المصابة بـ TJ2401 أو TJ2402 أو TJ2406 أصيبت جميعها بالتهاب رئوي خلالي، وتصلب الرئة ونزيف، وكانت درجات الآفة أعلى بكثير من تلك الموجودة في المجموعة غير المصابة. أظهرت مجموعات العدوى TJ2401 و TJ2402 أيضًا ترققًا في جدار الأمعاء ومحتويات معوية مائية وتضخمًا في الغدد الليمفاوية المساريقية، بينما لم تظهر مجموعة TJ2406 أي آفات معوية واضحة. أظهر الفحص المجهري أن الحواجز السنخية للخنازير الصغيرة المصابة بسلالات الفيروس الثلاثة كانت سميكة وزادت درجات الآفات المجهرية في الرئة. من حيث علم الأمراض المعوي، أظهرت مجموعات TJ2401 و TJ2402 تقشرًا ظهاريًا معويًا وتسللًا لمفاوياً، بينما لم تظهر مجموعة TJ2406 والمجموعة الضابطة أي آفات واضحة.

الشكل 4. الضرر النسيجي الكلي والمجهري في عينات الرئة والأمعاء.

(أ) أدت عدوى TJ2401 و TJ2402 و TJ2406 إلى إصابات رئوية كبيرة وتسلل ملحوظ للخلايا الالتهابية.

(ب) تسببت TJ2401 و TJ2402 في كل من إصابات الرئة والأمعاء، بينما لم يتم ملاحظة أي إصابات كبيرة في المجموعة غير المصابة.

الخلاصة: تسببت TJ2401 و TJ2402 في إصابات رئوية ومعوية كبيرة في الخنازير الصغيرة، بينما تسببت TJ2406 في المقام الأول في إصابات الرئة دون أي تشوهات معوية كبيرة.

ملخص

وجدت هذه الدراسة أن L1A TJ2401 و L1C TJ2402 تسببا في عدوى معوية شديدة، بينما تسبب TJ2406 فقط في التهاب رئوي خلالي. يشير هذا إلى أن مسببات الأمراض لـ PRRSV التي تشبه NADC30 معقدة وأن اللقاحات محدودة في فعاليتها. من الضروري تعزيز المراقبة والتعديل في الوقت المناسب لاستراتيجيات المكافحة.