कंपनी की खबर चीन में एक उपन्यास L1A/C RFLP 1-3-4 सूअरों के प्रजनन और श्वसन सिंड्रोम वायरस की खोज की गई है, जिससे गंभीर बीमारी हो रही है।

पोर्सिन प्रजनन और श्वसन सिंड्रोम (PRRS), जो PRRS वायरस के कारण होता है, दुनिया भर में सबसे विनाशकारी सूअर रोगों में से एक है। हाल के वर्षों में, वंश 1 के कई उपभेद संयुक्त राज्य अमेरिका में व्यापक रूप से प्रचलित रहे हैं, जबकि L1 RFLP 1-3-4 उपभेदों को चीन में कम रिपोर्ट किया गया है।

हाल ही में, तियानजिन कृषि विश्वविद्यालय और तियानजिन पारंपरिक चीनी चिकित्सा विश्वविद्यालय के शोधकर्ताओं ने संयुक्त रूप से एल्सवियर में एक अध्ययन प्रकाशित किया, जिसमें L1A/C RFLP 1–3–4 पैटर्न के साथ एक पुनर्संयोजन PRRSV संस्करण पर चर्चा की गई और इसके जीनोम का विश्लेषण किया गया।

परिचय

पोर्सिन प्रजनन और श्वसन सिंड्रोम (PRRS) एक गंभीर संक्रामक रोग है जो PRRS वायरस के कारण होता है। इसे दो प्रमुख जीनोटाइप में विभाजित किया गया है, यूरोपीय और उत्तरी अमेरिकी प्रकार। RFLP और वंश वर्गीकरण प्रणालियों का उपयोग आमतौर पर PRRSV-2 की आनुवंशिक विविधता का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है। वंश 1 (L1) संयुक्त राज्य अमेरिका में प्रचलित है, जिसमें 1-3-4, 1-4-4 और 1-7-4 के सामान्य RFLP पैटर्न हैं। चीन में, 1-4-4 L1C तनाव प्रमुख है, लेकिन इसका अनुपात सालाना घट रहा है। हालांकि कम रिपोर्ट किया गया है, 1-3-4 में अद्वितीय आंतों के उपनिवेशण लक्षण हैं और यह एक नया प्रमुख तनाव बन सकता है, जो सुअर उद्योग के लिए एक गंभीर खतरा पैदा करता है।

अनुसंधान परिणाम

1. तियानजिन सुअर फार्मों में दस्त वाले सूअरों से L1 PRRSV का अलगाव

मई से जून 2024 तक, गंभीर दस्त के बाद तीन तियानजिन सुअर फार्मों में सूअर के बच्चों से सीरम के नमूने एकत्र किए गए। PAM सेल अलगाव का उपयोग करके L1 PRRSV के लिए सीरम के नमूने सकारात्मक थे और कई सामान्य पोर्सिन वायरस के लिए नकारात्मक थे। आइसोलेट्स ने विशिष्ट सेल एकत्रीकरण और विखंडन का प्रदर्शन किया और उन्हें शुद्ध किया गया और TJ2401, TJ2402 और TJ2406 नाम दिया गया। प्रतिरक्षी फ्लोरोसेंट विश्लेषण ने हरे रंग की प्रतिदीप्ति का खुलासा किया, जिसमें TCID₅₀ मान 1×10^6.34, 1×10^6.25 और 3×10^5.0/0.1 mL थे।

चित्र 1. PRRSV उपभेदों TJ2401, TJ2402 और TJ2406 का अलगाव और पहचान

(A-D) संक्रमण के 48 घंटे बाद। (E-H) एंटी-एन प्रोटीन एंटीबॉडी के साथ लेबल किया गया। स्केल बार, 100 μm।

निष्कर्ष: पोर्सिन प्रजनन और संक्रामक सिंड्रोम वायरस (PRRSV) L1 को मई और जून 2024 के बीच तियानजिन में गंभीर दस्त वाले सूअर के बच्चों के नमूनों से सफलतापूर्वक अलग किया गया था। इसकी उच्च विषाणुता की पुष्टि साइटोपैथिक प्रभाव और प्रतिरक्षी फ्लोरोसेंट परीक्षणों द्वारा की गई थी।

2. पृथक PRRSV L1 उपभेदों की आनुवंशिक विशेषताएं और उपप्रकार विश्लेषण

आइसोलेट्स TJ2401, TJ2402 और TJ2406 के पूर्ण-लंबाई वाले जीनोम अनुक्रमण ने NSP2 में L1 (NADC30-जैसे) उपप्रकार के अनुरूप एक विलोपन पैटर्न का खुलासा किया। पूरे जीनोम फाइलोजेनेटिक विश्लेषण ने L1.8 उपसमूह के साथ घनिष्ठ संबंध का खुलासा किया। ORF5 जीन का RFLP विश्लेषण TJ2401 को L1A उपप्रकार और TJ2402 और TJ2406 को L1C उपप्रकार को सौंपा।

चित्र 2. TJ2401, TJ2402 और TJ2406 के NSP2 अनुक्रम और फाइलोजेनेटिक ट्री

(A) TJ2401, TJ2402 और TJ2406 का NSP2 विलोपन पैटर्न NADC30 के समान है।

(B) तीनों आइसोलेट्स L1.8 (NADC30-जैसे) PRRSV से निकटता से संबंधित हैं।

(C) TJ2401 L1A से संबंधित है, जबकि TJ2402 और TJ2406 L1C से संबंधित हैं।

निष्कर्ष: तीनों आइसोलेट्स, TJ2401, TJ2402 और TJ2406, क्रमशः L1A और L1C उपप्रकारों से संबंधित L1 (NADC30-जैसे) PRRSV हैं।

3. पृथक PRRSV उपभेदों के प्रमुख जीन खंडों की पुनर्संयोजन विशेषताएं और विश्लेषण

पुनर्संयोजन विश्लेषण से पता चला कि TJ2401, TJ2402 और TJ2406 सभी ने पुनर्संयोजन विशेषताओं का प्रदर्शन किया। TJ2401 और TJ2402 ने L8 (JXA1-जैसे) वायरस से एक सामान्य जीन खंड (1-1970 nt) साझा किया, जो संभावित रूप से उनकी समान नैदानिक रोगजनकता में योगदान देता है। दूसरी ओर, TJ2406 मुख्य रूप से NADC30 तनाव के लिए समरूप था और इसमें प्रतिबंधित पुनर्संयोजन खंड शामिल थे।

चित्र 3. प्रतिनिधि PRRSV जीनोम के आधार पर निर्मित फाइलोजेनेटिक ट्री

निष्कर्ष: तीनों PRRSV आइसोलेट्स पुनर्संयोजन उपभेद हैं। TJ2401 और TJ2402 L8 खंड साझा करते हैं, जिसके परिणामस्वरूप संभावित रूप से समान नैदानिक रोगजनकता होती है।

4. सूअरों में तीन आइसोलेट्स के नैदानिक लक्षणों और वायरल गतिशीलता का विश्लेषण

TJ2401, TJ2402 या TJ2406 के साथ टीका लगाए गए सूअरों में शरीर का तापमान बढ़ा, गंभीर दस्त, और नैदानिक लक्षण स्कोर में वृद्धि, दैनिक वजन में कमी, और दिन 11 पर सीरोकोनवर्जन हुआ। सीरम और गुदा स्वाब वायरल लोड काफी बढ़ गए, जबकि नियंत्रण समूह में कोई लक्षण या सकारात्मक वायरल परीक्षण नहीं दिखा।

चित्र 4. सूअरों में नैदानिक संकेतक और वायरोलॉजिकल और इम्यूनोलॉजिकल परीक्षण परिणाम

(A) TJ2401, TJ2402 या TJ2406 के साथ टीका लगाए गए सूअरों में सभी का शरीर का तापमान बढ़ा हुआ था।

(B) सूअरों का दैनिक वजन बढ़ना काफी कम हो गया।

(C) संक्रमण के बाद 11वें दिन, सूअरों ने PRRS एंटीबॉडी का सीरोकोनवर्जन हासिल किया (थ्रेशोल्ड 0.4)।

(D) सीरम वायरल लोड संक्रमण के 5 दिन बाद बढ़ा और 11वें दिन चरम पर पहुंच गया।

(E) गुदा स्वाब में वायरल लोड सीरम वायरल लोड के अनुरूप था।

(F) वायरस कई ऊतकों में मौजूद था, सबसे प्रमुख रूप से आंत में।

निष्कर्ष: TJ2401, TJ2402 और TJ2406 सभी ने सूअरों में महत्वपूर्ण नैदानिक लक्षण और वायरल संक्रमण को प्रेरित किया, जबकि नियंत्रण समूह में कोई असामान्यताएं नहीं देखी गईं।

5. सूअरों में फेफड़े और आंतों की विकृति पर PRRSV आइसोलेट्स का तुलनात्मक विश्लेषण

तीनों समूहों के सूअरों को शव परीक्षण के लिए संक्रमण के 21 दिन बाद मानवीय रूप से इच्छामृत्यु दी गई। परिणामों से पता चला कि TJ2401, TJ2402 या TJ2406 से संक्रमित सूअरों में सभी में इंटरस्टिशियल निमोनिया, फेफड़ों का समेकन और रक्तस्राव हुआ, और घाव के स्कोर गैर-संक्रमित समूह की तुलना में काफी अधिक थे। TJ2401 और TJ2402 संक्रमण समूहों में आंतों की दीवार का पतला होना, जलीय आंतों की सामग्री और बढ़े हुए मेसेन्टेरिक लिम्फ नोड्स भी दिखाई दिए, जबकि TJ2406 समूह में कोई स्पष्ट आंतों के घाव नहीं दिखाई दिए। सूक्ष्म परीक्षण से पता चला कि तीन वायरस उपभेदों से संक्रमित सूअरों के वायुकोशीय सेप्टा मोटे थे और फेफड़ों के सूक्ष्म घाव के स्कोर बढ़ गए थे। आंतों की विकृति के संदर्भ में, TJ2401 और TJ2402 समूहों में आंतों के उपकला का क्षरण और लिम्फोसाइटिक घुसपैठ दिखाई दी, जबकि TJ2406 समूह और नियंत्रण समूह में कोई स्पष्ट घाव नहीं दिखाई दिए।

चित्र 4. फेफड़े और आंतों के नमूनों में मैक्रोस्कोपिक और माइक्रोस्कोपिक हिस्टोलॉजिकल क्षति।

(A) TJ2401, TJ2402 और TJ2406 संक्रमण के परिणामस्वरूप फेफड़ों में महत्वपूर्ण घाव और प्रमुख भड़काऊ कोशिका घुसपैठ हुई।

(B) TJ2401 और TJ2402 ने फेफड़ों और आंतों दोनों में घाव पैदा किए, जबकि गैर-संक्रमित समूह में कोई महत्वपूर्ण घाव नहीं देखा गया।

निष्कर्ष: TJ2401 और TJ2402 ने सूअरों में फेफड़ों और आंतों में महत्वपूर्ण घाव पैदा किए, जबकि TJ2406 ने मुख्य रूप से फेफड़ों के घाव पैदा किए, जिसमें कोई महत्वपूर्ण आंतों की असामान्यताएं नहीं थीं।

सारांश

इस अध्ययन में पाया गया कि L1A TJ2401 और L1C TJ2402 ने गंभीर आंतों का संक्रमण पैदा किया, जबकि TJ2406 ने केवल इंटरस्टिशियल निमोनिया पैदा किया। इससे पता चलता है कि NADC30-जैसे PRRSV की रोगजनकता जटिल है और टीके अपनी प्रभावशीलता में सीमित हैं। निगरानी को मजबूत करना और नियंत्रण रणनीतियों का समय पर समायोजन आवश्यक है।