notizie sull'azienda Un nuovo virus della sindrome riproduttiva e respiratoria suina (PRRSV) L1A/C RFLP 1-3-4 è stato scoperto in Cina, causando gravi danni.

La sindrome riproduttiva e respiratoria suina (PRRS), causata dal virus PRRS, è una delle malattie suine più devastanti a livello mondiale. Negli ultimi anni, diversi ceppi del lignaggio 1 sono stati ampiamente diffusi negli Stati Uniti, mentre i ceppi L1 RFLP 1-3-4 sono stati segnalati meno frequentemente in Cina.

Recentemente, ricercatori della Tianjin Agricultural University e della Tianjin University of Traditional Chinese Medicine hanno pubblicato congiuntamente uno studio su Elsevier su una variante ricombinante di PRRSV con un pattern L1A/C RFLP 1–3–4 e hanno analizzato il suo genoma.

Introduzione

La sindrome riproduttiva e respiratoria suina (PRRS) è una grave malattia infettiva causata dal virus PRRS. È divisa in due genotipi principali, i tipi europeo e nordamericano. I sistemi di classificazione RFLP e lignaggio sono comunemente usati per analizzare la diversità genetica di PRRSV-2. Il lignaggio 1 (L1) è prevalente negli Stati Uniti, con modelli RFLP comuni di 1-3-4, 1-4-4 e 1-7-4. In Cina, predomina il ceppo 1-4-4 L1C, ma la sua proporzione è in calo annualmente. Sebbene meno comunemente segnalato, 1-3-4 ha caratteristiche uniche di colonizzazione intestinale e potrebbe diventare un nuovo ceppo dominante, rappresentando una seria minaccia per l'industria suina.

Risultati della ricerca

1. Isolamento di PRRSV L1 da suinetti con diarrea negli allevamenti di suini di Tianjin

Da maggio a giugno 2024, sono stati prelevati campioni di siero da suinetti lattanti in tre allevamenti di suini di Tianjin dopo grave diarrea. I campioni di siero sono risultati positivi per PRRSV L1 utilizzando l'isolamento cellulare PAM e negativi per diversi virus suini comuni. Gli isolati hanno mostrato tipiche aggregazioni e frammentazioni cellulari e sono stati purificati e denominati TJ2401, TJ2402 e TJ2406. L'analisi di immunofluorescenza ha rivelato fluorescenza verde, con valori TCID₅₀ di 1×10^6.34, 1×10^6.25 e 3×10^5.0/0.1 mL, rispettivamente.

Figura 1. Isolamento e identificazione dei ceppi PRRSV TJ2401, TJ2402 e TJ2406

(A-D) 48 ore dopo l'infezione. (E-H) Etichettati con anticorpo anti-proteina N. Barra di scala, 100 μm.

Conclusione: Il virus della sindrome riproduttiva e infettiva suina (PRRSV) L1 è stato isolato con successo da campioni di suinetti lattanti con grave diarrea a Tianjin tra maggio e giugno 2024. La sua elevata virulenza è stata confermata da saggi di effetto citopatico e immunofluorescenza.

2. Caratteristiche genetiche e analisi dei sottotipi dei ceppi PRRSV L1 isolati

Il sequenziamento del genoma completo degli isolati TJ2401, TJ2402 e TJ2406 ha rivelato un pattern di delezione in NSP2 coerente con il sottotipo L1 (simile a NADC30). L'analisi filogenetica dell'intero genoma ha rivelato una stretta relazione con il sottogruppo L1.8. L'analisi RFLP del gene ORF5 ha assegnato TJ2401 al sottotipo L1A e TJ2402 e TJ2406 al sottotipo L1C.

Figura 2. Sequenze NSP2 e albero filogenetico di TJ2401, TJ2402 e TJ2406

(A) Il pattern di delezione NSP2 di TJ2401, TJ2402 e TJ2406 è identico a quello di NADC30.

(B) I tre isolati sono strettamente correlati al PRRSV L1.8 (simile a NADC30).

(C) TJ2401 appartiene a L1A, mentre TJ2402 e TJ2406 appartengono a L1C.

Conclusione: Tutti e tre gli isolati, TJ2401, TJ2402 e TJ2406, sono PRRSV L1 (simili a NADC30), appartenenti rispettivamente ai sottotipi L1A e L1C.

3. Caratteristiche di ricombinazione e analisi dei segmenti genici chiave dei ceppi PRRSV isolati

L'analisi di ricombinazione ha rivelato che TJ2401, TJ2402 e TJ2406 hanno tutti mostrato caratteristiche di ricombinazione. TJ2401 e TJ2402 hanno condiviso un segmento genico comune (1-1970 nt) dai virus L8 (simili a JXA1), contribuendo potenzialmente alla loro simile patogenicità clinica. TJ2406, d'altra parte, era principalmente omologo al ceppo NADC30 e conteneva segmenti ricombinanti ristretti.

Figura 3. Albero filogenetico costruito sulla base dei genomi PRRSV rappresentativi

Conclusione: Tutti e tre gli isolati PRRSV sono ceppi ricombinanti. TJ2401 e TJ2402 condividono il segmento L8, con conseguente potenziale patogenicità clinica simile.

4. Analisi dei segni clinici e della dinamica virale dei tre isolati nei suinetti

I suinetti inoculati con TJ2401, TJ2402 o TJ2406 hanno sviluppato temperatura corporea elevata, grave diarrea e aumento dei punteggi dei sintomi clinici, diminuzione dell'aumento di peso giornaliero e sieroconversione al giorno 11. I carichi virali nel siero e nei tamponi anali sono stati significativamente elevati, mentre il gruppo di controllo non ha mostrato sintomi o test virali positivi.

Figura 4. Indicatori clinici e risultati dei test virologici e immunologici nei suinetti

(A) I suinetti inoculati con TJ2401, TJ2402 o TJ2406 hanno tutti avuto temperature corporee elevate.

(B) L'aumento di peso giornaliero dei suinetti è stato significativamente ridotto.

(C) Al giorno 11 post-infezione, i suinetti hanno raggiunto la sieroconversione degli anticorpi PRRS (soglia 0,4).

(D) Il carico virale nel siero è aumentato 5 giorni dopo l'infezione e ha raggiunto il picco al giorno 11.

(E) Il carico virale nei tamponi anali era coerente con il carico virale nel siero.

(F) Il virus era presente in più tessuti, in particolare nell'intestino.

Conclusione: TJ2401, TJ2402 e TJ2406 hanno tutti indotto significativi segni clinici e infezione virale nei suinetti, mentre non sono state osservate anomalie nel gruppo di controllo.

5. Analisi comparativa degli isolati PRRSV sulla patologia polmonare e intestinale nei suinetti

I suinetti in tutti e tre i gruppi sono stati sottoposti a eutanasia umana al giorno 21 post-infezione per la necroscopia. I risultati hanno mostrato che i suinetti infettati con TJ2401, TJ2402 o TJ2406 hanno tutti sviluppato polmonite interstiziale, consolidamento ed emorragia polmonare e i punteggi delle lesioni erano significativamente più alti di quelli del gruppo non infetto. I gruppi di infezione TJ2401 e TJ2402 hanno mostrato anche assottigliamento della parete intestinale, contenuto intestinale acquoso e linfonodi mesenterici ingrossati, mentre il gruppo TJ2406 non ha mostrato lesioni intestinali evidenti. L'esame microscopico ha mostrato che i setti alveolari dei suinetti infettati con i tre ceppi virali erano ispessiti e i punteggi delle lesioni microscopiche polmonari erano aumentati. In termini di patologia intestinale, i gruppi TJ2401 e TJ2402 hanno mostrato desquamazione epiteliale intestinale e infiltrazione linfocitaria, mentre il gruppo TJ2406 e il gruppo di controllo non hanno mostrato lesioni evidenti.

Figura 4. Danno istologico macroscopico e microscopico nei campioni polmonari e intestinali.

(A) L'infezione da TJ2401, TJ2402 e TJ2406 ha causato significative lesioni polmonari e una prominente infiltrazione di cellule infiammatorie.

(B) TJ2401 e TJ2402 hanno causato lesioni sia polmonari che intestinali, mentre non sono state osservate lesioni significative nel gruppo non infetto.

Conclusione: TJ2401 e TJ2402 hanno causato significative lesioni polmonari e intestinali nei suinetti, mentre TJ2406 ha causato principalmente lesioni polmonari senza significative anomalie intestinali.

Riepilogo

Questo studio ha scoperto che L1A TJ2401 e L1C TJ2402 hanno causato una grave infezione intestinale, mentre TJ2406 ha causato solo polmonite interstiziale. Ciò suggerisce che la patogenicità del PRRSV simile a NADC30 è complessa e che i vaccini hanno un'efficacia limitata. Sono necessari una maggiore sorveglianza e un adeguamento tempestivo delle strategie di controllo.