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Blogue sobre Coreia do Sul Testa Nove Kits de PCR para Febre Suína Africana para Segurança de Resíduos Alimentares

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Coreia do Sul Testa Nove Kits de PCR para Febre Suína Africana para Segurança de Resíduos Alimentares
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A sombra da peste suína africana (PSA) está a espalhar-se pela indústria mundial da carne de porco a um ritmo sem precedentes.Não só devasta as populações de suínos, mas também inflige perdas económicas maciças aos setores pecuários em todo o mundo devido à sua taxa de mortalidade de quase 100% e à sua rápida transmissão.O ASFV, um vírus de ADN de cadeia dupla envolto complexo, foi classificado em seis genótipos principais através de sequenciamento genómico avançado,com o gene p72 relativamente conservado servindo como um marcador chave para a diferenciação.

Além da fazenda: a ameaça mais ampla

A pesquisa indica que o VPAP pode propagar-se através de produtos de carne de porco mal cozidos ou contaminados, nomeadamente através de resíduos alimentares reciclados como alimentos para animais,que representam um risco persistente de infecções secundáriasEm resposta, países como a Coreia do Sul implementaram medidas rigorosas, incluindo a proibição do uso de resíduos alimentares na alimentação animal.A vigilância precoce do VPAA nos fluxos de resíduos alimentares tornou-se, portanto, uma prioridade fundamental.

Apesar dos candidatos a vacinas experimentais que visam a deleção de genes específicos, não existe vacina comercialmente viável contra a FAS.Esta ausência sublinha a importância de instrumentos de diagnóstico altamente sensíveis e específicos como base das estratégias de controlo da FPA.

Avanços e desafios no diagnóstico

A Organização Mundial de Saúde Animal (WOAH) recomenda três métodos de diagnóstico baseados em PCR ‒ um teste convencional e dois testes em tempo real ‒ para a triagem de alto rendimento de amostras suspeitas de ASFV.Desde o lançamento das normas WOAH, técnicas avançadas como ELISA, LAMP, PCR multiplex e PCR ultra-sensível em tempo real surgiram.Os resultados dos testes de avaliação de desempenho de equipamentos de segurança e de segurança, em especial dos kits comerciais, devem ser avaliados de forma rigorosa pelos utilizadores finais e pelos reguladores..

Projeto e metodologia do estudo

Para corrigir essa lacuna, os pesquisadores avaliaram sistematicamente nove kits de PCR em tempo real de ASFV aprovados pela MAFRA na Coreia do Sul.O estudo avaliou métricas críticas de desempenhoOs resultados foram comparados com dados anteriores para orientar a selecção de ferramentas de diagnóstico óptimas.

Detalhes metodológicos essenciais:

  • Selecção da amostra:20 amostras de resíduos alimentares selecionadas aleatoriamente a partir de 5.581 amostras negativas para ASFV recolhidas entre 2020 e 2022.
  • Protocolos de segurança:Foram utilizadas sequências sintéticas de ASFV (estirpe HBNH-2019) e vírus de referência (PCV2, PPV, PrV) para eliminar riscos biológicos.
  • Extração de ADN:Realizado com mini kits de ADN QIAamp® após homogeneização de amostras de 1 g.
Destaques de desempenho

Em condições rigorosas (1000 RFU, limiares de Cq específicos do kit), a maioria dos kits detectou ASFV em concentrações inferiores a 1 fg/μL.e MiCo Biosystems alcançaram uma sensibilidade excepcional a 100 ag/μLAplicando um limiar de Cq unificado (< 35), quatro kits mantiveram a detecção a 1 fg/μl, sendo cinco ainda funcionais a 10 fg/μl em condições elevadas de RFU (2500).

Descobertas notáveis:

  • Eficiência dos custos:Seis kits mantiveram custos abaixo de 10.000 KRW por reação.
  • Velocidade:Três kits (Ahram Biosystems, MiCo BioMed, Kogene Biotech) concluíram as análises em 50~70 minutos~1 hora mais rápido do que os protocolos WOAH.
  • Validação:Três kits de melhor desempenho (VDx®, Palm PCRTM, PowerChekTM) mostraram resultados consistentes em vários analistas.
Implicações e limitações

Esta primeira avaliação abrangente dos kits ASFV aprovados pela MAFRA na Coreia do Sul identifica ferramentas ideais para a vigilância dos resíduos alimentares.Avaliação dos custos (<10O sistema de controlo de emissões de gases de efeito estufa é um sistema de controlo de emissões de gases de efeito estufa.

As restrições do estudo incluem a ausência de amostras de campo de animais infectados devido a preocupações de biossegurança e o foco exclusivo nas matrizes de resíduos alimentares.A investigação futura deverá validar estes resultados com diversos tipos de amostras, incluindo amostras clínicas de surtos.

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