El blog sobre Corea del Sur prueba nueve kits de PCR para la peste porcina africana para la seguridad de los residuos alimentarios

La sombra de la peste porcina africana (PPA) se está extendiendo a través de la industria mundial de la carne de cerdo a un ritmo sin precedentes.No sólo devasta a las poblaciones porcinas, sino que también causa enormes pérdidas económicas a los sectores ganaderos de todo el mundo debido a su tasa de mortalidad de casi el 100% y su rápida transmisión.. El ASFV, un virus de ADN de doble hebra envuelto complejo, ha sido clasificado en seis genotipos principales mediante secuenciación genómica avanzada,con el gen p72 relativamente conservado que sirve como un marcador clave para la diferenciación.

El impacto de la peste porcina asiática se extiende mucho más allá de las explotaciones.que plantean un riesgo persistente de infecciones secundariasEn respuesta, países como Corea del Sur han implementado medidas estrictas, incluida la prohibición del uso de residuos alimentarios en la alimentación animal.La vigilancia temprana del VPAA en los flujos de residuos alimentarios se ha convertido así en una prioridad crítica..

A pesar de los candidatos a vacunas experimentales dirigidos a la eliminación de genes específicos, no existe una vacuna comercialmente viable contra la PPA.Esta ausencia subraya la importancia de herramientas de diagnóstico altamente sensibles y específicas como base de las estrategias de control de la PPA.

La Organización Mundial de Sanidad Animal (OMS) recomienda tres métodos de diagnóstico basados en la PCR, uno convencional y dos análisis de PCR en tiempo real, para una detección de alto rendimiento de las muestras sospechosas de ASFV.Desde la publicación de las normas WOAH, han surgido técnicas avanzadas como ELISA, LAMP, PCR múltiple y PCR en tiempo real ultra-sensible.En el caso de los kits comerciales, el rendimiento de los mismos en el mundo real requiere una evaluación rigurosa por parte de los usuarios finales y los reguladores..

Para abordar esta brecha, los investigadores evaluaron sistemáticamente nueve kits de PCR en tiempo real de ASFV aprobados por MAFRA en Corea del Sur.el estudio evaluó las métricas de rendimiento críticasLos resultados se compararon con datos previos para guiar la selección de herramientas de diagnóstico óptimas.

Detalles metodológicos clave:

• Selección de la muestra:20 muestras de residuos alimentarios seleccionadas al azar de 5.581 muestras negativas al ASFV recolectadas entre 2020 y 2022.
• Los protocolos de seguridad:Se utilizaron secuencias sintéticas de ASFV (estirpe HBNH-2019) y virus de referencia (PCV2, PPV, PrV) para eliminar los riesgos de riesgo biológico.
• Extracción de ADN:Se realiza utilizando mini kits de ADN QIAamp® después de la homogeneización de muestras de 1 g.

En condiciones estrictas (1000 RFU, umbrales de Cq específicos del kit), la mayoría de los kits detectaron ASFV a concentraciones inferiores a 1 fg/μL.y MiCo Biosystems alcanzaron una sensibilidad excepcional a 100 ag/μLCuando se aplicó un umbral de Cq unificado (< 35), cuatro kits mantuvieron la detección a 1 fg/μL, y cinco seguían funcionando a 10 fg/μL en condiciones elevadas de RFU (2500).

Resultados notables:

• Eficiencia de los costes:Seis kits mantuvieron los costos por debajo de 10.000 KRW por reacción.
• Velocidad:Tres kits (Ahram Biosystems, MiCo BioMed, Kogene Biotech) completaron los análisis en 50~70 minutos~1 hora más rápido que los protocolos WOAH.
• Validación:Tres kits de alto rendimiento (VDx®, Palm PCRTM, PowerChekTM) mostraron resultados consistentes en múltiples analistas.

Esta primera evaluación exhaustiva de los kits ASFV aprobados por MAFRA en Corea del Sur identifica las herramientas óptimas para la vigilancia de los residuos alimentarios.la disponibilidad económica (<10Los datos obtenidos en el marco de la evaluación de la eficacia de los sistemas de control de la calidad de la energía son los siguientes:

Las limitaciones del estudio incluyen la ausencia de muestras de campo de animales infectados debido a preocupaciones de bioseguridad y un enfoque exclusivo en matrices de residuos de alimentos.Las investigaciones futuras deben validar estos resultados con diversos tipos de muestras, incluidas las muestras clínicas de brotes.