কোম্পানির খবর সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে, আফ্রিকান সোয়াইন ফিবার স্ট্রেনের ক্ষয়ক্ষতি ঘটাতে পারে।

৪ঠা নভেম্বর, ২০২৫ তারিখে, ক্যানাডিয়ান খাদ্য পরিদর্শন সংস্থার (Canadian Food Inspection Agency) ন্যাশনাল সেন্টার ফর এক্সোটিক অ্যানিমেল ডিজিজেস-এর একটি গবেষণা দল *ভাইরাস* জার্নালে একটি নতুন গবেষণা প্রকাশ করেছে, যেখানে মাঝারি ক্ষতিকারক আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাস স্ট্রেন দ্বারা মৌখিক-নাকীয় সংক্রমণের পরে শূকরদের পেরিফেরাল লিম্ফয়েড অঙ্গগুলিতে ভাইরাল জিনোমের বিতরণ গতিবিদ্যা সম্পর্কে জানানো হয়েছে।

গবেষণার প্রধান বিষয়গুলি

* প্রথমবারের মতো, এই গবেষণায় মৌখিক-নাকীয় সংক্রমণের পরে শূকরদের পেরিফেরাল লিম্ফয়েড অঙ্গগুলিতে দুর্বল আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার স্ট্রেন এস্তোনিয়া ২০১৪ (জিনোটাইপ II) এবং মাল্টা’৭৮ (জিনোটাইপ I)-এর ভাইরাল জিনোমের স্থানিক-সাময়িক বিতরণ পদ্ধতিগতভাবে চিত্রিত করা হয়েছে, দুটি স্ট্রেনের মধ্যে পার্থক্য তুলনা করে। এস্তোনিয়া ২০১৪ ভাইরাসটি দ্রুত সনাক্ত করা হয়েছিল এবং এর ফলে শূকরের মৃত্যু দ্রুত হয়েছিল, যেখানে মাল্টা’৭৮-এর বেশি সময় ধরে বাঁচার সম্ভাবনা ছিল।

* এই গবেষণায় নিশ্চিত করা হয়েছে যে সংক্রমণের ২-৩ দিন পরেই সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোডগুলিতে (SILN) ভাইরাল জিনোম সনাক্ত করা যেতে পারে, যা ৫-৯ দিনের মধ্যে শীর্ষে পৌঁছে যায় এবং এটি প্লীহাতে ভাইরাসের পরিমাণের সাথে অত্যন্ত সুসংগত।

* নয়টি মৃত শূকরের ১০০% SILN পজিটিভ ছিল, যার Ct মান প্লীহা নমুনার থেকে এক চক্রেরও কম ভিন্ন ছিল। এটি WOAH-প্রস্তাবিত নমুনাগুলির (নেক্রোপসি প্রয়োজন এবং দূষণের প্রবণতা) ব্যবহারিক চ্যালেঞ্জগুলি সমাধান করেছে, যা অন্ত্র উন্মোচন ছাড়াই প্যাসিভ মনিটরিংয়ের জন্য সোনার মান স্থাপন করেছে।

* জীবিত শূকরগুলি ১০-১৮ ডিপিআই (dpi)-এ ভাইরাস নির্মূলের প্রবণতা দেখিয়েছিল, SILN Ct মান ক্রমাগত বাড়ছিল, যা "পুনরুদ্ধার মূল্যায়নের" জন্য আণবিক প্রমাণ সরবরাহ করে।

* হিস্টোপ্যাথলজি, ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (IHC), এবং ইন সিটু হাইব্রিডাইজেশন (ISH) সমন্বিত একটি ট্রিপল ডায়াগনস্টিক পরীক্ষা প্রকাশ করেছে যে ভাইরাস শুধুমাত্র ম্যাক্রোফেজ/ডেনড্রাইটিক কোষকে সংক্রামিত করে → এই কোষগুলি প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন নিঃসরণ করে → লিম্ফোসাইট, ভাইরাল সংক্রমণ ছাড়াই, অ্যাপোপটোসিস/নেক্রোসিসের শিকার হয় → যা শেষ পর্যন্ত লিম্ফয়েড টিস্যুর ক্ষতি (রক্তক্ষরণজনিত নেক্রোসিস) ঘটায়, যা রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতার আঘাতের পরোক্ষ প্রক্রিয়াকে স্পষ্ট করে।

এই গবেষণায় দুটি মাঝারি ক্ষতিকারক স্ট্রেন, ASFV এস্তোনিয়া ২০১৪ এবং ASFV মাল্টা’৭৮ ব্যবহার করে একটি সিমুলেটেড ফিল্ড কন্টাক্ট ট্রান্সমিশন পদ্ধতি ব্যবহার করে শূকরদের উপর পরীক্ষা চালানো হয়েছে। রক্ত, প্লীহা, টনসিল এবং বিভিন্ন সুপারফিসিয়াল লিম্ফ নোডগুলিতে ভাইরাসের গতিশীল বিতরণ পদ্ধতিগতভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ফলাফল দেখিয়েছে যে সংক্রমণের ২-৩ দিন পর সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোডগুলিতে ভাইরাস সনাক্ত করা যেতে পারে, যা ৫-৯ দিনের মধ্যে শীর্ষে পৌঁছে যায়। গবেষণাটি আরও নিশ্চিত করেছে যে মৃত শূকরদের প্লীহাতে ভাইরাসের জিনোম সামগ্রী SILN (প্লীহা-অন্ত্রের লিম্ফ নোড)-এর সাথে অত্যন্ত সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল, যা আফ্রিকান সোয়াইন ফিভারের জন্য মৃত শূকরদের স্ক্রিনিংয়ের জন্য SILN-কে অত্যন্ত কার্যকরী নমুনা হিসাবে সমর্থন করে।

ভূমিকা

আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার (ASF) বিশ্বব্যাপী দ্রুত বাড়ছে। প্লীহা অপসারণের উপর নির্ভরশীল প্যাসিভ মনিটরিং সময়সাপেক্ষ, শ্রমসাধ্য এবং উচ্চ জৈব নিরাপত্তা ঝুঁকি বহন করে। ক্যানাডিয়ান খাদ্য পরিদর্শন সংস্থার (NCFAD) দল ২০২২ সালে এই ধারণাটি প্রস্তাব করেছিল যে "SILN প্লীহার জায়গা নিতে পারে", তবে প্রাথমিক সংক্রমণের পর্যায়ে এর প্রয়োগযোগ্যতা এবং দুর্বল স্ট্রেনগুলি একইভাবে বিতরণ করা হয় কিনা সে সম্পর্কে ডেটার অভাব রয়েছে। এই গবেষণার লক্ষ্য এই শূন্যতা পূরণ করা।

ফলাফল

১. ভাইরাস সনাক্তকরণের সময়ের পার্থক্য:

ASFV এস্তোনিয়া ২০১৪ দ্বারা সংক্রামিত শূকরগুলিতে সংক্রমণের ২ দিন পর (dpi) ভাইরালকরণ শুরু হয়েছিল, যেখানে ASFV মাল্টা’৭৮ দ্বারা সংক্রামিত শূকরগুলিতে এটি ৩ ডিপিআই থেকে শুরু হয়েছিল; উভয় ভাইরাস ৩ ডিপিআই-এ SILN-এ সনাক্ত করা গিয়েছিল এবং সময়ের সাথে সাথে ভাইরাসের পরিমাণ দ্রুত বৃদ্ধি পেয়েছিল।

চিত্র ১. পৃথক শূকরগুলিতে এস্তোনিয়া ২০১৪ আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাস স্ট্রেনের জিনোমিক বিতরণ (ক-গ) এবং দৈনিক গড় সনাক্তকরণের ফলাফল (গড় Ct মানের স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি সহ) (ঘ-চ)

(ক, ঘ) সম্পূর্ণ রক্ত, প্লীহা এবং টনসিলে বিতরণ দেখায়; (খ, ঙ) সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোড (SILN), ম্যান্ডিবুলার লিম্ফ নোড (SLN), এবং সুপারফিসিয়াল সার্ভিকাল লিম্ফ নোড (SCLN)-এ বিতরণ দেখায়; (গ, চ) পপলিটিয়াল লিম্ফ নোড (PLN), অগ্রবর্তী ফিমোরাল লিম্ফ নোড (PFLN), এবং গ্যাস্ট্রোহেপাটিক লিম্ফ নোড (GHLN)-এ বিতরণ দেখায়। চিত্রে ত্রুটি বারগুলি প্রতিটি সময় বিন্দুতে এবং প্রতিটি নমুনার ধরণের জন্য Ct মানের স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি (SEM) প্রতিনিধিত্ব করে।

২. শীর্ষ এবং নির্মূলের ধরণ:

লিম্ফয়েড অঙ্গগুলিতে ASFV এস্তোনিয়া ২০১৪-এর ভাইরাসের পরিমাণ ৭-৯ ডিপিআই-এ শীর্ষে পৌঁছেছিল, যেখানে ASFV মাল্টা’৭৮-এর ৫-৭ ডিপিআই-এ শীর্ষে পৌঁছেছিল। মৃত শূকরগুলিতে SILN-এর মাত্রা প্লীহার সাথে তুলনীয় ছিল, যেখানে জীবিত শূকরদের পেরিফেরাল লিম্ফয়েড অঙ্গগুলিতে ভাইরাসের পরিমাণ ধীরে ধীরে হ্রাস পেয়েছিল, যা ভাইরাস নির্মূলের ইঙ্গিত দেয়।

চিত্র ২. মাঝারি ক্ষতিকারক এস্তোনিয়া ২০১৪ স্ট্রেন আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাস দ্বারা মৌখিক-নাকীয় ইনোকুলেশনের পরে শূকরছানাগুলির সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোডগুলিতে (SILN) হিস্টোপ্যাথলজিক্যাল পর্যবেক্ষণ এবং ভাইরাস বিতরণ।

ইনোকুলেশনের ৩ দিন পর (৩ ডিপিআই), কোনো উল্লেখযোগ্য হিস্টোপ্যাথলজিক্যাল পরিবর্তন দেখা যায়নি: (ক) ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (IHC) আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাসের (ASFV) অ্যান্টিজেন-এর বিক্ষিপ্ত একক কোষ পজিটিভ দেখিয়েছে (তীর); (খ) ইন সিটু হাইব্রিডাইজেশন (ISH) একই ধরনের বিতরণের সাথে ASFV RNA সনাক্ত করেছে (তীর)।

ইনোকুলেশনের ৪ দিন পর (৪ ডিপিআই), কর্টেক্স এবং কর্টিকমেডুলারি সংযোগস্থলে (ঘ, তীর) বহু কেন্দ্রিক রক্তক্ষরণের ক্ষেত্রগুলি পরিলক্ষিত হয়েছিল। IHC সুস্পষ্ট বিক্ষিপ্ত একক-কোষ পজিটিভ স্টেইনিং প্যাচ দেখিয়েছে (ঙ, তীর), এবং ISH দ্বারা সনাক্ত করা ভাইরাল জিনোমিক উপাদান (চ) একই বিতরণ এবং তীব্রতা দেখিয়েছে।

ইনোকুলেশনের ৫ দিন পর (৫ ডিপিআই), কর্টিকমেডুলারি সংযোগস্থলের (গ, তীর) বরাবর প্রধানত বহু কেন্দ্রিক নেক্রোসিস দেখা যায়। ভাইরাল অ্যান্টিজেন (ঘ) এবং ভাইরাল RNA (i) নেক্রোটিক ক্ষতগুলির সংশ্লিষ্ট ক্ষেত্রগুলিতে এবং টিস্যু জুড়ে বিক্ষিপ্ত ম্যাক্রোফেজ-সদৃশ কোষগুলিতে সনাক্ত করা হয়েছিল।

ইনোকুলেশনের ৭ দিন পর (৭ ডিপিআই), কর্টিকমেডুলারি সংযোগস্থলে এবং কর্টেক্সের বহু কেন্দ্রিক ক্ষেত্র জুড়ে ব্যাপক রক্তক্ষরণ এবং নেক্রোসিস পরিলক্ষিত হয়েছিল (জ, তীর)। কর্টিকমেডুলারি সংযোগস্থলে প্রচুর পরিমাণে আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাসের অ্যান্টিজেন উপস্থিত ছিল এবং কর্টেক্সে কিছু বিক্ষিপ্ত পজিটিভ কোষও পাওয়া গেছে (ক)। আগের সময় বিন্দুর তুলনায়, এই সময়ে ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিডের সনাক্তকরণের মাত্রা হ্রাস পেয়েছে (l)।

ইনোকুলেশনের ৯ দিন পর (৯ ডিপিআই), লিম্ফ নোড জুড়ে ব্যাপক নেক্রোসিস এবং রক্তক্ষরণ পরিলক্ষিত হয়েছিল (m, তীর), যার মধ্যে এন্ডোথেলিয়াল কোষের অবক্ষয়ও অন্তর্ভুক্ত ছিল (m, নেক্রোটিক এলাকার উচ্চতর বিবর্ধন দেখায়)। লিম্ফ নোডের বহু কেন্দ্রিক ক্ষেত্র জুড়ে সনাক্ত করা ভাইরাল অ্যান্টিজেন (n) এবং ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিডের (o) মাত্রা ৭ ডিপিআই-এর তুলনায় কম ছিল। যাইহোক, ভাস্কুলার এন্ডোথেলিয়াল কোষগুলিতে এখনও ভাইরাল অ্যান্টিজেন পরিলক্ষিত হয়েছিল (n, o ইনসেট)।

ইনোকুলেশনের ১১ দিন পর (১১ ডিপিআই), মাঝারি নেক্রোসিস পরিলক্ষিত হয়েছিল (p), কিন্তু ইমিউনোস্টেইনিং উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল (q, r)।

৩. SILN-এর প্রয়োগের মূল্য:

SILN নমুনা সংগ্রহের জন্য ব্যবচ্ছেদ-এর প্রয়োজন হয় না এবং মৃত শূকরগুলিতে ভাইরাস সনাক্তকরণের হার প্লীহার সাথে সঙ্গতিপূর্ণ। এটি প্রাথমিক সংক্রমণের পর্যায়ে (৩ ডিপিআই-এর পরে) স্থিতিশীলভাবে সনাক্ত করা যেতে পারে, যা মৃত শূকরদের স্ক্রিনিংয়ের জন্য একটি আদর্শ বিকল্প নমুনা তৈরি করে।

চিত্র ৩. পৃথক শূকরগুলিতে মাল্টা’৭৮ আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাসের জিনোমিক বিতরণ (ক-গ) এবং গড় দৈনিক সনাক্তকরণের ফলাফল (গড় Ct মানের স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি সহ) (ঘ-চ)

(ক, ঘ) সম্পূর্ণ রক্ত, প্লীহা এবং টনসিলে বিতরণ দেখায়; (খ, ঙ) সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোড (SILN), সাবম্যান্ডিবুলার লিম্ফ নোড (SLN), এবং সুপারফিসিয়াল সার্ভিকাল লিম্ফ নোড (SCLN)-এ বিতরণ দেখায়; (গ, চ) পপলিটিয়াল লিম্ফ নোড (PLN), অগ্রবর্তী ফিমোরাল লিম্ফ নোড (PFLN), এবং গ্যাস্ট্রোহেপাটিক লিম্ফ নোড (GHLN)-এ বিতরণ দেখায়। চিত্রে ত্রুটি বারগুলি প্রতিটি সময় বিন্দুতে Ct মানের স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি (SEM) প্রতিনিধিত্ব করে।

৪. প্যাথলজিক্যাল এবং আণবিক যাচাইকরণ:

ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল এবং ইন সিটু হাইব্রিডাইজেশন ফলাফল নিশ্চিত করেছে যে SILN-এ ভাইরাল অ্যান্টিজেন এবং নিউক্লিক অ্যাসিডের বিতরণের প্রবণতা রিয়েল-টাইম পিসিআর ফলাফলের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ ছিল। সংক্রমণের পরবর্তী পর্যায়ে লিম্ফয়েড টিস্যু নেক্রোসিস এবং রক্তক্ষরণের মতো প্যাথলজিক্যাল পরিবর্তনগুলি পরিলক্ষিত হয়েছিল এবং ভাইরাল নির্মূল প্রক্রিয়া প্যাথলজিক্যাল ক্ষতির মেরামতের সাথে সিঙ্ক্রোনাইজ হয়েছিল।

চিত্র ৪. মাঝারি ক্ষতিকারক মাল্টা’৭৮ স্ট্রেন আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার ভাইরাস দ্বারা মৌখিক-নাকীয় ইনোকুলেশনের পরে শূকরছানাগুলির সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোডগুলিতে (SILN) হিস্টোপ্যাথলজিক্যাল পর্যবেক্ষণ এবং ভাইরাস বিতরণ।

ইনোকুলেশনের ৪ দিন পর (৪ ডিপিআই), HE বিভাগে কোনো সুস্পষ্ট ক্ষত দেখা যায়নি (ক)। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (IHC) (খ, তীর) এবং ইন সিটু হাইব্রিডাইজেশন (ISH) (গ, তীর) দ্বারা বিক্ষিপ্ত, ম্যাক্রোফেজ-সদৃশ একক কোষগুলি পরিলক্ষিত হয়েছিল।

ইনোকুলেশনের ৫ দিন পর (৫ ডিপিআই), মেডুলায় অল্প সংখ্যক ছোট নেক্রোটিক ফোকি পরিলক্ষিত হয়েছিল (ঘ, তীর)। প্রচুর পরিমাণে আফ্রিকান সোয়াইন ফিভার (ASFV) অ্যান্টিজেন (ঙ) এবং ভাইরাল RNA (চ) ম্যাক্রোফেজ এবং ডেনড্রাইটিক কোষের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ আকারযুক্ত কোষগুলিতে সনাক্ত করা হয়েছিল।

ইনোকুলেশনের ৭ দিন পর (৭ ডিপিআই), মেডুলারি নেক্রোসিসের ক্ষেত্রগুলি দেখা যায় (গ, তীর)। ৫ ডিপিআই-এর সাথে তুলনা করে, সনাক্ত করা ASFV অ্যান্টিজেন (ঘ) এবং ভাইরাল RNA-এর (i) পরিমাণ হ্রাস পেয়েছে।

ইনোকুলেশনের ১০ দিন পর (১০ ডিপিআই), প্রধানত কর্টিকো-মেডুলারি সংযোগস্থলে রক্তক্ষরণ এবং নেক্রোসিস পরিলক্ষিত হয়েছিল (জ), দুর্বল ইমিউনোস্টেইনিং সংকেতগুলির সাথে (ক, l)।

ইনোকুলেশনের ১৮ দিন পর (১৮ ডিপিআই), SILN টিস্যুতে প্রতিক্রিয়াশীল হাইপারপ্লাসিয়া (m) পরিলক্ষিত হয়েছিল এবং IHC (n) বা ISH (o) দ্বারা কোনো উল্লেখযোগ্য স্টেইনিং সংকেত পরিলক্ষিত হয়নি।

উপসংহার

এই গবেষণায় প্রাণী পরীক্ষার মাধ্যমে মৌখিক-নাকীয় সংক্রমণের পরে শূকরদের পেরিফেরাল লিম্ফয়েড অঙ্গগুলিতে দুটি মাঝারি ক্ষতিকারক ASFV স্ট্রেনের বিতরণ গতিবিদ্যা পদ্ধতিগতভাবে ব্যাখ্যা করা হয়েছে। গবেষণায় দেখা গেছে যে সংক্রমণের পরে ভাইরাস দ্রুত সুপারফিসিয়াল ইনগুইনাল লিম্ফ নোডগুলিতে (SILN) ছড়িয়ে পড়ে এবং সমস্ত মৃত শূকরদের SILN-এ ভাইরাসের পরিমাণ প্লীহার সাথে অত্যন্ত সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল, যা প্যাথোজেনিক দৃষ্টিকোণ থেকে নিশ্চিত করে যে SILN-এর ASF-আক্রান্ত শূকরদের জন্য একটি স্ক্রিনিং নমুনা হিসাবে একটি শক্তিশালী বৈজ্ঞানিক ভিত্তি রয়েছে।

এটি জোর দেওয়া উচিত যে এই গবেষণায় এই নমুনা পদ্ধতির প্রয়োগযোগ্যতার সীমাও স্পষ্ট করা হয়েছে: সম্ভাব্যভাবে জীবিত সংক্রামিত শূকরগুলি ধীরে ধীরে তাদের পেরিফেরাল লিম্ফ নোড থেকে ভাইরাস নির্মূল করবে এবং সংক্রমণের প্রাথমিক পর্যায়ে এবং পুনরুদ্ধারের সময় লিম্ফ নোডগুলিতে ভাইরাসের পরিমাণ এবং পরিবর্তনশীলতা কম থাকে। অতএব, SILN প্রধানত মৃত বা মৃতপ্রায় শূকরদের দ্রুত স্ক্রিনিংয়ের জন্য উপযুক্ত এবং প্রাথমিক পর্যায়ের সংক্রমণ বা জীবিত প্রাণীদের মধ্যে নিয়মিত রোগজীবাণু নজরদারির জন্য সুপারিশ করা হয় না।

এই গবেষণার ফলাফলের সুস্পষ্ট ব্যবহারিক তাৎপর্য রয়েছে: SILN নমুনা সংগ্রহের জন্য শব ব্যবচ্ছেদের প্রয়োজন হয় না, এটি পরিচালনা করা সহজ এবং দ্রুত এবং এটি সাইটে নমুনা সংগ্রহ এবং জৈব নিরাপত্তা ঝুঁকি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে। এটি ASF প্যাসিভ নজরদারি প্রোগ্রামগুলিকে অপটিমাইজ করার জন্য, বিশেষ করে প্রাদুর্ভাবগুলি দ্রুত সনাক্ত করার ক্ষমতা উন্নত করার জন্য মূল প্রযুক্তিগত সহায়তা প্রদান করে।