hakkında şirket haberleri Son araştırmalar: Zayıflatılmış Afrika domuz vebası suşlarının domuz periferik lenfoid organlarındaki dağılım deseni

4 Kasım 2025 tarihinde, Kanada Gıda Denetim Ajansı'nın Ulusal Egzotik Hayvan Hastalıkları Merkezi'nden bir araştırma ekibi, yeni bir çalışma yayınladı.orta derecede virüslü bir Afrika domuz vebası virüsü suşuyla oral-burun enfeksiyonu sonrasında domuzların çevresel lenfoid organlarında viral genomun dağılım dinamiklerini bildiren.

Araştırmanın Önemli Noktaları

* İlk defa, this study systematically depicted the temporal-spatial distribution of the viral genome of attenuated African swine fever strains Estonia 2014 (genotype II) and Malta’78 (genotype I) in peripheral lymphoid organs of pigs after oral-nasal infectionEstonia 2014 daha erken tespit edildi ve daha hızlı domuz ölümüyle sonuçlandı, Malta'da ise daha uzun bir hayatta kalma süresi vardı.

* Bu çalışma, viral genomun enfeksiyondan 2-3 gün sonra yüzeysel inguinal lenf nodlarında (SILN) tespit edilebileceğini ve 5-9 gün sonra zirveye ulaşabileceğini doğruladı.ve dalağın viral yükü ile çok senkronize.

* Dokuz ölü domuz % 100 SILN pozitifti ve Ct değerleri dalağ örneğinden bir döngüden daha az farklıydı.Bu, WOAH tarafından önerilen numunelerin (nekropsi gerektiren ve kirlenmeye eğilimli) operasyonel zorluklarını çözdü., içi çıkarmadan pasif izleme için altın standardı oluşturur.

* Hayatta kalan domuzlar, SILN Ct değerlerinin sürekli olarak yükseldiği, " iyileşme değerlendirmesi " için moleküler kanıt sağlayan 10 - 18 dpi arasında bir viral temizlik eğilimi gösterdi.

* Histopatoloji, bağışıklık histo-kimyası (IHC) birleştiren üçlü bir teşhis testi,ve in situ melezleşme (ISH) virüsün sadece makrofagları / dendritik hücreleri enfekte ettiğini ortaya çıkardı → bu hücreler pro-inflamatuar sitokinler salgılarlar → lenfositlerVirüs enfeksiyonu olmadan, apoptoz/nekroza maruz kalır → sonunda lenfoid doku hasarına (hemorragik nekroz) yol açar, bağışıklık hasarının dolaylı mekanizmasını açıklar.

Bu çalışma, domuzlar üzerinde simüle edilmiş bir saha teması iletim yöntemi kullanarak deneyler yapmak için iki orta derecede virüslü suş, ASFV Estonia 2014 ve ASFV Malta ¢78'i kullandı.Virüsün kan içindeki dinamik dağılımı, dalağı, bademcikleri ve çeşitli yüzeysel lenf nodları sistematik olarak analiz edildi.

Sonuçlar, virüsün enfeksiyondan 2-3 gün sonra yüzeysel inguinal lenf nodlarında tespit edilebileceğini ve zirvesine 5-9 gün sonra ulaşabileceğini gösterdi.Çalışma ayrıca ölü domuzların dalağında viral genom içeriğinin SILN (dalağı- bağırsak lenf düğümü) ile oldukça tutarlı olduğunu doğruladı., SILN'i ölü domuzların Afrika domuz salgını için taraması için son derece verimli bir örnek türü olarak destekler.

Tanıtım

Afrika domuz hastalığı (ASF) küresel çapta yaygındır. Dalağı çıkarmaya dayanan pasif izleme zaman alıcı, iş yoğunluğu ve yüksek biyolojik güvenlik riskleri içerir.Kanada Gıda Denetim Ajansı Dış Hastalıklar Merkezi (NCFAD) ekibi, "SILN'nin 2022'de dalağın yerini alabileceği" hipotezini önerdi., ancak enfeksiyonun erken aşamasında uygulanabilirliği ve zayıflatılmış suşların benzer şekilde dağılımı konusunda veriler eksik.

Sonuçlar

1Virüs tespit zamanlamasında farklılıklar:

ASFV Estonya 2014 ile enfekte olmuş domuzlarda virüseleşme, enfeksiyondan 2 gün sonra (dpi) başladı, ASFV Malta'da enfekte olmuş domuzlarda ise 3 dpi'de başladı; her iki virüs de SILN'de 3 dpi'de tespit edilebilirdi,ve viral yük zamanla hızla arttı..

Şekil 1. Estonya 2014 Afrika domuz salgını virüsünün genomik dağılımı (a-c) ve günlük ortalama tespit sonuçları (ortalama Ct değerlerinin standart hatası ile) (d-f)

(a, d) tam kan, dalağ ve bademciklerde dağılım gösterir; (b, e) yüzeysel inguinal lenf bezlerinde (SILN), mandibular lenf bezlerinde (SLN) dağılım gösterir,ve yüzeysel servikal lenf nodları (SCLN); (c, f) popliteal lenf bezlerinde (PLN), ön femoral lenf bezlerinde (PFLN) ve gastrohepatic lenf bezlerinde (GHLN) dağılımı gösterir.Şekildeki hata çubukları, her zamansal noktada ve her numune türü için Ct değerlerinin standart hatasını (SEM) temsil eder..

2Çığ ve boşluk kalıpları:

ASFV Estonya 2014'ün lenfoid organlardaki virüs yükü 7-9 dpi'ye ulaştı, ASFV Malta'nın ise en yüksek seviyesi 5-7 dpi'ye ulaştı. Ölü domuzlarda SILN seviyeleri dalağındakiyle karşılaştırılabilirdi.Hayatta kalan domuzların çevresel lenfoid organlarında viral yükü yavaş yavaş azalırkenVirüs temizliğini gösterir.

Şekil 2. Histopathological observation and virus distribution in superficial inguinal lymph nodes (SILNs) of piglets after oral-nasal inoculation with moderately virulent Estonia 2014 strain African swine fever virus.

Enokülasyon sonrası 3. günde (3 dpi) önemli histopatolojik değişiklikler görülmemiştir:(a) Bağışıklık histo-kimyası (IHC) Afrika domuz vebesi virüsü (ASFV) antijeni için pozitif olan dağılmış tek hücreler gösterdi (oku)(b) In situ melezleşme (ISH) benzer bir dağılımı olan ASFV RNA'sını tespit etti (oku).

Enokülasyon sonrası 4. günde (4 dpi), korteks ve kortikomedüler bağlantıda (d, ok) çok fokal kanama alanları gözlemlendi.IHC açık bir şekilde dağıtılmış tek hücreli pozitif boyanma yamaları gösterdi (e, ok) ve ISH (f) tarafından tespit edilen viral genomik malzemenin aynı dağılım ve yoğunluğu gösterdi.

Enjeksiyon sonrası 5. günde (dpi 5), kanama ile birlikte çok fokal nekroz, esas olarak kortikomedüler bağlantı boyunca ortaya çıktı (g, ok).Viral antijen (h) ve viral RNA (i) nekrotik lezyonların karşılık gelen bölgelerinde ve doku boyunca dağılmış makrofag benzeri hücrelerde tespit edildi..

Enokülasyon sonrası 7. günde (7 dpi), kortikomedüler bağlantıda ve korteksin multifocal bölgesi boyunca (j, ok) kapsamlı kanama ve nekroz gözlemlendi.Afrika domuz vebası virüsünün büyük sayıda antijeni kortikomedüler bağlantıda bulunmuştur., ve bazı dağıtılmış pozitif hücreler de kortekte bulundu (k). Önceki zaman noktalarına kıyasla, viral nükleik asit algılama seviyesi bu zamanda (l) azalmıştır.

Enokülasyon sonrası 9. günde (9 dpi), endotel hücre dejenerasyonu (m, ok) da dahil olmak üzere lenf bezleri boyunca kapsamlı nekroz ve kanama gözlemlendi.Necrotic bölgenin daha yüksek büyütülmesini gösteren yerleştirme)Lenf nodunun multifocal bölgesinde tespit edilen viral antijen (n) ve viral nükleik asit (o) seviyeleri, 7 dpi' de gözlemlenenlerden daha düşüktü.Viral antijenler hala vasküler endotelial hücrelerde görülmüştür (n, o yerleştirme).

Enjeksiyon sonrası 11. günde (11 dpi), orta derecede nekroz görülmüştür (p), ancak bağışıklık kalıcılığı önemli ölçüde azalmıştır (q, r).

3SILN'in uygulama değeri:

SILN örneği alımı parçalanmayı gerektirmez ve ölü domuzlarda virüs tespit oranı dalağınkiyle tutarlıdır.Enfeksiyonun erken aşamasında (3 dpi'den sonra) istikrarlı bir şekilde tespit edilebilir.Ölü domuzları taramak için ideal bir alternatif numune.

Şekil 3. Malta'da Afrika domuz vebası virüsünün genomik dağılımı (a-c) ve günlük ortalama tespit sonuçları (ortalama Ct değeri standart hatası ile) (d-f)

(a,d) tam kan, dalağ ve bademciklerde dağılım gösterir; (b,e) yüzeysel inguinal lenf nodlarında (SILN), mandibüler lenf nodlarında (SLN) dağılım gösterir.ve yüzeysel servikal lenf nodları (SCLN); (c,f) popliteal lenf bezlerinde (PLN), ön femoral lenf bezlerinde (PFLN) ve gastrohepatic lenf bezlerinde (GHLN) dağılım gösterir.Şekildeki hata çubukları, her zamansal noktada ve her örnek türü için Ct değerlerinin standart hatasını (SEM) temsil eder..

4Patolojik ve Moleküler Doğrulama:

Bağışıklık histokimyasal ve in situ melezleşme sonuçları, SILN'deki viral antijenlerin ve nükleik asitlerin dağılım eğilimlerinin gerçek zamanlı PCR sonuçlarıyla tutarlı olduğunu doğruladı.Enfeksiyonun sonraki aşamalarında lenfoid doku nekrozu ve kanama gibi patolojik değişiklikler gözlemlendi., ve viral temizlik süreci patolojik hasarın onarımı ile senkronize edildi.

Şekil 4. Histopathological observation and virus distribution in superficial inguinal lymph nodes (SILNs) of piglets after oral-nasal inoculation with moderately virulent Malta’78 strain of African swine fever virus.

Aşılama sonrası 4. günde (4 dpi) HE bölümlerinde belirgin lezyonlar görülmemiştir (a).(a) ve in situ melezleşme (ISH) (c), ok).

Enokülasyon sonrası 5. günde (5 dpi), midede (d, ok) az sayıda küçük nekrotik oda gözlemlendi.Afrika domuz vebalı virüsü (ASFV) antijeni (e) ve viral RNA (f) makrofag ve dendritik hücrelerle uyumlu morfolojiye sahip hücrelerde bol miktarda tespit edildi..

Enokülasyon sonrası 7. günde (7 dpi), medüler nekroz alanları ortaya çıktı (g, ok). 5 dpi ile karşılaştırıldığında, tespit edilen ASFV antijeni (h) ve viral RNA (i) miktarı azalmıştır.

Enjekülasyon sonrası 10. günde (10 dpi), kanama ve nekroz öncelikle kortikomedüler bağlantıda (j), zayıf bağışıklık kalıcılık sinyalleri (k, l) ile birlikte gözlemlendi.

Enokülasyon sonrası 18. günde (18 dpi), SILN dokusunda reaktif hiperplazi (m) gözlemlendi ve IHC (n) veya ISH (o) tarafından önemli bir boyanma sinyali gözlemlenmedi.

Sonuçlar

Bu çalışma, hayvan deneyleri yoluyla ağız-burun enfeksiyonu sonrasında domuzların çevresel lenfoid organlarında iki orta derecede virüs ASFV suşunun dağılım dinamiklerini sistematik olarak açıkladı.Araştırma, virüsün enfeksiyondan sonra yüzeysel inguinal lenf nodlarına (SILN) hızla yayıldığını gösterdi., ve tüm ölü domuzların SILN' deki viral yükü dalağınkiyle oldukça tutarlı kaldı.Böylece, SILN'in ASF'li domuzlar için tarama örneği olarak sağlam bir bilimsel temele sahip olduğunu patogenik bir bakış açısıyla doğrulayan.

Bu çalışmanın bu örnekleme yönteminin uygulanabilirlik sınırlarını da netleştirdiğini vurgulamak gerekir:Muhtemelen hayatta kalan enfekte domuzlar, virüsü periferik lenf nodlarından yavaş yavaş temizlerler., ve lenf nodlarındaki viral yük ve değişkenlik enfeksiyonun erken aşamalarında ve iyileşme döneminde düşüktür.SILN, esas olarak ölü veya ölen domuzların hızlı taraması için uygundur., ve erken aşamada enfekte olan veya hayatta kalan hayvanlarda rutin patojen gözetimi için önerilmez.

Bu çalışmanın bulguları açık bir pratik öneme sahiptir: SILN örneği alımı, karkas dizeksiyonu gerektirmez, basit ve hızlı bir şekilde işlenir,ve yerinde örnekleme zorluğunu ve biyolojik güvenlik risklerini önemli ölçüde azaltabilirASF pasif gözetim programlarının optimize edilmesi için, özellikle salgınların erken tespit edilebilmesi için önemli teknik destek sağlar.