कंपनी की खबर नवीनतम शोध: सूअरों के परिधीय लिम्फोइड अंगों में कमजोर अफ्रीकी सूअरों के बुखार के उपभेदों का वितरण पैटर्न

4 नवंबर, 2025 को, कैनेडियन खाद्य निरीक्षण एजेंसी के विदेशी पशु रोगों के राष्ट्रीय केंद्र की एक शोध टीम ने *वायरस* पत्रिका में एक नया अध्ययन प्रकाशित किया, जिसमें मौखिक-नाक संक्रमण के बाद सूअरों के परिधीय लिम्फोइड अंगों में वायरल जीनोम की वितरण गतिशीलता की सूचना दी गई थी, जो मध्यम रूप से घातक अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस के तनाव से संक्रमित थे।

अनुसंधान हाइलाइट्स

* पहली बार, इस अध्ययन में मौखिक-नाक संक्रमण के बाद सूअरों के परिधीय लिम्फोइड अंगों में क्षीण अफ्रीकी स्वाइन बुखार के तनाव एस्टोनिया 2014 (जीनोटाइप II) और माल्टा’78 (जीनोटाइप I) के वायरल जीनोम के अस्थायी-स्थानिक वितरण को व्यवस्थित रूप से चित्रित किया गया, दोनों उपभेदों के बीच अंतर की तुलना करते हुए। एस्टोनिया 2014 का पता पहले चला और इसके परिणामस्वरूप सूअरों की मृत्यु दर में तेजी आई, जबकि माल्टा’78 में जीवित रहने की अवधि लंबी थी।

* इस अध्ययन ने पुष्टि की कि संक्रमण के बाद 2-3 दिनों में ही सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स (SILN) में वायरल जीनोम का पता लगाया जा सकता है, जो 5-9 दिनों में चरम पर पहुंच जाता है, और प्लीहा में वायरल लोड के साथ अत्यधिक सिंक्रनाइज़ होता है।

* नौ मृत सूअर 100% SILN पॉजिटिव थे, जिनमें Ct मान प्लीहा के नमूनों से एक चक्र से कम भिन्न थे। इसने WOAH-अनुशंसित नमूनों (नेक्रोपसी की आवश्यकता और संदूषण की संभावना) की परिचालन चुनौतियों को हल किया, जो बिना आंत निकालने के निष्क्रिय निगरानी के लिए स्वर्ण मानक स्थापित करता है।

* जीवित सूअरों ने 10-18 डीपीआई पर वायरल क्लीयरेंस प्रवृत्ति दिखाई, लगातार बढ़ते SILN Ct मानों के साथ, जो "रिकवरी मूल्यांकन" के लिए आणविक प्रमाण प्रदान करता है।

* हिस्टोपैथोलॉजी, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (IHC), और इन सीटू हाइब्रिडाइजेशन (ISH) का एक ट्रिपल डायग्नोस्टिक परीक्षण से पता चला कि वायरस केवल मैक्रोफेज/डेंड्रिटिक कोशिकाओं को संक्रमित करता है → ये कोशिकाएं प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स का स्राव करती हैं → लिम्फोसाइट्स, बिना वायरल संक्रमण के, एपोप्टोसिस/नेक्रोसिस से गुजरते हैं → अंततः लिम्फोइड ऊतक क्षति (रक्तस्रावी नेक्रोसिस) की ओर ले जाते हैं, प्रतिरक्षा चोट की अप्रत्यक्ष तंत्र को स्पष्ट करते हैं।

इस अध्ययन में दो मध्यम रूप से घातक उपभेदों, ASFV एस्टोनिया 2014 और ASFV माल्टा’78 का उपयोग करके एक अनुकरणित क्षेत्र संपर्क संचरण विधि का उपयोग करके सूअरों पर प्रयोग किए गए। रक्त, प्लीहा, टॉन्सिल और विभिन्न सतही लिम्फ नोड्स में वायरस के गतिशील वितरण का व्यवस्थित रूप से विश्लेषण किया गया।

परिणामों से पता चला कि संक्रमण के 2-3 दिनों के बाद सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स में वायरस का पता लगाया जा सकता है, जो 5-9 दिनों में अपने चरम पर पहुंच जाता है। अध्ययन ने आगे पुष्टि की कि मृत सूअरों की प्लीहा में वायरल जीनोम सामग्री SILN (प्लीहा-आंतों के लिम्फ नोड) के साथ अत्यधिक सुसंगत थी, जो अफ्रीकी स्वाइन बुखार के लिए मृत सूअरों की स्क्रीनिंग के लिए SILN को एक अत्यधिक कुशल नमूना प्रकार के रूप में समर्थन करता है।

परिचय

अफ्रीकी स्वाइन बुखार (ASF) विश्व स्तर पर व्यापक है। प्लीहा हटाने पर निर्भर निष्क्रिय निगरानी समय लेने वाली, श्रम-गहन है, और इसमें उच्च जैवसुरक्षा जोखिम हैं। कैनेडियन खाद्य निरीक्षण एजेंसी की बाहरी रोगों की केंद्र (NCFAD) टीम ने 2022 में परिकल्पना प्रस्तावित की कि "SILN प्लीहा की जगह ले सकता है", लेकिन इसके प्रारंभिक संक्रमण चरण में प्रयोज्यता पर डेटा और क्या क्षीण उपभेदों का समान वितरण होता है, अभी भी कमी है। इस अध्ययन का उद्देश्य इस अंतर को भरना है।

परिणाम

1. वायरस का पता लगाने के समय में अंतर:

ASFV एस्टोनिया 2014 से संक्रमित सूअरों में वायरलकरण संक्रमण के 2 दिन बाद (डीपीआई) शुरू हुआ, जबकि ASFV माल्टा’78 से संक्रमित सूअरों में यह 3 डीपीआई पर शुरू हुआ; दोनों वायरस 3 डीपीआई पर SILN में पता लगाने योग्य थे, और वायरल लोड समय के साथ तेजी से बढ़ा।

चित्र 1. व्यक्तिगत सूअरों (a-c) और दैनिक औसत पता लगाने के परिणामों (औसत Ct मानों की मानक त्रुटि के साथ) (d-f) में एस्टोनिया 2014 अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस के तनाव का जीनोमिक वितरण

(a, d) पूरे रक्त, प्लीहा और टॉन्सिल में वितरण दिखाते हैं; (b, e) सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स (SILN), मैंडिबुलर लिम्फ नोड्स (SLN), और सतही ग्रीवा लिम्फ नोड्स (SCLN) में वितरण दिखाते हैं; (c, f) पॉपलीटियल लिम्फ नोड्स (PLN), पूर्वकाल फेमोरल लिम्फ नोड्स (PFLN), और गैस्ट्रोहेपेटिक लिम्फ नोड्स (GHLN) में वितरण दिखाते हैं। चित्र में त्रुटि बार प्रत्येक समय बिंदु पर और प्रत्येक नमूना प्रकार के लिए Ct मानों की मानक त्रुटि (SEM) का प्रतिनिधित्व करते हैं।

2. पीक और क्लीयरेंस पैटर्न:

लिम्फोइड अंगों में ASFV एस्टोनिया 2014 का वायरल लोड 7-9 डीपीआई पर चरम पर था, जबकि ASFV माल्टा’78 का 5-7 डीपीआई पर चरम पर था। मृत सूअरों में SILN का स्तर प्लीहा के समान था, जबकि जीवित सूअरों के परिधीय लिम्फोइड अंगों में वायरल लोड धीरे-धीरे कम हुआ, जो वायरल क्लीयरेंस का संकेत देता है।

चित्र 2. मध्यम रूप से घातक एस्टोनिया 2014 तनाव अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस के साथ मौखिक-नाक टीकाकरण के बाद सूअरों के सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स (SILNs) में हिस्टोपैथोलॉजिकल अवलोकन और वायरस वितरण।

टीकाकरण के बाद 3 दिन (3 डीपीआई) पर, कोई महत्वपूर्ण हिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तन नहीं देखा गया: (a) इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (IHC) ने अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस (ASFV) एंटीजन (तीर) के लिए बिखरी हुई एकल कोशिकाओं को सकारात्मक दिखाया; (b) इन सीटू हाइब्रिडाइजेशन (ISH) ने समान वितरण (तीर) के साथ ASFV RNA का पता लगाया।

टीकाकरण के बाद 4 दिन (4 डीपीआई) पर, कोर्टेक्स और कोर्टिकोमेड्यूलर जंक्शन (डी, तीर) पर बहुफोकल रक्तस्राव क्षेत्र देखे गए। IHC ने स्पष्ट बिखरे हुए एकल-कोशिका सकारात्मक धुंधला पैच (ई, तीर) दिखाया, और ISH (एफ) द्वारा पता लगाया गया वायरल जीनोमिक सामग्री समान वितरण और तीव्रता दिखाती है।

टीकाकरण के बाद 5 दिन (5 डीपीआई) पर, कोर्टिकोमेड्यूलर जंक्शन (जी, तीर) के साथ-साथ बहुफोकल नेक्रोसिस दिखाई दिया। वायरल एंटीजन (एच) और वायरल आरएनए (आई) को नेक्रोटिक घावों के संबंधित क्षेत्रों में और पूरे ऊतक में बिखरी हुई मैक्रोफेज जैसी कोशिकाओं में पता लगाया गया।

टीकाकरण के बाद 7 दिन (7 डीपीआई) पर, कोर्टिकोमेड्यूलर जंक्शन और कोर्टेक्स (जे, तीर) के बहुफोकल क्षेत्र में व्यापक रक्तस्राव और नेक्रोसिस देखा गया। कोर्टिकोमेड्यूलर जंक्शन पर बड़ी संख्या में अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस एंटीजन मौजूद थे, और कुछ बिखरी हुई सकारात्मक कोशिकाएं कोर्टेक्स (के) में भी पाई गईं। पिछले समय बिंदुओं की तुलना में, इस समय वायरल न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने का स्तर कम हो गया था (एल)।

टीकाकरण के बाद 9 दिन (9 डीपीआई) पर, पूरे लिम्फ नोड (एम, तीर) में व्यापक नेक्रोसिस और रक्तस्राव देखा गया, जिसमें एंडोथेलियल सेल डिजनरेशन (एम, नेक्रोटिक क्षेत्र का उच्च आवर्धन दिखाने वाला आवेषण) शामिल है। लिम्फ नोड के बहुफोकल क्षेत्र में पता लगाए गए वायरल एंटीजन (एन) और वायरल न्यूक्लिक एसिड (ओ) का स्तर 7 डीपीआई पर देखे गए स्तरों से कम था। हालांकि, संवहनी एंडोथेलियल कोशिकाओं (एन, ओ आवेषण) में अभी भी वायरल एंटीजन देखे गए।

टीकाकरण के बाद 11 दिन (11 डीपीआई) पर, मध्यम नेक्रोसिस देखा गया (पी), लेकिन इम्यूनोस्टेनिंग काफी कम हो गई (क्यू, आर)।

3. SILN का अनुप्रयोग मूल्य:

SILN नमूना संग्रह के लिए विच्छेदन की आवश्यकता नहीं होती है, और मृत सूअरों में वायरस का पता लगाने की दर प्लीहा में पाई जाने वाली दर के अनुरूप होती है। इसे प्रारंभिक संक्रमण चरण (3 डीपीआई के बाद) में स्थिर रूप से पता लगाया जा सकता है, जो इसे मृत सूअरों की स्क्रीनिंग के लिए एक आदर्श वैकल्पिक नमूना बनाता है।

चित्र 3. व्यक्तिगत सूअरों (a-c) और औसत दैनिक पता लगाने के परिणामों (औसत Ct मान मानक त्रुटि के साथ) (d-f) में माल्टा’78 अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस का जीनोमिक वितरण

(a,d) पूरे रक्त, प्लीहा और टॉन्सिल में वितरण दिखाते हैं; (b,e) सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स (SILN), सबमंडिबुलर लिम्फ नोड्स (SLN), और सतही ग्रीवा लिम्फ नोड्स (SCLN) में वितरण दिखाते हैं; (c,f) पॉपलीटियल लिम्फ नोड्स (PLN), पूर्वकाल फेमोरल लिम्फ नोड्स (PFLN), और गैस्ट्रोहेपेटिक लिम्फ नोड्स (GHLN) में वितरण दिखाते हैं। चित्र में त्रुटि बार Ct मानों की मानक त्रुटि (SEM) का प्रतिनिधित्व करते हैं।

4. पैथोलॉजिकल और आणविक सत्यापन:

इम्यूनोहिस्टोकेमिकल और इन सीटू हाइब्रिडाइजेशन परिणामों ने पुष्टि की कि SILN में वायरल एंटीजन और न्यूक्लिक एसिड की वितरण प्रवृत्तियाँ वास्तविक समय पीसीआर परिणामों के अनुरूप थीं। संक्रमण के बाद के चरणों में लिम्फोइड ऊतक नेक्रोसिस और रक्तस्राव जैसे पैथोलॉजिकल परिवर्तन देखे गए, और वायरल क्लीयरेंस प्रक्रिया पैथोलॉजिकल क्षति की मरम्मत के साथ सिंक्रनाइज़ की गई।

चित्र 4. मध्यम रूप से घातक माल्टा’78 तनाव अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस के साथ मौखिक-नाक टीकाकरण के बाद सूअरों के सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स (SILNs) में हिस्टोपैथोलॉजिकल अवलोकन और वायरस वितरण।

टीकाकरण के बाद 4 दिन (4 डीपीआई) पर, HE वर्गों में कोई स्पष्ट घाव नहीं देखा गया (ए)। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (IHC) (बी, तीर) और इन सीटू हाइब्रिडाइजेशन (ISH) (सी, तीर) द्वारा बिखरी हुई, मैक्रोफेज जैसी एकल कोशिकाएं देखी गईं।

टीकाकरण के बाद 5 दिन (5 डीपीआई) पर, मेडुला (डी, तीर) में छोटी संख्या में छोटे नेक्रोटिक फोकी देखे गए। मैक्रोफेज और डेंड्रिटिक कोशिकाओं के अनुरूप आकृति विज्ञान वाली कोशिकाओं में प्रचुर मात्रा में अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस (ASFV) एंटीजन (ई) और वायरल RNA (एफ) का पता चला।

टीकाकरण के बाद 7 दिन (7 डीपीआई) पर, मेडुलरी नेक्रोसिस के क्षेत्र दिखाई दिए (जी, तीर)। 5 डीपीआई की तुलना में, ASFV एंटीजन (एच) और वायरल RNA (आई) की मात्रा कम पाई गई।

टीकाकरण के बाद 10 दिन (10 डीपीआई) पर, रक्तस्राव और नेक्रोसिस मुख्य रूप से कोर्टिको-मेडुल्लरी जंक्शन (जे) पर देखे गए, जिसके साथ कमजोर इम्यूनोस्टेनिंग संकेत (के, एल) थे।

टीकाकरण के बाद 18 दिन (18 डीपीआई) पर, SILN ऊतक में प्रतिक्रियाशील हाइपरप्लासिया (एम) देखा गया, और IHC (एन) या ISH (ओ) द्वारा कोई महत्वपूर्ण धुंधला संकेत नहीं देखा गया।

निष्कर्ष

इस अध्ययन ने पशु प्रयोगों के माध्यम से मौखिक-नाक संक्रमण के बाद सूअरों के परिधीय लिम्फोइड अंगों में दो मध्यम रूप से घातक ASFV उपभेदों की वितरण गतिशीलता को व्यवस्थित रूप से स्पष्ट किया। अध्ययन में पाया गया कि संक्रमण के बाद वायरस तेजी से सतही इगुइनल लिम्फ नोड्स (SILN) में फैल गया, और सभी मृत सूअरों में SILN में वायरल लोड प्लीहा में पाए जाने वाले वायरल लोड के साथ अत्यधिक सुसंगत रहा, इस प्रकार रोगजनक दृष्टिकोण से पुष्टि करता है कि SILN में ASF से प्रभावित सूअरों के लिए एक स्क्रीनिंग नमूने के रूप में एक ठोस वैज्ञानिक आधार है।

यह जोर देना महत्वपूर्ण है कि इस अध्ययन ने इस नमूनाकरण विधि की प्रयोज्यता सीमाओं को भी स्पष्ट किया: संभावित रूप से जीवित संक्रमित सूअर धीरे-धीरे अपने परिधीय लिम्फ नोड्स से वायरस को साफ कर देंगे, और संक्रमण के शुरुआती चरणों में और रिकवरी अवधि के दौरान लिम्फ नोड्स में वायरल लोड और परिवर्तनशीलता कम होती है। इसलिए, SILN मुख्य रूप से मृत या मरते हुए सूअरों की त्वरित स्क्रीनिंग के लिए उपयुक्त है, और प्रारंभिक चरण के संक्रमण या जीवित जानवरों में नियमित रोगज़नक़ निगरानी के लिए इसकी अनुशंसा नहीं की जाती है।

इस अध्ययन के निष्कर्षों का स्पष्ट व्यावहारिक महत्व है: SILN नमूनाकरण के लिए शव विच्छेदन की आवश्यकता नहीं होती है, यह संचालित करने में सरल और त्वरित है, और यह ऑन-साइट नमूनाकरण और जैवसुरक्षा जोखिमों की कठिनाई को काफी कम कर सकता है। यह ASF निष्क्रिय निगरानी कार्यक्रमों को अनुकूलित करने के लिए, विशेष रूप से प्रकोपों का जल्दी पता लगाने की क्षमता में सुधार करने के लिए प्रमुख तकनीकी सहायता प्रदान करता है।