Unternehmensnachrichten über Neueste Forschung: Das Verteilungsmuster abgeschwächter afrikanischer Schweinepest-Stämme in peripheren lymphatischen Organen von Schweinen ha

Am 4. November 2025 veröffentlichte ein Forscherteam des Nationalen Zentrums für exotische Tierkrankheiten der kanadischen Lebensmittelinspektionsbehörde eine neue Studie in der Zeitschrift *Viruses*,zur Berichterstattung über die Verteilungsdynamik des viralen Genoms in den peripheren lymphatischen Organen von Schweinen nach einer oralanasalen Infektion mit einem mäßig virulenten Afrikanischen Schweinepest-Virusstamm.

Forschungsergebnisse

* Zum ersten Mal, this study systematically depicted the temporal-spatial distribution of the viral genome of attenuated African swine fever strains Estonia 2014 (genotype II) and Malta’78 (genotype I) in peripheral lymphoid organs of pigs after oral-nasal infectionIn Estland wurde 2014 früher festgestellt und führte zu einer schnelleren Schweinesterblichkeit, während Malta ¥78 eine längere Überlebensdauer aufwies.

* Diese Studie bestätigte, dass das virale Genom bereits 2-3 Tage nach der Infektion in den oberflächlichen Inguinallymphknoten (SILN) nachgewiesen werden kann, wobei ein Spitzenwert nach 5-9 Tagen erreicht wird.und ist sehr synchron mit der Viruslast in der Milz.

* Neun tote Schweine waren zu 100% SILN-positiv, wobei sich die Ct-Werte von den Milzproben um weniger als einen Zyklus unterschieden.Dies löste die betrieblichen Herausforderungen der von WOAH empfohlenen Proben (die eine Obduktion erfordern und anfällig für Kontamination sind), der den Goldstandard für eine passive Überwachung ohne Ausweidung festlegt.

* Überlebende Schweine zeigten einen Trend der viralen Clearance bei 10 bis 18 dpi, mit kontinuierlich steigenden SILN Ct-Werten, was molekulare Beweise für eine "Erholungsbewertung" liefert.

* Ein dreifacher diagnostischer Test, der Histopathologie, Immunhistochemie (IHC) kombiniertund in situ Hybridisierung (ISH) ergab, dass das Virus nur Makrophagen/dendritische Zellen infiziert → diese Zellen pro-entzündliche Zytokine → Lymphozyten ausscheiden, ohne Virusinfektion, eine Apoptose/Nekrose erleiden → letztendlich zu einer Lymphgewebeschädigung (hämorrhagische Nekrose) führen, was den indirekten Mechanismus der Immunschädigung aufklärt.

In dieser Studie wurden zwei mäßig virulente Stämme, ASFV Estonia 2014 und ASFV Malta ¢78, mit Hilfe einer simulierten Feldkontaktübertragungsmethode an Schweinen getestet.Die dynamische Verteilung des Virus im Blut, Milz, Mandeln und verschiedene oberflächliche Lymphknoten wurden systematisch analysiert.

Die Ergebnisse zeigten, dass das Virus 2-3 Tage nach der Infektion in oberflächlichen Inguinallymphknoten nachgewiesen werden konnte und seinen Höhepunkt nach 5-9 Tagen erreichte.Die Studie bestätigte ferner, dass der Virusgenomgehalt in der Milz toter Schweine sehr mit dem von SILN (Mülz-Darm-Lymphknoten) übereinstimmte., unterstützt SILN als hocheffizienten Probentyp für die Untersuchung toter Schweine auf Afrikanische Schweinepest.

Einleitung

Die afrikanische Schweinepest (ASF) ist weltweit weit verbreitet und die passive Überwachung, die auf die Abnahme der Milz beruht, ist zeitaufwendig, arbeitsintensiv und birgt hohe Risiken für die Biosicherheit.Das Team des Centers for External Diseases (NCFAD) der Canadian Food Inspection Agency schlug die Hypothese vor, dass "SILN die Milz ersetzen kann" im Jahr 2022Diese Studie zielt darauf ab, diese Lücke zu schließen.

Ergebnisse

1Unterschiede in der Zeit der Viruserkennung:

Die Viralisierung bei mit ASFV infizierten Schweinen in Estland 2014 begann 2 Tage nach der Infektion (dpi), während sie bei mit ASFV infizierten Schweinen in Malta78 mit 3 dpi begann; beide Viren waren in SILN mit 3 dpi nachweisbar,und die Viruslast stieg im Laufe der Zeit rasch an.

Abbildung 1. Genomische Verteilung des Estnischen Afrikanischen Schweinepestvirusstams 2014 bei einzelnen Schweinen (a-c) und durchschnittliche Tageserkennungswerte (mit Standardfehler des durchschnittlichen Ct-Wertes) (d-f)

(a, d) zeigen die Verteilung im Vollblut, in der Milz und in den Mandeln; (b, e) zeigen die Verteilung in den oberflächlichen Inguinal-Lymphknoten (SILN), den mandibulare Lymphknoten (SLN),und oberflächliche zervikale Lymphknoten (SCLN)c, f) zeigen die Verteilung in den poplitealen Lymphknoten (PLN), den vorderen femoralen Lymphknoten (PFLN) und den gastrohepatischen Lymphknoten (GHLN).Die Fehlerbalken in der Abbildung stellen den Standardfehler (SEM) der Ct-Werte zu jedem Zeitpunkt und für jeden Probentyp dar..

2. Spitzen- und Abstandsmuster:

Die Virenlast von ASFV Estland 2014 in den Lymphorganen erreichte einen Höchststand von 7-9 dpi, während die von ASFV Malta?? 78 einen Höchststand von 5-7 dpi erreichte. Die SILN-Spiegel bei toten Schweinen waren mit denen in der Milz vergleichbar,Während die Virenlast in den peripheren lymphatischen Organen der überlebenden Schweine allmählich abnahm, was auf die virale Clearance hinweist.

Abbildung 2. Histopathological observation and virus distribution in superficial inguinal lymph nodes (SILNs) of piglets after oral-nasal inoculation with moderately virulent Estonia 2014 strain African swine fever virus.

Am 3. Tag nach der Impfung (3 dpi) wurden keine signifikanten histopathologischen Veränderungen beobachtet:(a) Immunhistochemie (IHC) zeigte, dass verstreute Einzelzellen positiv auf das Antigen des Afrikanischen Schweinepestvirus (ASFV) (Pfeil)b) Bei der In-situ-Hybridisierung (ISH) wurde ASFV-RNA mit ähnlicher Verteilung nachgewiesen (Pfeil).

Am 4. Tag nach der Impfung (4 dpi) wurden multifokale Blutungsgebiete an der Kortex- und Kortikomedulärverbindung beobachtet (d, Pfeil).IHC zeigte offensichtliche verstreute einzellige positive Färbungsflecken (e, Pfeil), und das vom ISH (f) ermittelte virale Genommaterial zeigte die gleiche Verteilung und Intensität.

Am 5. Tag nach der Impfung (5 dpi) zeigte sich eine multifokale Nekrose mit Blutungen hauptsächlich entlang der kortikomedulären Verbindung (g, Pfeil).Viralantigen (h) und viraler RNA (i) wurden in den entsprechenden Bereichen nekrotischer Läsionen und in verstreuten makrophagenartigen Zellen im gesamten Gewebe nachgewiesen..

Am 7. Tag nach der Impfung (7 dpi) wurden an der kortikomedulären Verbindung und im gesamten multifokalen Bereich des Cortex (j, Pfeil) umfangreiche Blutungen und Nekrose beobachtet.Eine große Anzahl von Antigenen des Afrikanischen Schweinepest-Virus war an der kortikomedulären Verbindung vorhanden.Im Vergleich zu früheren Zeitpunkten wurde der Nachweis von viraler Nukleinsäure zu diesem Zeitpunkt reduziert (l).

Am 9. Tag nach der Impfung (9 dpi) wurden umfangreiche Nekrose und Blutungen im gesamten Lymphknoten (m, Pfeil) beobachtet, einschließlich Endothelzelldegeneration (m,Einfügung, die eine höhere Vergrößerung des nekrotischen Bereichs zeigt)Die Spiegel des viralen Antigens (n) und der viralen Nukleinsäure (o), die im gesamten multifokalen Bereich des Lymphknotens nachgewiesen wurden, waren niedriger als die Spiegel bei 7 dpi.Viralantigene wurden in den vaskulären Endothelzellen weiterhin beobachtet., o Einlage).

Am 11. Tag nach der Impfung (11 dpi) wurde eine moderate Nekrose beobachtet (p), aber die Immunstaining war signifikant reduziert (q, r).

3. Anwendungswert von SILN:

Die SILN-Probenentnahme erfordert keine Dissection, und die Virusentdeckungsrate bei toten Schweinen entspricht der in der Milz.Es kann stabil im frühen Infektionsstadium nachgewiesen werden (nach 3 dpi), so dass es eine ideale Alternativprobe für die Untersuchung toter Schweine ist.

Abbildung 3. Genomische Verteilung des Malten­78-Virus der Afrikanischen Schweinepest bei einzelnen Schweinen (a-c) und durchschnittliche Tageserkennungswerte (mit durchschnittlichem Ct-Standardfehlerwert) (d-f)

(a,d) zeigen die Verteilung im Vollblut, in der Milz und in den Mandeln; (b,e) zeigen die Verteilung in den oberflächlichen Inguinal-Lymphknoten (SILN), in den submandibulären Lymphknoten (SLN),und oberflächliche zervikale Lymphknoten (SCLN)c, f) zeigt die Verteilung in den Popliteal-Lymphknoten (PLN), den vorderen Femoral-Lymphknoten (PFLN) und den gastrohepatischen Lymphknoten (GHLN).Die Fehlerbalken in der Abbildung stellen den Standardfehler (SEM) der Ct-Werte zu jedem Zeitpunkt und für jeden Probentyp dar..

4. Pathologische und molekulare Validierung:

Immunhistochemische und in situ durchgeführte Hybridisierungsergebnisse bestätigten, dass die Verteilungstrends von viralen Antigenen und Nukleinsäuren in SILN mit den Echtzeit-PCR-Ergebnissen übereinstimmten.Im späteren Stadium der Infektion wurden pathologische Veränderungen wie Lymphgewebenekrose und Blutungen beobachtet., und der Virusclearance-Prozess wurde mit der Reparatur von pathologischen Schäden synchronisiert.

Abbildung 4. Histopathological observation and virus distribution in superficial inguinal lymph nodes (SILNs) of piglets after oral-nasal inoculation with moderately virulent Malta’78 strain of African swine fever virus.

Am 4. Tag nach der Impfung (4 dpi) wurden keine offensichtlichen Läsionen in den HE-Abschnitten (a) beobachtet.Die Ergebnisse der Untersuchung werden in den folgenden Tabellen beschrieben:, Pfeil).

Am fünften Tag nach der Impfung (5 dpi) wurden in der Medulla eine kleine Anzahl kleiner nekrotischer Brennpunkte beobachtet (d, Pfeil).In Zellen mit einer Morphologie, die mit Makrophagen und dendritischen Zellen übereinstimmt, wurden reichlich Antigen (e) und virale RNA (f) des Afrikanischen Schweinepestvirus (ASFV) nachgewiesen..

Am 7. Tag nach der Impfung (7 dpi) zeigten sich die Bereiche der Medullarnekrose (g, Pfeil).

Am 10. Tag nach der Impfung (10 dpi) wurden Blutungen und Nekrose hauptsächlich an der Kortikomodulverbindung (j) beobachtet, begleitet von schwachen Immunstaining-Signalen (k, l).

Am 18. Tag nach der Impfung (18 dpi) wurde eine reaktive Hyperplasie (m) im SILN-Gewebe beobachtet, und weder bei IHC (n) noch bei ISH (o) wurden signifikante Färbungssignale beobachtet.

Schlussfolgerung

Diese Studie erläuterte systematisch die Verteilungsdynamik von zwei mäßig virulenten ASFV-Stämmen in den peripheren lymphatischen Organen von Schweinen nach einer oralanasalen Infektion durch Tierversuche.Die Studie ergab, dass sich das Virus nach der Infektion rasch in die oberflächlichen Inguinallymphknoten (SILN) ausbreitete., und die Viruslast in der SILN aller toten Schweine blieb in hohem Maße mit der in der Milz übereinstimmend,Damit wird aus pathogener Sicht bestätigt, dass das SILN als Screeningprobe für ASF-betroffene Schweine eine solide wissenschaftliche Grundlage hat.

Es ist hervorzuheben, dass in dieser Studie auch die Grenzen der Anwendbarkeit dieser Probenahmemethode geklärt wurden:potenziell überlebende infizierte Schweine werden das Virus allmählich aus ihren peripheren Lymphknoten entfernen, und die Viruslast und Variabilität in den Lymphknoten sind in den frühen Stadien der Infektion und während der Erholungsphase gering.SILN eignet sich hauptsächlich für die schnelle Untersuchung toter oder sterbender Schweine., und wird nicht für die routinemäßige Überwachung von Krankheitserregern bei Infizierten im Frühstadium oder überlebenden Tieren empfohlen.

Die Ergebnisse dieser Studie haben eine klare praktische Bedeutung: Die SILN-Probenahme erfordert keine Schlachtkörperdisektion, ist einfach und schnell zu betreiben,und kann die Schwierigkeit der Probenahme vor Ort und die Risiken für die Biosicherheit erheblich verringernEs bietet eine wichtige technische Unterstützung für die Optimierung von passiven Überwachungsprogrammen für ASF, insbesondere zur Verbesserung der Fähigkeit, Ausbrüche frühzeitig zu erkennen.