Le 4 novembre 2025, une équipe de recherche du Centre national des maladies animales exotiques de l'Agence canadienne d'inspection des aliments a publié une nouvelle étude dans la revue *Viruses*,concernant la dynamique de répartition du génome viral dans les organes lymphoïdes périphériques des porcs après une infection par voie orale et nasale par une souche virulente modérée du virus de la peste porcine africaine.
Points marquants de la recherche
* Pour la première fois, this study systematically depicted the temporal-spatial distribution of the viral genome of attenuated African swine fever strains Estonia 2014 (genotype II) and Malta’78 (genotype I) in peripheral lymphoid organs of pigs after oral-nasal infectionL'Estonie 2014 a été détectée plus tôt et a entraîné une mortalité porcine plus rapide, tandis que Malte78 avait une période de survie plus longue.
* Cette étude a confirmé que le génome viral peut être détecté dans les ganglions lymphatiques inguinaux superficiels (GILS) dès 2 à 3 jours après l' infection, atteignant un pic à 5 à 9 jours,et est très synchronisé avec la charge virale dans la rate.
* Neuf porcs morts étaient 100% SILN positifs, avec des valeurs de Ct différant des échantillons de rate de moins d' un cycle.Cela a résolu les problèmes opérationnels des échantillons recommandés par la WOAH (qui nécessitent une nécropsie et sont sujets à la contamination), établissant la norme d'or pour la surveillance passive sans éviscération.
* Les porcs survivants ont montré une tendance de clairance virale de 10 à 18 dpi, avec des valeurs de Ct SILN en augmentation continue, fournissant des preuves moléculaires pour une " évaluation du rétablissement ".
* Un triple test de diagnostic combinant histopathologie, immunohistochimie (IHC),et l'hybridation in situ (ISH) ont révélé que le virus infecte uniquement les macrophages/cellules dendrites → ces cellules sécrètent des cytokines pro-inflammatoires → lymphocytes, sans infection virale, subissent une apoptose/nécrose → conduisant finalement à des lésions du tissu lymphoïde (nécrose hémorragique), clarifiant le mécanisme indirect de la lésion immunitaire.
Cette étude a utilisé deux souches modérément virulentes, l'ASFV Estonie 2014 et l'ASFV Malte 78, pour mener des expériences sur des porcs à l'aide d'une méthode de transmission par contact de champ simulée.La distribution dynamique du virus dans le sang, la rate, les amygdales et divers ganglions lymphatiques superficiels ont été analysés systématiquement.
Les résultats ont montré que le virus pouvait être détecté dans les ganglions lymphatiques inguinaux superficiels 2 à 3 jours après l'infection, atteignant son pic à 5 à 9 jours.L'étude a également confirmé que le contenu du génome viral dans la rate des porcs morts était très compatible avec celui du SILN (nœud lymphatique rate-intestin)., soutenant le SILN en tant que type d'échantillon très efficace pour le dépistage de la peste porcine africaine chez les porcs morts.
Introduction au projet
La fièvre porcine africaine (FPA) est répandue dans le monde entier. La surveillance passive basée sur l'ablation de la rate est chronophage, à forte intensité de main-d'œuvre et présente des risques élevés pour la biosécurité.L'équipe du Centre des maladies externes de l'Agence canadienne d'inspection des aliments (NCFAD) a proposé l'hypothèse selon laquelle "le SILN peut remplacer la rate" en 2022.Cette étude vise à combler cette lacune.
Résultats
1Différences dans le temps de détection du virus:
La virilisation chez les porcs infectés par le VSAE Estonie 2014 a commencé 2 jours après l'infection (dpi), tandis que chez les porcs infectés par le VSAE Malte ¢78 elle a commencé à 3 dpi; les deux virus ont été détectés dans le SILN à 3 dpi,et la charge virale a augmenté rapidement au fil du temps.
Figure 1. Répartition génomique de la souche de virus de la peste porcine africaine Estonie 2014 chez des porcs individuels (a-c) et résultats de détection moyens quotidiens (avec erreur standard des valeurs moyennes de Ct) (d-f)
(a, d) indiquent la répartition dans le sang entier, la rate et les amygdales; (b, e) indiquent la répartition dans les ganglions lymphatiques inguinaux superficiels (SILN), lymphatiques mandibulaires (SLN),et des ganglions lymphatiques cervicaux superficiels (SCLN); (c, f) montre la répartition dans les ganglions lymphatiques popliteux (PLN), les ganglions lymphatiques fémoraux antérieurs (PFLN) et les ganglions lymphatiques gastro-hépatiques (GHLN).Les barres d'erreur figurant sur la figure représentent l'erreur standard (SEM) des valeurs Ct à chaque moment et pour chaque type d'échantillon..
2Les pics et les dégagements:
La charge virale de l'ASFV Estonie 2014 dans les organes lymphoïdes a atteint un sommet de 7 à 9 dpi, tandis que celle de l'ASFV Malte 78 a atteint un sommet de 5 à 7 dpi. Les taux de SILN chez les porcs morts étaient comparables à ceux de la rate,tandis que la charge virale dans les organes lymphoïdes périphériques des porcs survivants diminuait progressivement, indiquant une clairance virale.
Figure 2. Histopathological observation and virus distribution in superficial inguinal lymph nodes (SILNs) of piglets after oral-nasal inoculation with moderately virulent Estonia 2014 strain African swine fever virus.
Au 3e jour après l' inoculation (3 dpi), aucun changement histopathologique significatif n' a été observé:a) L'immunohistochimie (IHC) a montré que des cellules individuelles dispersées étaient positives pour l'antigène du virus de la peste porcine africaine (VPAP) (flèche); b) L'hybridation in situ (ISH) a détecté un ARN ASFV avec une distribution similaire (flèche).
Le 4e jour après l' inoculation (4 dpi), des zones d' hémorragie multifocale ont été observées au niveau du cortex et de la jonction corticomédullaire (d, flèche).Le IHC a montré des taches de coloration positives à cellule unique dispersées (e, flèche), et le matériel génomique viral détecté par l' ISH (f) présentait la même distribution et la même intensité.
Le 5e jour après l' inoculation (5 dpi), une nécrose multifocale avec hémorragie est apparue principalement le long de la jonction corticomédullaire (g, flèche).L'antigène viral (h) et l'ARN viral (i) ont été détectés dans les zones correspondantes des lésions nécrotiques et dans des cellules disséminées de type macrophage dans tout le tissu..
Le 7e jour après l' inoculation (7 dpi), une hémorragie et une nécrose importantes ont été observées à la jonction corticomédullaire et dans toute la zone multifocale du cortex (j, flèche).Un grand nombre d'antigènes du virus de la peste porcine africaine étaient présents à la jonction corticomédullaire, et quelques cellules positives dispersées ont également été trouvées dans le cortex (k).
Le 9e jour après l' inoculation (9 dpi), une nécrose et une hémorragie importantes ont été observées dans l' ensemble du ganglion lymphatique (m, flèche), y compris une dégénérescence des cellules endothéliales (m, flèche, flèche, flèche, flèche).l'insert montrant un grossissement plus élevé de la zone nécrotique)Les taux d'antigène viral (n) et d'acide nucléique viral (o) détectés dans toute la zone multifocale du ganglion lymphatique étaient inférieurs à ceux observés à 7 dpi.Les antigènes viraux ont toujours été observés dans les cellules endothéliales vasculaires (n, ou insert).
Le 11e jour après l' inoculation (11 dpi), une nécrose modérée a été observée (p), mais l' immunostaining a été significativement réduit (q, r).
3. Valeur d'application du SILN:
La collecte d'échantillons SILN ne nécessite pas de dissection et le taux de détection du virus chez les porcs morts est compatible avec celui de la rate.Il peut être détecté de manière stable au stade précoce de l'infection (après 3 dpi), ce qui en fait un échantillon alternatif idéal pour le dépistage des porcs morts.
Graphique 3. Répartition génomique du virus de la peste porcine africaine Malte ¥78 chez des porcs individuels (a-c) et résultats de détection quotidiens moyens (avec erreur standard moyenne de la valeur Ct) (d-f)
(a,d) montrer la répartition dans le sang entier, la rate et les amygdales; (b,e) montrer la répartition dans les ganglions lymphatiques inguinaux superficiels (GILS), les ganglions lymphatiques sous-mandibulaires (GLS),et des ganglions lymphatiques cervicaux superficiels (SCLN); (c,f) montre la répartition dans les ganglions lymphatiques popliteux (PLN), les ganglions lymphatiques fémoraux antérieurs (PFLN) et les ganglions lymphatiques gastro-hépatiques (GHLN).Les barres d'erreur figurant sur la figure représentent l'erreur standard (SEM) des valeurs de Ct à chaque moment et pour chaque type d'échantillon..
4Validation pathologique et moléculaire:
Les résultats de l'hybridation immunohistochimique et in situ ont confirmé que les tendances de distribution des antigènes viraux et des acides nucléiques dans le SILN étaient compatibles avec les résultats de la PCR en temps réel.Des modifications pathologiques telles que la nécrose du tissu lymphoïde et l' hémorragie ont été observées aux stades ultérieurs de l' infection., et le processus de clairance virale a été synchronisé avec la réparation des lésions pathologiques.
Figure 4. Histopathological observation and virus distribution in superficial inguinal lymph nodes (SILNs) of piglets after oral-nasal inoculation with moderately virulent Malta’78 strain of African swine fever virus.
Au 4e jour après l' inoculation (4 dpi), aucune lésion évidente n' a été observée dans les sections HE (a).Les résultats de l'étude ont été publiés dans le Journal de l'Histoire de l'Histoire., flèche).
Le 5e jour après l' inoculation (5 dpi), un petit nombre de petits foyers nécrotiques ont été observés dans la moelle (d, flèche).L'antigène (e) et l'ARN viral (f) abondants du virus de la peste porcine africaine (VPAP) ont été détectés dans des cellules dont la morphologie est compatible avec celle des macrophages et des cellules dendritiques..
Le 7e jour après l' inoculation (7 dpi), des zones de nécrose médullaire sont apparues (g, flèche).
Le 10e jour après l' inoculation (10 dpi), des hémorragies et une nécrose ont été observées principalement à la jonction cortico-médullaire (j), accompagnées de faibles signaux de résistance immunitaire (k, l).
Le 18e jour après l' inoculation (18 dpi), une hyperplasie réactive (m) a été observée dans le tissu SILN, et aucun signal de coloration significatif n' a été observé ni par l' IHC (n) ni par l' ISH (o).
Conclusion
Cette étude a systématiquement élucidé la dynamique de distribution de deux souches modérément virulentes du VASF dans les organes lymphoïdes périphériques des porcs après une infection par voie orale et nasale par des expériences sur des animaux.L'étude a révélé que le virus se propage rapidement aux ganglions lymphatiques inguinaux superficiels (GLIN) après l'infection., et la charge virale dans le SILN de tous les porcs morts est restée très cohérente avec celle de la rate,confirmant ainsi, d'un point de vue pathogène, que le SILN a une base scientifique solide en tant qu'échantillon de dépistage des porcs atteints de peste porcine asiatique.
Il convient de souligner que cette étude a également clarifié les limites d'applicabilité de cette méthode d'échantillonnage:Les porcs potentiellement infectés qui survivent élimineront progressivement le virus de leurs ganglions lymphatiques périphériques., et la charge virale et la variabilité dans les ganglions lymphatiques sont faibles aux premiers stades de l'infection et pendant la période de récupération.Le SILN convient principalement au dépistage rapide des porcs morts ou mourants., et n'est pas recommandé pour la surveillance de routine des agents pathogènes chez les animaux infectés au stade précoce ou survivants.
Les résultats de cette étude ont une signification pratique claire: l'échantillonnage SILN ne nécessite pas de dissection de la carcasse, est simple et rapide,et peut réduire de manière significative la difficulté du prélèvement sur place et les risques pour la biosécuritéIl fournit un soutien technique essentiel pour optimiser les programmes de surveillance passive de la maladie, en particulier pour améliorer la capacité de détecter les épidémies à un stade précoce.
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