تعتبر الاختبارات المكون الأكثر أهمية في الوقاية من حمى الخنازير الأفريقية ومكافحتها. ومع ذلك، فإن الطبيعة العلمية والموحدة لأخذ العينات لا تؤثر فقط على نتائج الاختبارات، بل يمكن أن تؤثر أيضًا على سلامة مزارع الخنازير.
في عام 2020، أصدرت الصين المعيار الوطني "التقنية التشخيصية لحمى الخنازير الأفريقية"، GB/T 18648-2020. تم إصدار هذا المعيار وتنفيذه من قبل الإدارة الحكومية لتنظيم السوق وإدارة التقييس في الصين في 14 ديسمبر 2020.
يغطي هذا المعيار الوطني تدابير السلامة البيولوجية، والتشخيص السريري، وجمع ومعالجة عينات التشخيص المختبري، وطرق مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي بالفلورة، والتقييم الشامل.
تتضمن عملية الكشف عن مسببات الأمراض لحمى الخنازير الأفريقية باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي بالفلورة بشكل عام: جمع العينات وتخزينها؛ المعالجة المسبقة للعينات؛ استخلاص الحمض النووي وإعداد المحلول؛ تفاعل تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي بالفلورة في الوقت الفعلي؛ وإخراج وتحليل نتائج الاختبار.
من وجهة نظر المختبر، يعد جمع العينات ونقلها بشكل صحيح أمرًا بالغ الأهمية لضمان دقة نتائج الاختبارات المعملية.
ما هي العينات التي يجب جمعها؟ ما هي الكمية المناسبة؟ كيف ينبغي جمعها بطريقة موحدة؟ ماذا يجب أن نفعل بعد الجمع؟ إذا لم يتم اختبار العينات على الفور، فكيف يجب تخزينها؟ ماذا يجب أن نفعل بالعينات التي تم اختبارها؟
من خلال تفسير المعيار الوطني للتقنية التشخيصية لحمى الخنازير الأفريقية و"المواصفات الفنية للحجر الصحي لحمى الخنازير الأفريقية" (SN/T 1559-2010) الصادرة في عام 2010، نقدم النقاط الرئيسية التي يجب مراعاتها فيما يتعلق بجمع العينات السريرية وتخزينها ونقلها:
#01 الدم المضاد للتخثر (الدم الكامل):
الجمع: اسحب 5 مل من الدم الكامل من الوريد الوداجي أو الوريد الأجوف السفلي أو الوريد الأذيني الهامشي باستخدام أنبوب معقم (vacutainer) يحتوي على مضاد للتخثر (EDTA-غطاء أرجواني). إذا كان الحيوان متوفى، يمكن جمع الدم من القلب، ولكن يجب القيام بذلك على الفور. انقل الدم مبردًا، وعند وصوله إلى المختبر المختص، قم بتخزينه عند -70 درجة مئوية.
ملاحظة: لا تستخدم أنابيب جمع الدم المعقمة التي تحتوي على الهيبارين (غطاء أخضر)، لأنها ستثبط تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل وتسبب نتائج سلبية كاذبة بسهولة.
#02 المصل:
الجمع: اجمع عينة دم سعة 5 مل باستخدام أداة vacutainer غير مضادة للتخثر من الوريد الوداجي أو الوريد الأجوف السفلي أو الوريد الأذيني الهامشي، أو أثناء التشريح. يوصى أولاً بحضانة العينة عند 4 درجات مئوية لمدة 14-18 ساعة لفصل الجلطة. تخلص من الجلطة وقم بالطرد المركزي لمدة 10-15 دقيقة. اجمع الرائق الصافي (المصل). يمكن اختبار عينات المصل مباشرة بعد الفصل أو شحنها مبردة. عند الوصول إلى المختبر، يمكن تخزينها مجمدة عند -70 درجة مئوية.
ملاحظة: إذا كان المصل أحمر، فهذا يشير إلى انحلال الدم ولا يمكن استخدامه في اختبار ELISA.
#03 عينات الأعضاء والأنسجة
الجمع: تشمل الأعضاء المستهدفة الطحال والعقد الليمفاوية واللوزتين والكلى. عادة ما يكون للطحال والعقد الليمفاوية أعلى أحمال فيروسية. انقل العينات مبردة وقم بتقديمها إلى المختبر في أقرب وقت ممكن. إذا لم يكن التسليم في الوقت المناسب ممكنًا، فيمكن تخزين العينات في مجمد أو في نيتروجين سائل. يمكن تعطيل الفيروسات عن طريق النقع في 10٪ فورمالين مخزن لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل.
#04 القراد اللين
الجمع: اجمع القراد اللين، مع إبقائه على قيد الحياة قدر الإمكان لضمان الحفاظ على الفيروسات بداخلها ومنع تدهور الحمض النووي. يمكن وضع القراد اللين الذي تم جمعه في قنينة/أنبوب بغطاء لولبي مع كمية صغيرة من التربة، مبطنة بالشاش، وتخزينها في درجة حرارة الغرفة للنقل. عند الوصول إلى المختبر المختص، قم بالتجميد عند -70 درجة مئوية أو ضعها في نيتروجين سائل. إذا كان يتم إجراء الملاحظة المورفولوجية فقط، فيمكن تخزين العينات في كحول 100٪.
ملاحظة: ينطبق الإجراء نفسه على الحشرات الأخرى، مثل البعوض والذباب. حافظ عليها على قيد الحياة قدر الإمكان للاختبار، أو قم بتخزينها مباشرة في النيتروجين السائل.
#05 عينات بيئية
الجمع: اجمع مسحات بيئية متعددة، مثل البراز والنفايات والأعلاف، وقم بتخزينها عند 4 درجات مئوية.
#06 عينات اللعاب والمسحات
الجمع: قم بتثبيت حبل قطني أو شاش على الدرابزين. بعد أن يمضغ الخنزير بشكل طبيعي، اجمع السائل المستخرج من الحبل أو الشاش. قم بتخزين العينة في أنبوب اختبار نظيف أو كيس بسحاب. أغلقها وقم بتخزينها في حاوية مبردة للنقل.
بالنسبة لمسحات الأنف، استخدم مسحة قطنية معقمة. أدخلها 3-5 سم في تجويف أنف الخنزير بزاوية 45 درجة. قم بتدوير المسحة بلطف 3-5 مرات لتحفيز منعكس العطس لدى الخنزير. انتظر حتى تتبلل المسحة. قم بتخزين عينة المسحة القطنية في أنبوب اختبار نظيف منفصل أو كيس محكم الإغلاق. أغلقها وقم بتخزينها في حاوية مبردة للنقل.
بالنسبة لمسحات الشرج، استخدم مسحة قطنية معقمة مغموسة في محلول ملحي. أدخل العينة 2-3 سم في شرج الخنزير. قم بتدوير المسحة بلطف وافركها. ثم، قم بتخزين العينة في أنبوب اختبار نظيف أو كيس محكم الإغلاق. قم بالتخزين في حاوية مبردة للنقل.
تعتبر العينات عالية الجودة هي الأساس الرئيسي لضمان دقة نتائج الاختبارات المعملية. من خلال جمع العينات الموحد والحفاظ عليها والتحكم في جودة المعالجة المسبقة، يمكن الحفاظ على سلامة الجزيئات البيولوجية بشكل فعال، مما يوفر دعمًا تجريبيًا كافيًا للكشف الدقيق عن الحمض النووي اللاحق والتشخيص الموثوق به.
تخزين العينات ونقلها
لضمان دقة نتائج الاختبارات، نوصي بإرسال العينات إلى مختبر مخصص للاختبار في أقرب وقت ممكن بعد الجمع. استخدم طريقة التسليم في اليوم التالي واستخدم النقل بالسلسلة الباردة لمنع تدهور العينات وفقدان الفعالية.
اتصل شخص: Mr. Huang Jingtai
الهاتف :: 17743230916