اخبار شرکت [آزمایش] عامل اصلی تأثیرگذار بر نتایج آزمایش ASF: جمع‌آوری و نگهداری صحیح نمونه

آزمایش مهم ترین بخش پیشگیری و کنترل تب خوک آفریقایی است.ماهیت علمی و استاندارد نمونه برداری نه تنها بر نتایج آزمایش تأثیر می گذارد بلکه می تواند بر ایمنی مزرعه خوک نیز تأثیر بگذارد..

در سال 2020، چین استاندارد ملی "تکنولوژی تشخیص تب خوک آفریقا" GB/T 18648-2020 را صادر کرد.این استاندارد توسط اداره دولتی تنظیم بازار و اداره استاندارد چین در 14 دسامبر منتشر و اجرا شدسال 2020

این استاندارد ملی شامل اقدامات ایمنی زیستی، تشخیص بالینی، جمع آوری و پردازش نمونه های آزمایشگاهی تشخیصی، روش هایی مانند PCR کمی فلورسنت،و ارزیابی جامع.

یک فرآیند تشخیص کمی PCR فلوروسنت بیماری زا ASF به طور کلی شامل: جمع آوری نمونه و ذخیره سازی؛ پیش پردازش نمونه؛ استخراج اسید نوکلئیک و آماده سازی محلول است.واکنش تقویت PCR کمی در زمان واقعی فلورسنتو نتیجه آزمایش و تجزیه و تحلیل

از منظر آزمایشگاهی، جمع آوری و حمل و نقل مناسب نمونه برای اطمینان از نتایج دقیق آزمایش آزمایشگاهی بسیار مهم است.

چه نمونه هایی باید جمع آوری شود؟ مقدار مناسب چیست؟ چگونه باید به صورت استاندارد جمع آوری شوند؟ پس از جمع آوری چه باید انجام شود؟ اگر نمونه ها بلافاصله آزمایش نشوند،چطور باید نگهداری شوند؟با نمونه هاي آزمايش شده چيکار بايد کرد؟

با تفسیر استاندارد ملی برای فناوری تشخیص ASF و "مخصوصیات فنی قرنطینه تب خوک آفریقایی" (SN/T 1559-2010) که در سال 2010 صادر شده است،ما نکات کلیدی را که باید در مورد جمع آوری نمونه های بالینی در نظر گرفته شود ارائه می دهیم، انبار و حمل و نقل:

#01 خون ضد خون (خون کامل):

جمع آوری: 5 میلی لیتر خون کامل را از رگ گردن، رگ حفره ای پایین، یا رگ گوش حاشیه ای با استفاده از یک لوله استریل (واکوئیتینر) حاوی ضد انعقادی (کلاه بنفش EDTA) بردارید.اگر حیوان مرده باشد، خون از قلب جمع آوری می شود، اما این باید بلافاصله انجام شود. انتقال خون یخچال و پس از رسیدن به آزمایشگاه آزمایش، آن را در -70 ° C ذخیره کنید.

توجه: از لوله های جمع آوری خون با هپارین استفاده نکنید، زیرا واکنش PCR را مهار می کند و به راحتی منجر به منفی کاذب می شود.

#02 سرم:

جمع آوری: یک نمونه خون 5 میلی لیتر را با استفاده از یک خال کش غیر ضد تخمک گذاری از رگ گردن، رگ حفره ای پایین، یا رگ گوش حاشیه ای یا در طول کالبد شکافی جمع آوری کنید.برای جدا کردن لخته توصیه می شود که ابتدا نمونه را در ۴ درجه سانتیگراد به مدت ۱۴ تا ۱۸ ساعت حبوب شود.. لخته را دور بریزید و برای 10-15 دقیقه سانتریفیوژ کنید. سوپرناتنت شفاف (سرم) را جمع آوری کنید. نمونه های سرم می توانند بلافاصله پس از جدا شدن آزمایش شوند یا یخچال شده ارسال شوند.وقتی به آزمایشگاه رسیدید، می توانند در -70 درجه سانتیگراد منجمد نگهداری شوند.

توجه: اگر سرم قرمز باشد، نشان دهنده همولیز است و نمی تواند برای آزمایش ELISA استفاده شود.

#03 نمونه های اندام و بافت

جمع آوری: اندام های هدف شامل طحال، غدد لنفاوی، لوزه ها و کلیه ها هستند. طحال و غدد لنفاوی معمولاً بیشترین بار ویروسی را دارند.نمونه های حمل و نقل یخچال شده و در اسرع وقت به آزمایشگاه ارسال شوند.اگر تحویل به موقع امکان پذیر نباشد، نمونه ها می توانند در یخچال یا نیتروژن مایع نگهداری شوند.ویروس ها را می توان با خیساندن در 10٪ فورمالین بافری برای حداقل 30 دقیقه قبل از آزمایش PCR غیرفعال کرد..

#04 لاک نرم

جمع آوری: کک نرم را جمع آوری کنید و آنها را تا حد ممکن زنده نگه دارید تا از حفظ ویروس ها در آنها اطمینان حاصل کنید و از تخریب DNA جلوگیری کنید.کک های نرم جمع آوری شده را می توان در یک بطری با پیچ بند با مقدار کمی خاک قرار داد.، پوشیده شده با گاز و در دمای اتاق برای حمل و نقل نگهداری می شود.اگر فقط مشاهده مورفولوژی انجام شود، نمونه ها می توانند در 100٪ الکل نگهداری شوند.

توجه: همین روش برای حشرات دیگر مانند پشه ها و مگس ها نیز اعمال می شود. آنها را تا حد ممکن زنده نگه دارید تا آزمایش شوند یا مستقیماً در نیتروژن مایع نگهداری کنید.

#05 نمونه های محیطی

جمع آوری: چندین سواب محیط زیست مانند مدفوع، خاک و خوراک را جمع آوری کنید و در ۴ درجه سانتیگراد نگهداری کنید.

#06 نمونه های بزاق و سواب

جمع آوری: یک طناب پنبه یا گاز را به چنگال متصل کنید. پس از اینکه خوک به طور طبیعی جوشد، مایع استخراج شده از طناب یا گاز را جمع آوری کنید. نمونه را در یک لوله آزمایش تمیز یا کیسه ziplock ذخیره کنید.بسته بندی و نگهداری در یک ظرف یخچال برای حمل و نقل.

برای پاک کننده های بینی، از یک پاک کننده پنبه ای استریل استفاده کنید. آن را 3-5 سانتی متر در حفره بینی خوک با زاویه 45 درجه وارد کنید. پاک کننده را به آرامی 3-5 بار چرخش دهید تا رفلکس عطسه خوک را تحریک کند.صبر کن تا سيب رطوبت بشهنمونه ی سفت و پاک را در یک لوله آزمایش تمیز یا کیسه ای مهر و موم شده جدا نگه دارید.

برای پاک کننده های مقعد، از یک پاک کننده پنبه ای استریل که در محلول نمک خیس شده است استفاده کنید. نمونه را ۲ تا ۳ سانتی متر در مقعد خوک وارد کنید. پاک کننده را به آرامی چرخش دهید و آن را مالید.نمونه را در یک لوله آزمایش تمیز یا کیسه ای مهر و موم نگه دارید.در یک ظروف یخچال برای حمل و نقل نگهداری شود.

نمونه های با کیفیت بالا پایه کلیدی برای اطمینان از دقت نتایج آزمایش آزمایشگاهی هستند.سالمیت مولکول های بیولوژیکی می تواند به طور موثر حفظ شود، که پشتیبانی تجربی کافی برای تشخیص دقیق اسید نوکلئیک و تشخیص قابل اعتماد را فراهم می کند.

نگهداری و حمل نمونه

برای اطمینان از دقت نتایج آزمایش، توصیه می کنیم که نمونه ها هرچه زودتر پس از جمع آوری به آزمایشگاه تعیین شده برای آزمایش ارسال شوند.استفاده از روش تحویل روز بعد و استفاده از حمل زنجیره سرد برای جلوگیری از تخریب نمونه و از دست دادن اثربخشی.