nouvelles de l'entreprise [Test] Le principal facteur affectant les résultats des tests de la PPA : le prélèvement et la conservation corrects des échantillons

Le dépistage est la composante la plus cruciale de la prévention et du contrôle de la peste porcine africaine.le caractère scientifique et normalisé de l'échantillonnage a non seulement une incidence sur les résultats des essais, mais peut également avoir une incidence sur la sécurité des élevages porcins.

En 2020, la Chine a publié la norme nationale "Technologie de diagnostic de la peste porcine africaine", GB/T 18648-2020.Cette norme a été promulguée et mise en œuvre par l'Administration d'État pour la réglementation du marché et l'Administration de normalisation de Chine le 14 décembre, en 2020.

Cette norme nationale couvre les mesures de biosécurité, le diagnostic clinique, la collecte et le traitement d'échantillons de diagnostic en laboratoire, les méthodes telles que la PCR quantitative par fluorescence,et une évaluation globale.

Un processus complet de détection par PCR quantitative par fluorescence de l'agent pathogène de l'ASF comprend généralement: la collecte et le stockage des échantillons; le prétraitement des échantillons; l'extraction d'acides nucléiques et la préparation de la solution;réaction d'amplification quantitative de la PCR par fluorescence en temps réel; et la sortie et l'analyse des résultats des essais.

D'un point de vue de laboratoire, une collecte et un transport appropriés des échantillons sont primordiaux pour garantir des résultats précis des tests de laboratoire.

Quels échantillons doivent être prélevés? Quelle est la quantité appropriée? Comment doivent-ils être prélevés de manière normalisée? Que doit-on faire après la collecte?comment les stockerQu'est-ce qui devrait être fait des échantillons testés?

En interprétant la norme nationale pour la technologie de diagnostic de la peste porcine asiatique et les "spécifications techniques pour la quarantaine de la peste porcine africaine" (SN/T 1559-2010) publiées en 2010,nous présentons les points clés à prendre en considération en ce qui concerne la collecte d'échantillons cliniques, stockage et transport:

#01 Sang anticoagulé (sang entier):

Prélèvement: prélever 5 ml de sang entier de la veine jugulaire, de la veine cave inférieure ou de la veine auriculaire marginale à l'aide d'un tube stérile (vacutainer) contenant un anticoagulant (capule violet EDTA).Si l'animal est décédéLe sang doit être transporté au réfrigérateur et, à son arrivée au laboratoire d'essai, conservé à -70°C.

Remarque: N' utilisez pas de tubes de prélèvement de sang stériles avec de l' héparine (couvercle vert), car cela inhibera la réaction PCR et provoquera facilement des faux négatifs.

#02 Le sérum:

Collecte: prélever un échantillon de sang de 5 ml à l'aide d'un vacutainer non anticoagulant à partir de la veine jugulaire, de la veine cave inférieure ou de la veine auriculaire marginale, ou lors d'une nécropsie.Il est recommandé d'incuber l'échantillon à 4°C pendant 14 à 18 heures pour séparer le caillot.Les échantillons de sérum peuvent être testés immédiatement après séparation ou expédiés réfrigérés.À l'arrivée au laboratoire, ils peuvent être conservés congelés à -70°C.

Note: si le sérum est rouge, cela indique une hémolyse et ne peut pas être utilisé pour les tests ELISA.

#03 échantillons d'organes et de tissus

Collecte: Les organes cibles sont la rate, les ganglions lymphatiques, les amygdales et les reins.Les échantillons transportés sont réfrigérés et soumis au laboratoire dès que possible.Si la livraison en temps opportun n'est pas possible, les échantillons peuvent être stockés dans un congélateur ou dans de l'azote liquide.Les virus peuvent être inactivés en les trempant dans du formalin tamponné à 10% pendant au moins 30 minutes avant le test PCR..

#04 Les tiques tendres

Collecte: collecter les tiques molles, en les gardant en vie autant que possible pour assurer la préservation des virus à l'intérieur et pour empêcher la dégradation de l'ADN.Les tiques molles recueillies peuvent être placées dans un flacon/tube à vis avec une petite quantité de terre.À l'arrivée au laboratoire d'essai, congeler à -70°C ou placer dans de l'azote liquide.Si seule l'observation morphologique est effectuée, les échantillons peuvent être conservés dans de l'alcool à 100%.

Remarque: la même procédure s'applique aux autres insectes, comme les moustiques et les mouches.

#05 Échantillons d'environnement

Collecte: collecter plusieurs écouvillons environnementaux, tels que les matières fécales, les déjections et les aliments pour animaux, et les conserver à 4°C.

#06 échantillons de salive et d'éponge

Collecte: fixer une corde ou une gaze de coton à la balustrade. Après que le cochon ait mâché naturellement, recueillir le liquide extrait de la corde ou de la gaze.Emballez et conservez dans un conteneur réfrigéré destiné au transport.

Pour les écouvillons nasaux, utilisez un écouvillon de coton stérile. Insérez-le 3 à 5 cm dans la cavité nasale du porc à un angle de 45°. Faites tourner doucement l'écouvillon 3 à 5 fois pour stimuler le réflexe d'éternuement du porc.Attendez que le tampon soit humidifié. conserver l'échantillon de coton-tige dans un tube à essai propre séparé ou dans un sac scellé. sceller et stocker dans un récipient réfrigéré pour le transport.

Pour les écouvillons anaux, utilisez un écouvillon de coton stérile trempé dans une solution saline.conserver l'échantillon dans un tube à essai propre ou dans un sac scelléConserver dans un récipient réfrigéré pour le transport.

Des échantillons de haute qualité sont la base essentielle pour assurer l'exactitude des résultats des tests de laboratoire.l'intégrité des molécules biologiques peut être maintenue efficacement, fournissant un soutien expérimental suffisant pour une détection ultérieure précise des acides nucléiques et un diagnostic fiable.

Entreposage et transport des échantillons

Afin d'assurer l'exactitude des résultats des tests, nous recommandons que les échantillons soient envoyés à un laboratoire désigné pour être testés dès que possible après la collecte.Utiliser une méthode de livraison le lendemain et utiliser le transport par chaîne froide pour prévenir la dégradation des échantillons et la perte d'efficacité.