εταιρικά νέα για [Δοκιμή] Ο κύριος παράγοντας που επηρεάζει τα αποτελέσματα των δοκιμών ASF: σωστή συλλογή και αποθήκευση δειγμάτων

Οι δοκιμές είναι το πιο σημαντικό στοιχείο της πρόληψης και ελέγχου της αφρικανικής πανώλης των χοίρων.η επιστημονική και τυποποιημένη φύση της δειγματοληψίας δεν επηρεάζει μόνο τα αποτελέσματα των δοκιμών αλλά μπορεί επίσης να επηρεάσει την ασφάλεια των χοιροτροφείων.

Το 2020, η Κίνα εξέδωσε το εθνικό πρότυπο "Τεχνολογία διάγνωσης της αφρικανικής πανώλης των χοίρων", GB/T 18648-2020.Το πρότυπο αυτό δημοσιεύθηκε και εφαρμόστηκε από την Κρατική Διοίκηση Ρυθμίσεως της Αγοράς και την Διοίκηση Τυποποίησης της Κίνας στις 14 Δεκεμβρίου., το 2020.

Το παρόν εθνικό πρότυπο καλύπτει μέτρα βιοασφάλειας, κλινική διάγνωση, συλλογή και επεξεργασία δειγμάτων εργαστηριακής διάγνωσης, μεθόδους όπως η ποσοτική PCR με φθορισμό,και ολοκληρωμένη αξιολόγηση.

Μια πλήρης διαδικασία ποσοτικής ανίχνευσης με PCR φθορισμού παθογόνου ΑΣΦ περιλαμβάνει γενικά: τη συλλογή και αποθήκευση δειγμάτων, την προεπεξεργασία δειγμάτων, την εκχύλιση νουκλεϊκού οξέος και την προετοιμασία του διαλύματος.αντίδραση ποικιλομορφίας PCR με φθορισμό σε πραγματικό χρόνο· και την έκδοση και ανάλυση των αποτελεσμάτων των δοκιμών.

Από εργαστηριακή άποψη, η σωστή συλλογή δειγμάτων και μεταφορά είναι πρωταρχικής σημασίας για την εξασφάλιση ακριβών αποτελεσμάτων εργαστηριακών δοκιμών.

Ποια δείγματα θα πρέπει να συλλέγονται; Ποια είναι η κατάλληλη ποσότητα; Πώς θα πρέπει να συλλέγονται με τυποποιημένο τρόπο; Τι πρέπει να γίνει μετά τη συλλογή; Εάν τα δείγματα δεν δοκιμαστούν άμεσα,πώς πρέπει να αποθηκεύονταιΤι πρέπει να γίνει με τα δοκιμασμένα δείγματα;

Με την ερμηνεία του εθνικού προτύπου για την τεχνολογία διάγνωσης της ΑΣΠ και των "Τεχνικών προδιαγραφών για την απομόνωση της αφρικανικής πανώλης των χοίρων" (SN/T 1559-2010) που εκδόθηκαν το 2010,παρουσιάζουμε τα βασικά σημεία που πρέπει να ληφθούν υπόψη σχετικά με την κλινική συλλογή δειγμάτων, αποθήκευση και μεταφορά:

#01 Αίμα με αντιεστροφικό (ολοκληρωμένο αίμα):

Συλλογή: Πάρτε 5 ml ολικού αίματος από τη γαγγειοειδή φλέβα, την κατώτερη κώλη φλέβα ή την περιθωριακή ακουστική φλέβα χρησιμοποιώντας έναν αποστειρωμένο σωλήνα (αποχέα) που περιέχει αντιπηκτικό (EDTA- μωβ καπάκι).Εάν το ζώο έχει πεθάνειΤο αίμα μεταφέρεται σε ψυγείο και, κατά την άφιξή του στο εργαστήριο δοκιμών, φυλάσσεται στους -70 °C.

Σημείωση: Μην χρησιμοποιείτε αποστειρωμένους σωλήνες συλλογής αίματος με ηπαρίνη (πράσινο καπάκι), καθώς θα αναστέλλει την αντίδραση PCR και θα προκαλέσει εύκολα ψευδώς αρνητικά.

#02 Ορό:

Συλλογή: Συλλέξτε δείγμα αίματος 5 ml χρησιμοποιώντας ένα μη αντιπηκτικό κενό από τη γαλβανική φλέβα, την κατώτερη κενή φλέβα ή την οριακή ακουστική φλέβα, ή κατά τη διάρκεια νεκροψίας.Συνιστάται να επώαση πρώτα το δείγμα σε θερμοκρασία 4°C για 14-18 ώρες για να διαχωριστεί το θρόμβο.Τα δείγματα ορού μπορούν να δοκιμαστούν αμέσως μετά τον διαχωρισμό ή να αποσταλούν σε ψυγείο.Κατά την άφιξη στο εργαστήριο, μπορούν να φυλάσσονται κατεψυγμένα στους -70°C.

Σημείωση: Εάν ο ορός είναι κόκκινος, υποδηλώνει αιμολύση και δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη δοκιμή ELISA.

#03 Δείγματα οργάνων και ιστών

Συλλογή: Τα όργανα-στόχοι περιλαμβάνουν τη σπλήνα, τους λεμφαδένες, τις αμυγδαλές και τους νεφρούς.Τα δείγματα μεταφοράς ψύκονται και υποβάλλονται στο εργαστήριο το συντομότερο δυνατόν.Εάν η έγκαιρη παράδοση δεν είναι δυνατή, τα δείγματα μπορούν να αποθηκευτούν σε κατάψυξη ή σε υγρό άζωτο.Οι ιοί μπορούν να απενεργοποιηθούν με βύθιση σε 10% απόφρακτη φορμαλίνη για τουλάχιστον 30 λεπτά πριν από τη δοκιμή PCR..

#04 Ελαφριά Κρεμίδια

Συλλογή: Συλλογή μαλακών κροτίδων, διατηρώντας τα ζωντανά όσο το δυνατόν περισσότερο για να διασφαλιστεί η διατήρηση των ιών μέσα τους και να αποφευχθεί η υποβάθμιση του DNA.Τα μαλακά τσιμπούκια που συλλέγονται μπορούν να τοποθετηθούν σε φιαλίδιο/σωλήνα με βρόχο με μικρή ποσότητα χώματος.Μετά την άφιξη στο εργαστήριο δοκιμών, καταψύχεται στους -70°C ή τοποθετείται σε υγρό άζωτο.Εάν πραγματοποιείται μόνο μορφολογική παρατήρηση, τα δείγματα μπορούν να αποθηκεύονται σε αλκοόλη 100%.

Σημείωση: Η ίδια διαδικασία ισχύει και για άλλα έντομα, όπως τα κουνούπια και οι μύγες.

#05 Δείγματα περιβάλλοντος

Συλλογή: Συλλέγετε πολλαπλά περιβαλλοντικά υφάσματα, όπως περιττώματα, λεκέδες και ζωοτροφές, και αποθηκεύετε σε θερμοκρασία 4°C.

#06 Δείγματα σάλιου και σαμπουάν

Συλλογή: Ασφαλίστε ένα βαμβακερό σκοινί ή μια γάζα στο κάγκελο. Αφού το γουρούνι μασήσει φυσικά, συλλέξτε το υγρό που έχει απορροφηθεί από το σκοινί ή τη γάζα.Σφραγίστε και αποθηκεύστε σε ψυγείο για μεταφορά.

Για τα ρινικά υφάσματα, χρησιμοποιήστε ένα αποστειρωμένο βαμβάκι. Εισάγετε το 3-5 cm στη ρινική κοιλότητα του χοίρου σε γωνία 45°. Γυρίστε το υφάσμα απαλά 3-5 φορές για να διεγείρετε το αντανακλαστικό του φτέρνισματος του χοίρου.Περιμένετε μέχρι να υγροποιηθεί το υφάσμα. Αποθηκεύστε το δείγμα βαμβακιού σε ξεχωριστό καθαρό δοκιμαστικό σωλήνα ή σφραγισμένο σάκο.

Για τα πρωκτικά υφάσματα, χρησιμοποιήστε ένα αποστειρωμένο βαμβάκι βουτηγμένο σε αλατικό διάλυμα. Εισάγετε το δείγμα 2-3 cm στον πρωκτικό του γουρουνιού.αποθηκεύουν το δείγμα σε καθαρό σωλήνα δοκιμής ή σφραγισμένο σάκο. Αποθηκεύεται σε ψυγείο για μεταφορά.

Τα δείγματα υψηλής ποιότητας αποτελούν τη βασική βάση για τη διασφάλιση της ακρίβειας των αποτελεσμάτων των εργαστηριακών δοκιμών.η ακεραιότητα των βιολογικών μορίων μπορεί να διατηρηθεί αποτελεσματικά, παρέχοντας επαρκή πειραματική υποστήριξη για μετέπειτα ακριβή ανίχνευση νουκλεϊκών οξέων και αξιόπιστη διάγνωση.

Αποθήκευση και μεταφορά δειγμάτων

Για να διασφαλιστεί η ακρίβεια των αποτελεσμάτων των δοκιμών, συνιστούμε να αποστέλλονται τα δείγματα σε καθορισμένο εργαστήριο για δοκιμή το συντομότερο δυνατόν μετά τη συλλογή.Να χρησιμοποιείται μέθοδος παράδοσης την επόμενη ημέρα και να χρησιμοποιείται μεταφορά με ψυχρή αλυσίδα για την πρόληψη της υποβάθμισης των δειγμάτων και της απώλειας αποτελεσματικότητας..