wiadomości o firmie [Testowanie] Główny czynnik wpływający na wyniki testów ASF: prawidłowe pobieranie i przechowywanie próbek

Badania są najważniejszym elementem zapobiegania i zwalczania afrykańskiego pomoru świń.naukowy i standaryzowany charakter pobierania próbek wpływa nie tylko na wyniki badań, ale może również mieć wpływ na bezpieczeństwo gospodarstw wieprzowych.

W 2020 r. Chiny wydały krajowy standard "Afrykańska technologia diagnostyczna pomoru świń", GB/T 18648-2020.Niniejszy standard został ogłoszony i wdrożony przez Państwową Administrację Regulacji Rynku i Administrację Normalizacji Chin w dniu 14 grudnia., 2020 r.

Niniejsza norma krajowa obejmuje środki bezpieczeństwa biologicznego, diagnostykę kliniczną, pobór i przetwarzanie próbek diagnostycznych w laboratoriach, metody takie jak fluorescencyjna PCR ilościowa,i kompleksowej oceny.

Całkowity proces fluorescencyjnej ilościowej PCR wykrywania patogenów ASF obejmuje zazwyczaj: pobieranie i przechowywanie próbek; wstępne przetwarzanie próbek; ekstrakcję kwasu nukleinowego i przygotowanie roztworu;reakcja wzmacniania PCR ilościowej fluorescencji w czasie rzeczywistym; oraz wyników badań i ich analiza.

Z punktu widzenia laboratorium, odpowiednie zbieranie próbek i transport są kluczowe dla zapewnienia dokładnych wyników badań laboratoryjnych.

Jakie próbki należy pobrać? Jaka jest odpowiednia ilość? Jak należy je pobrać w sposób standaryzowany? Co należy zrobić po pobraniu? Jeśli próbki nie zostaną natychmiast przetestowane,jak należy je przechowywaćCo należy zrobić z badanymi próbkami?

Interpretując krajową normę dotyczącą technologii diagnostycznej ASF oraz "Specfikacje techniczne dotyczące kwarantanny afrykańskiego pomoru świń" (SN/T 1559-2010) wydane w 2010 r.,Przedstawiamy kluczowe punkty, które należy wziąć pod uwagę w odniesieniu do pobierania próbek klinicznych, przechowywanie i transport:

#01 Krew przeciwzakrzepowa (krew cała):

Zbieranie: Pobierz 5 ml całkowitej krwi z żyły gardłowej, żyły głębokiej dolnej lub żółtej żyły słuchowej, używając sterylnej rurki (wakutera) zawierającej lek przeciwzakrzepowy (fioletowa czapka EDTA).Jeżeli zwierzę zmarło, krew można pobrać z serca, ale należy to zrobić natychmiast. Transport krwi w lodówce, a po dotarciu do laboratorium badawczego przechowywać w temperaturze -70°C.

Uwaga: Nie stosować sterylnych rur do pobierania krwi z heparyną (zielona czapka), ponieważ hamuje ona reakcję PCR i łatwo powoduje fałszywe wyniki ujemne.

#02 Serum:

Zbieranie: Zbierz próbkę krwi o pojemności 5 ml z żyły kręgowej, żyły głębokiej dolnej lub żółtej żyły słuchowej lub podczas sekcji zwłok.Zaleca się najpierw inkubację próbki w temperaturze 4°C przez 14-18 godzin w celu oddzielenia zakrzepu.. Wyrzucić skrzep i odśrodkować na 10-15 minut. Zbierać przejrzysty nadmiernik (serum). Próbki sera można przetestować natychmiast po oddzieleniu lub wysłać w lodówce.Po przyjeździe do laboratorium, mogą być przechowywane zamrożone w temperaturze -70°C.

Uwaga: Jeśli serum jest czerwone, oznacza to hemolizę i nie może być stosowane do badań ELISA.

#03 Próbki narządów i tkanek

Zbiór: Do narządów docelowych należą śledziona, węzły chłonne, migdałki i nerki.Próbki transportowe schłodzone i przekazane do laboratorium tak szybko, jak to możliweJeżeli nie jest możliwe terminowe dostarczenie próbek, można je przechowywać w zamrażarce lub w ciekłym azotzie.Wirusy można inaktywować przez namoczenie w 10% buforowanej formaliny przez co najmniej 30 minut przed badaniem PCR..

#04 Miękkie kleszcze

Zbieranie: Zbieranie miękkich kleszczy, utrzymywanie ich przy życiu w miarę możliwości w celu zapewnienia zachowania wirusów w nich i zapobiegania degradacji DNA.Zbierane miękkie kleszcze można umieścić w fiolce/rurce z śrubokrętnym zamknięciem z niewielką ilością gleby.Po przyjeździe do laboratorium badawczego zamrażać w temperaturze -70°C lub umieszczać w ciekłym azotu.Jeżeli prowadzone jest jedynie obserwacja morfologiczna, próbki mogą być przechowywane w 100% alkoholu.

Uwaga: Ta sama procedura ma zastosowanie do innych owadów, takich jak komary i muchy.

#05 Próbki środowiskowe

Zbieranie: Zbierz wiele wymazów środowiskowych, takich jak kał, śliny i pasze, i przechowuj w temperaturze 4°C.

#06 Próbki śliny i wymazów

Zbieranie: Przymocować bawełnianą linę lub gazę do balustrady. Po naturalnym żuciu świni zbierz płyn wydobyty z liny lub gazy. Przechowywać próbkę w czystym probówce lub worku z zamknięciem.Zamknięcie i przechowywanie w pojemniku chłodzonym do transportu.

W przypadku wymazów z nosa należy użyć sterylnego wymazów z bawełny. Wprowadź je 3-5 cm do jamy nosa świni pod kątem 45°. Delikatnie obróć wymaz 3-5 razy, aby pobudzić odruch kichnięcia świni.Poczekaj, aż wymaz będzie wilgotny. Przechowywać próbkę bawełny w oddzielnej czystej probówce lub zamkniętym worku.

W przypadku wymazów analnych użyj sterylnego wymazów bawełnianych namoczonych w roztworze soli fizjologicznej.przechowywać próbkę w czystej probówce lub zamkniętym workuPrzechowywać w pojemniku chłodzonym do transportu.

Wysokiej jakości próbki stanowią kluczową podstawę zapewnienia dokładności wyników badań laboratoryjnych.można skutecznie utrzymać integralność molekuł biologicznych, zapewniając wystarczające wsparcie eksperymentalne dla późniejszego dokładnego wykrywania kwasu nukleinowego i wiarygodnej diagnozy.

Przechowywanie i transport próbek

W celu zapewnienia dokładności wyników badań zalecamy wysłanie próbek do wyznaczonego laboratorium w celu przeprowadzenia badań tak szybko, jak to możliwe po pobraniu.W celu zapobiegania degradacji próbek i utraty skuteczności należy stosować metodę dostarczania następnego dnia i wykorzystywać transport łańcuchem zimnym..