berita perusahaan tentang [Pengujian] Faktor utama yang mempengaruhi hasil tes ASF: pengumpulan dan penyimpanan sampel yang benar

Pengujian adalah komponen paling penting dari pencegahan dan pengendalian demam babi Afrika. Namun, sifat pengambilan sampel yang ilmiah dan terstandarisasi tidak hanya memengaruhi hasil pengujian tetapi juga dapat memengaruhi keselamatan peternakan babi.

Pada tahun 2020, Tiongkok mengeluarkan standar nasional "Teknologi diagnostik demam babi Afrika," GB/T 18648-2020. Standar ini diumumkan dan diimplementasikan oleh Administrasi Negara untuk Regulasi Pasar dan Administrasi Standardisasi Tiongkok pada 14 Desember 2020.

Standar nasional ini mencakup langkah-langkah biosafety, diagnosis klinis, pengambilan dan pemrosesan sampel diagnostik laboratorium, metode seperti PCR kuantitatif fluoresensi, dan penilaian komprehensif.

Proses deteksi PCR kuantitatif fluoresensi patogen ASF yang lengkap umumnya meliputi: pengambilan dan penyimpanan sampel; pra-perlakuan sampel; ekstraksi asam nukleat dan persiapan larutan; reaksi amplifikasi PCR kuantitatif fluoresensi real-time; dan keluaran serta analisis hasil pengujian.

Dari perspektif laboratorium, pengambilan dan transportasi sampel yang tepat sangat penting untuk memastikan hasil pengujian laboratorium yang akurat.

Sampel apa yang harus dikumpulkan? Berapa jumlah yang sesuai? Bagaimana cara mengumpulkannya secara terstandarisasi? Apa yang harus dilakukan setelah pengumpulan? Jika sampel tidak diuji segera, bagaimana cara menyimpannya? Apa yang harus dilakukan dengan sampel yang telah diuji?

Dengan menafsirkan standar nasional untuk teknologi diagnostik ASF dan "Spesifikasi Teknis untuk Karantina Demam Babi Afrika" (SN/T 1559-2010) yang dikeluarkan pada tahun 2010, kami menyajikan poin-poin penting yang perlu dipertimbangkan mengenai pengambilan, penyimpanan, dan transportasi sampel klinis:

#01 Darah Antikoagulan (Darah Utuh):

Pengambilan: Ambil 5 ml darah utuh dari vena jugularis, vena cava inferior, atau vena aurikular marginal menggunakan tabung steril (vacutainer) yang berisi antikoagulan (tutup ungu EDTA). Jika hewan sudah mati, darah dapat diambil dari jantung, tetapi ini harus dilakukan segera. Transportasikan darah dalam keadaan didinginkan dan, setelah tiba di laboratorium pengujian, simpan pada suhu -70°C.

Catatan: Jangan gunakan tabung pengumpul darah steril dengan heparin (tutup hijau), karena akan menghambat reaksi PCR dan mudah menyebabkan hasil negatif palsu.

#02 Serum:

Pengambilan: Kumpulkan sampel darah 5ml menggunakan vacutainer tanpa antikoagulan dari vena jugularis, vena cava inferior, atau vena aurikular marginal, atau selama nekropsi. Disarankan untuk pertama-tama menginkubasi sampel pada suhu 4°C selama 14-18 jam untuk memisahkan gumpalan. Buang gumpalan dan sentrifugasi selama 10-15 menit. Kumpulkan supernatan yang jernih (serum). Sampel serum dapat diuji segera setelah pemisahan atau dikirim dalam keadaan didinginkan. Setelah tiba di laboratorium, sampel dapat disimpan beku pada suhu -70°C.

Catatan: Jika serum berwarna merah, itu menunjukkan hemolisis dan tidak dapat digunakan untuk pengujian ELISA.

#03 Sampel Organ dan Jaringan

Pengambilan: Organ target meliputi limpa, kelenjar getah bening, amandel, dan ginjal. Limpa dan kelenjar getah bening biasanya memiliki muatan virus tertinggi. Transportasikan sampel dalam keadaan didinginkan dan kirimkan ke laboratorium sesegera mungkin. Jika pengiriman tepat waktu tidak memungkinkan, sampel dapat disimpan dalam freezer atau dalam nitrogen cair. Virus dapat dinonaktifkan dengan merendam dalam formalin 10% yang dibuffer setidaknya selama 30 menit sebelum pengujian PCR.

#04 Kutu Lunak

Pengambilan: Kumpulkan kutu lunak, usahakan tetap hidup sebanyak mungkin untuk memastikan pelestarian virus di dalamnya dan untuk mencegah degradasi DNA. Kutu lunak yang dikumpulkan dapat ditempatkan dalam botol/tabung berlapis sekrup dengan sedikit tanah, dilapisi kain kasa, dan disimpan pada suhu kamar untuk transportasi. Setelah tiba di laboratorium pengujian, bekukan pada suhu -70°C atau tempatkan dalam nitrogen cair. Jika hanya pengamatan morfologi yang dilakukan, sampel dapat disimpan dalam alkohol 100%.

Catatan: Prosedur yang sama berlaku untuk serangga lain, seperti nyamuk dan lalat. Usahakan tetap hidup sebanyak mungkin untuk pengujian, atau simpan langsung dalam nitrogen cair.

#05 Sampel Lingkungan

Pengambilan: Kumpulkan beberapa usapan lingkungan, seperti feses, limbah, dan pakan, dan simpan pada suhu 4°C.

#06 Sampel Air Liur dan Usap

Pengambilan: Amankan tali katun atau kain kasa ke pagar. Setelah babi mengunyah secara alami, kumpulkan cairan yang diekstraksi dari tali atau kain kasa. Simpan sampel dalam tabung uji bersih atau kantong ziplock. Segel dan simpan dalam wadah berpendingin untuk transportasi.

Untuk usap hidung, gunakan usap kapas steril. Masukkan 3-5 cm ke dalam rongga hidung babi pada sudut 45°. Putar usap dengan lembut 3-5 kali untuk merangsang refleks bersin babi. Tunggu sampai usap lembab. Simpan sampel usap kapas dalam tabung uji bersih terpisah atau kantong tertutup. Segel dan simpan dalam wadah berpendingin untuk transportasi.

Untuk usap dubur, gunakan usap kapas steril yang direndam dalam larutan garam. Masukkan sampel 2-3 cm ke dalam anus babi. Putar dan gosok usap dengan lembut. Kemudian, simpan sampel dalam tabung uji bersih atau kantong tertutup. Simpan dalam wadah berpendingin untuk transportasi.

Sampel berkualitas tinggi adalah dasar utama untuk memastikan keakuratan hasil pengujian laboratorium. Melalui pengambilan sampel, pengawetan, dan pra-perlakuan yang terstandarisasi, integritas molekul biologis dapat dipertahankan secara efektif, memberikan dukungan eksperimen yang cukup untuk deteksi asam nukleat yang akurat dan diagnosis yang andal.

Penyimpanan dan Transportasi Sampel

Untuk memastikan keakuratan hasil pengujian, kami merekomendasikan agar sampel dikirim ke laboratorium yang ditunjuk untuk pengujian sesegera mungkin setelah pengambilan. Gunakan metode pengiriman hari berikutnya dan gunakan transportasi rantai dingin untuk mencegah degradasi sampel dan hilangnya khasiat.