Тестирование является наиболее важным компонентом профилактики и борьбы с африканской чумой свиней.Научный и стандартизированный характер отбора проб влияет не только на результаты испытаний, но и может влиять на безопасность свиноводческих хозяйств..
В 2020 году Китай выпустил национальный стандарт "Африканская технология диагностики свиной лихорадки", GB/T 18648-2020.Этот стандарт был обнародован и реализован Государственной администрацией по регулированию рынка и Управлением по стандартизации Китая 14 декабря., 2020 г.
Настоящий национальный стандарт охватывает меры биобезопасности, клиническую диагностику, сбор и обработку лабораторных диагностических образцов, методы, такие как флуоресцентная количественная ПЦР,и всеобъемлющая оценка.
Процесс полной флуоресцентной количественной ПЦР обнаружения патогена АЧС обычно включает в себя: сбор и хранение проб; предварительную обработку проб; экстракцию нуклеиновой кислоты и подготовку раствора;Флуоресцентная количественная реакция усиления ПЦР в реальном времени; и результаты испытаний и анализ.
С лабораторной точки зрения, правильный сбор и транспортировка образцов имеют первостепенное значение для обеспечения точных результатов лабораторных испытаний.
Какие образцы следует собирать? Какое количество должно быть принято? Как их следует собирать стандартизированным образом? Что следует делать после сбора? Если образцы не проверяются незамедлительно,как их хранитьЧто делать с пробы?
В соответствии с национальным стандартом по диагностике АЧС и "Техническими спецификациями по карантину африканской чумы свиней" (SN/T 1559-2010), изданными в 2010 году,мы представляем ключевые моменты, которые следует учитывать в отношении сбора клинических образцов, хранение и транспортировка:
#01 Антикоагуляционная кровь (цельная кровь):
Сбор: извлечь 5 мл цельной крови из югулярной вены, нижней порожнистой вены или пограничной ушной вены с помощью стерильной трубки (вакутанер), содержащей антикоагулянт (EDTA- фиолетовый колпак).Если животное умерлоПеревозка крови в холодильнике и, по прибытии в лабораторию, хранение ее при температуре -70°C.
Примечание: Не используйте стерильные трубки для сбора крови с гепарином (зеленая крышка), так как это будет ингибировать реакцию ПЦР и легко вызвать ложноотрицательные результаты.
#02 Сыворотка:
Сбор: Сбор 5 мл образца крови с помощью неантикоагулянтного вакуутера из югулярной вены, нижней порожнистой вены или пограничной ушной вены или во время некропсии.Рекомендуется сначала инкубировать образец при температуре 4°C в течение 14-18 часов для отделения сгустка.. Выбросить сгусток и центрифугировать в течение 10-15 минут. Соберите прозрачный сверхноситель (серум). Образцы сыворотки можно протестировать сразу после отделения или отправить в холодильнике.По прибытии в лабораторию, они могут храниться замороженными при температуре -70°C.
Примечание: если сыворотка красная, это указывает на гемолиз и не может быть использована для ELISA-тестирования.
#03 Образцы органов и тканей
Сбор: целевые органы включают селезенку, лимфатические узлы, миндалины и почки.Транспортируемые образцы охлаждаются и передаются в лабораторию как можно скорее.Если своевременная доставка невозможна, образцы могут храниться в морозильнике или в жидком азоте.Вирусы могут быть инактивированы путем замочивания в 10% буферизированного формалина в течение не менее 30 минут до ПЦР-тестирования..
#04 Мягкие клещи
Сбор: собирать мягких клещей, сохраняя их в живых как можно больше, чтобы обеспечить сохранение вирусов внутри них и предотвратить деградацию ДНК.Собранные мягкие клещи можно поместить в винтовую флаконку/трубку с небольшим количеством почвы.По прибытии в испытательную лабораторию заморозить при температуре -70°C или поместить в жидкий азот.Если проводится только морфологическое наблюдение, образцы могут храниться в 100% алкоголе.
Примечание: такая же процедура применяется и к другим насекомым, таким как комары и мухи.
#05 Образцы окружающей среды
Сбор: собирать множество экологических мазков, таких как фекалии, гной и корм для животных, и хранить при температуре 4°C.
#06 Образцы слюны и проб
После того, как свинья естественным образом пережевывает, собирать жидкость, извлеченную из веревки или марли. Хранить образец в чистой пробирке или рюкзаке.Запечатать и хранить в холодильном контейнере для транспортировки.
Для носовых тампонов используйте стерильный хлопковый тампон. Вставьте его на 3-5 см в носовую полость свиньи под углом 45°. Осторожно поверните тампон 3-5 раз, чтобы стимулировать рефлекс чихания свиньи.Подождите, пока мазок не увлажнится.. Хранить образцы хлопка в отдельной чистой пробирке или запечатанном мешке. Запечатать и хранить в холодильном контейнере для транспортировки.
Для анальных тампонов используйте стерильный ватный тампон, пропитанный солевым раствором.хранить образец в чистой пробирке или запечатанном мешкеХранить в холодильном контейнере для транспортировки.
Высококачественные образцы являются ключевой основой для обеспечения точности результатов лабораторных испытаний.целостность биологических молекул может быть эффективно сохранена, обеспечивая достаточную экспериментальную поддержку для последующего точного обнаружения нуклеиновых кислот и надежной диагностики.
Хранение и транспортировка образцов
Чтобы гарантировать точность результатов испытаний, мы рекомендуем отправить образцы в специальную лабораторию для тестирования как можно скорее после сбора.Использовать метод доставки на следующий день и использовать транспортировку холодной цепи для предотвращения деградации образца и потери эффективности.
Контактное лицо: Mr. Huang Jingtai
Телефон: 17743230916