ข่าว บริษัท เกี่ยวกับ [การทดสอบ] ปัจจัยหลักที่ส่งผลต่อผลการทดสอบ ASF: การเก็บตัวอย่างและการเก็บรักษาที่ถูกต้อง

การทดสอบเป็นส่วนประกอบที่สำคัญที่สุดในการป้องกันและควบคุมโรคอหิวาต์แอฟริกาในสุกร อย่างไรก็ตาม ลักษณะทางวิทยาศาสตร์และมาตรฐานของการสุ่มตัวอย่างไม่เพียงส่งผลกระทบต่อผลการทดสอบเท่านั้น แต่ยังส่งผลกระทบต่อความปลอดภัยของฟาร์มสุกรอีกด้วย

ในปี 2020 ประเทศจีนได้ออกมาตรฐานแห่งชาติ "เทคโนโลยีการวินิจฉัยโรคอหิวาต์แอฟริกาในสุกร" GB/T 18648-2020 มาตรฐานนี้ได้รับการประกาศใช้และดำเนินการโดย State Administration for Market Regulation และ Standardization Administration of China เมื่อวันที่ 14 ธันวาคม 2020

มาตรฐานแห่งชาติฉบับนี้ครอบคลุมมาตรการความปลอดภัยทางชีวภาพ การวินิจฉัยทางคลินิก การเก็บตัวอย่างและการประมวลผลในห้องปฏิบัติการ วิธีการต่างๆ เช่น PCR เชิงปริมาณแบบฟลูออเรสเซนซ์ และการประเมินผลอย่างครอบคลุม

กระบวนการตรวจจับ PCR เชิงปริมาณแบบฟลูออเรสเซนซ์ของเชื้อก่อโรค ASF ที่สมบูรณ์โดยทั่วไปประกอบด้วย: การเก็บตัวอย่างและการจัดเก็บ การเตรียมตัวอย่างเบื้องต้น การสกัดกรดนิวคลีอิกและการเตรียมสารละลาย ปฏิกิริยาการขยายพันธุ์ PCR เชิงปริมาณแบบฟลูออเรสเซนซ์แบบเรียลไทม์ และการแสดงผลและการวิเคราะห์ผลการทดสอบ

จากมุมมองของห้องปฏิบัติการ การเก็บตัวอย่างและการขนส่งที่เหมาะสมมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการรับรองผลการทดสอบในห้องปฏิบัติการที่ถูกต้อง

ควรเก็บตัวอย่างอะไรบ้าง? ปริมาณที่เหมาะสมคือเท่าไหร่? ควรเก็บตัวอย่างอย่างไรตามมาตรฐาน? ควรทำอย่างไรหลังการเก็บตัวอย่าง? หากไม่มีการทดสอบตัวอย่างทันที ควรเก็บตัวอย่างอย่างไร? ควรทำอย่างไรกับตัวอย่างที่ผ่านการทดสอบแล้ว?

โดยการตีความมาตรฐานแห่งชาติสำหรับเทคโนโลยีการวินิจฉัยโรค ASF และ "ข้อกำหนดทางเทคนิคสำหรับการกักกันโรคอหิวาต์แอฟริกาในสุกร" (SN/T 1559-2010) ที่ออกในปี 2010 เรานำเสนอประเด็นสำคัญที่ต้องพิจารณาเกี่ยวกับการเก็บตัวอย่างทางคลินิก การจัดเก็บ และการขนส่ง:

#01 เลือดที่ใส่สารกันเลือดแข็ง (เลือดครบส่วน):

การเก็บตัวอย่าง: ดูดเลือดครบส่วน 5 มล. จากหลอดเลือดดำ jugular, inferior vena cava หรือ marginal auricular vein โดยใช้หลอดปลอดเชื้อ (vacutainer) ที่มีสารกันเลือดแข็ง (EDTA-ฝาสีม่วง) หากสัตว์ตาย สามารถเก็บเลือดจากหัวใจได้ แต่ต้องทำทันที ขนส่งเลือดโดยการแช่เย็น และเมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการทดสอบ ให้เก็บไว้ที่ -70°C

หมายเหตุ: ห้ามใช้หลอดเก็บเลือดปลอดเชื้อที่มีเฮพาริน (ฝาสีเขียว) เนื่องจากจะยับยั้งปฏิกิริยา PCR และทำให้เกิดผลลบปลอมได้ง่าย

#02 ซีรั่ม:

การเก็บตัวอย่าง: เก็บตัวอย่างเลือด 5 มล. โดยใช้ vacutainer ที่ไม่มีสารกันเลือดแข็งจากหลอดเลือดดำ jugular, inferior vena cava หรือ marginal auricular vein หรือระหว่างการชันสูตรศพ ขอแนะนำให้บ่มตัวอย่างที่ 4°C เป็นเวลา 14-18 ชั่วโมงก่อนเพื่อแยกก้อนเลือด ทิ้งก้อนเลือดและปั่นเหวี่ยงเป็นเวลา 10-15 นาที เก็บส่วนใส (ซีรั่ม) ตัวอย่างซีรั่มสามารถทดสอบได้ทันทีหลังการแยกหรือจัดส่งโดยการแช่เย็น เมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการ สามารถเก็บไว้ในช่องแช่แข็งที่ -70°C

หมายเหตุ: หากซีรั่มเป็นสีแดง แสดงว่ามีการสลายของเม็ดเลือดแดงและไม่สามารถใช้สำหรับการทดสอบ ELISA ได้

#03 ตัวอย่างอวัยวะและเนื้อเยื่อ

การเก็บตัวอย่าง: อวัยวะเป้าหมาย ได้แก่ ม้าม ต่อมน้ำเหลือง ทอนซิล และไต ม้ามและต่อมน้ำเหลืองมักมีปริมาณไวรัสสูงสุด ขนส่งตัวอย่างโดยการแช่เย็นและส่งไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุด หากไม่สามารถส่งมอบได้ทันเวลา สามารถเก็บตัวอย่างไว้ในช่องแช่แข็งหรือในไนโตรเจนเหลว ไวรัสสามารถถูกทำให้หมดฤทธิ์ได้โดยการแช่ในฟอร์มาลินบัฟเฟอร์ 10% เป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาที ก่อนทำการทดสอบ PCR

#04 เห็บอ่อน

การเก็บตัวอย่าง: เก็บเห็บอ่อน โดยเก็บไว้ให้มีชีวิตอยู่ให้มากที่สุดเท่าที่จะทำได้ เพื่อให้แน่ใจว่ามีการเก็บรักษาไวรัสไว้ภายในและเพื่อป้องกันการเสื่อมสภาพของ DNA เห็บอ่อนที่เก็บรวบรวมสามารถวางในขวด/หลอดที่มีฝาเกลียวที่มีดินเล็กน้อย บุด้วยผ้ากอซ และเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องสำหรับการขนส่ง เมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการทดสอบ ให้แช่แข็งที่ -70°C หรือวางในไนโตรเจนเหลว หากทำการสังเกตลักษณะทางสัณฐานวิทยาเท่านั้น สามารถเก็บตัวอย่างไว้ในแอลกอฮอล์ 100%

หมายเหตุ: ขั้นตอนเดียวกันนี้ใช้กับแมลงอื่นๆ เช่น ยุงและแมลงวัน เก็บไว้ให้มีชีวิตอยู่ให้มากที่สุดเท่าที่จะทำได้สำหรับการทดสอบ หรือเก็บไว้ในไนโตรเจนเหลวโดยตรง

#05 ตัวอย่างสิ่งแวดล้อม

การเก็บตัวอย่าง: เก็บไม้กวาดสิ่งแวดล้อมหลายตัวอย่าง เช่น อุจจาระ น้ำเสีย และอาหารสัตว์ และเก็บไว้ที่ 4°C

#06 น้ำลายและตัวอย่างไม้กวาด

การเก็บตัวอย่าง: ยึดเชือกฝ้ายหรือผ้ากอซเข้ากับราว หลังจากที่หมูกัดตามธรรมชาติ ให้เก็บของเหลวที่สกัดจากเชือกหรือผ้ากอซ เก็บตัวอย่างในหลอดทดลองที่สะอาดหรือถุงซิปล็อค ปิดผนึกและเก็บไว้ในภาชนะแช่เย็นสำหรับการขนส่ง

สำหรับไม้กวาดจมูก ให้ใช้ไม้กวาดสำลีปลอดเชื้อ สอดเข้าไปในโพรงจมูกของหมูลึก 3-5 ซม. ที่มุม 45° ค่อยๆ หมุนไม้กวาด 3-5 ครั้งเพื่อกระตุ้นการจามของหมู รอจนกว่าไม้กวาดจะเปียก เก็บตัวอย่างไม้กวาดสำลีในหลอดทดลองที่สะอาดแยกต่างหากหรือถุงปิดผนึก ปิดผนึกและเก็บไว้ในภาชนะแช่เย็นสำหรับการขนส่ง

สำหรับไม้กวาดทวารหนัก ให้ใช้ไม้กวาดสำลีปลอดเชื้อที่แช่ในสารละลายน้ำเกลือ สอดตัวอย่างเข้าไปในทวารหนักของหมูลึก 2-3 ซม. ค่อยๆ หมุนไม้กวาดและถู จากนั้นเก็บตัวอย่างในหลอดทดลองที่สะอาดหรือถุงปิดผนึก เก็บไว้ในภาชนะแช่เย็นสำหรับการขนส่ง

ตัวอย่างคุณภาพสูงเป็นพื้นฐานสำคัญในการรับรองความถูกต้องของผลการทดสอบในห้องปฏิบัติการ ด้วยการเก็บตัวอย่าง การเก็บรักษา และการควบคุมคุณภาพเบื้องต้นตามมาตรฐาน โมเลกุลทางชีวภาพสามารถคงความสมบูรณ์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งให้การสนับสนุนการทดลองที่เพียงพอสำหรับการตรวจจับกรดนิวคลีอิกที่แม่นยำและการวินิจฉัยที่เชื่อถือได้ในภายหลัง

การจัดเก็บและการขนส่งตัวอย่าง

เพื่อให้แน่ใจว่าผลการทดสอบถูกต้อง เราขอแนะนำให้ส่งตัวอย่างไปยังห้องปฏิบัติการที่กำหนดเพื่อทำการทดสอบโดยเร็วที่สุดหลังการเก็บตัวอย่าง ใช้วิธีการจัดส่งในวันถัดไปและใช้การขนส่งแบบโซ่เย็นเพื่อป้องกันการเสื่อมสภาพของตัวอย่างและการสูญเสียประสิทธิภาพ