परीक्षण अफ्रीकी स्वाइन बुखार की रोकथाम और नियंत्रण का सबसे महत्वपूर्ण घटक है। हालाँकि, नमूने की वैज्ञानिक और मानकीकृत प्रकृति न केवल परीक्षण के परिणामों को प्रभावित करती है, बल्कि सुअर फार्मों की सुरक्षा को भी प्रभावित कर सकती है।
2020 में, चीन ने राष्ट्रीय मानक "अफ्रीकी स्वाइन बुखार नैदानिक प्रौद्योगिकी," GB/T 18648-2020 जारी किया। यह मानक 14 दिसंबर, 2020 को बाजार विनियमन के लिए राज्य प्रशासन और चीन के मानकीकरण प्रशासन द्वारा जारी और लागू किया गया था।
यह राष्ट्रीय मानक जैव सुरक्षा उपायों, नैदानिक निदान, प्रयोगशाला नैदानिक नमूना संग्रह और प्रसंस्करण, फ्लोरेसेंस मात्रात्मक पीसीआर जैसे तरीकों और व्यापक मूल्यांकन को शामिल करता है।
एक पूर्ण एएसएफ रोगज़नक़ फ्लोरेसेंस मात्रात्मक पीसीआर पहचान प्रक्रिया में आम तौर पर शामिल हैं: नमूना संग्रह और भंडारण; नमूना पूर्व उपचार; न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और समाधान तैयार करना; वास्तविक समय फ्लोरेसेंस मात्रात्मक पीसीआर प्रवर्धन प्रतिक्रिया; और परीक्षण परिणाम आउटपुट और विश्लेषण।
एक प्रयोगशाला के दृष्टिकोण से, सटीक प्रयोगशाला परीक्षण परिणामों को सुनिश्चित करने के लिए उचित नमूना संग्रह और परिवहन सर्वोपरि है।
कौन से नमूने एकत्र किए जाने चाहिए? उचित मात्रा क्या है? उन्हें मानकीकृत तरीके से कैसे एकत्र किया जाना चाहिए? संग्रह के बाद क्या किया जाना चाहिए? यदि नमूनों का तुरंत परीक्षण नहीं किया जाता है, तो उन्हें कैसे संग्रहीत किया जाना चाहिए? परीक्षण किए गए नमूनों का क्या किया जाना चाहिए?
एएसएफ नैदानिक प्रौद्योगिकी के लिए राष्ट्रीय मानक और 2010 में जारी "अफ्रीकी स्वाइन बुखार संगरोध के लिए तकनीकी विनिर्देश" (SN/T 1559-2010) की व्याख्या करके, हम नैदानिक नमूना संग्रह, भंडारण और परिवहन के संबंध में विचार करने योग्य मुख्य बिंदुओं को प्रस्तुत करते हैं:
#01 एंटीकोगुलेटेड रक्त (पूर्ण रक्त):
संग्रह: एक बाँझ ट्यूब (वैक्यूटेनर) का उपयोग करके जुगुलर नस, अवर वेना कावा, या सीमांत ऑरिक्युलर नस से 5 मिलीलीटर पूर्ण रक्त निकालें जिसमें एक एंटीकोगुलेट (ईडीटीए-बैंगनी टोपी) हो। यदि जानवर की मृत्यु हो गई है, तो दिल से रक्त एकत्र किया जा सकता है, लेकिन यह तुरंत किया जाना चाहिए। रक्त को प्रशीतित करें और परीक्षण प्रयोगशाला में पहुंचने पर, इसे -70 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत करें।
नोट: हेपरिन (हरी टोपी) के साथ बाँझ रक्त संग्रह ट्यूब का उपयोग न करें, क्योंकि यह पीसीआर प्रतिक्रिया को बाधित करेगा और आसानी से झूठे नकारात्मक कारण बनेगा।
#02 सीरम:
संग्रह: जुगुलर नस, अवर वेना कावा, या सीमांत ऑरिक्युलर नस से, या शव परीक्षा के दौरान, एक गैर-एंटीकोगुलेट वैक्यूटेनर का उपयोग करके 5 मिलीलीटर रक्त का नमूना एकत्र करें। थक्के को अलग करने के लिए नमूने को पहले 14-18 घंटे के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करने की सिफारिश की जाती है। थक्के को त्यागें और 10-15 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज करें। स्पष्ट सुपरनेटेंट (सीरम) एकत्र करें। सीरम के नमूनों का पृथक्करण के तुरंत बाद परीक्षण किया जा सकता है या प्रशीतित किया जा सकता है। प्रयोगशाला में पहुंचने पर, उन्हें -70 डिग्री सेल्सियस पर जमाया जा सकता है।
नोट: यदि सीरम लाल है, तो यह हेमोलिसिस को इंगित करता है और इसका उपयोग एलिसा परीक्षण के लिए नहीं किया जा सकता है।
#03 अंग और ऊतक के नमूने
संग्रह: लक्षित अंगों में प्लीहा, लिम्फ नोड्स, टॉन्सिल और गुर्दे शामिल हैं। प्लीहा और लिम्फ नोड्स में आमतौर पर सबसे अधिक वायरल भार होता है। नमूनों को प्रशीतित करें और उन्हें जल्द से जल्द प्रयोगशाला में जमा करें। यदि समय पर डिलीवरी संभव नहीं है, तो नमूनों को फ्रीजर में या तरल नाइट्रोजन में संग्रहीत किया जा सकता है। पीसीआर परीक्षण से पहले 10% बफ़र्ड फॉर्मेलिन में कम से कम 30 मिनट तक भिगोकर वायरस को निष्क्रिय किया जा सकता है।
#04 सॉफ्ट टिक
संग्रह: सॉफ्ट टिक एकत्र करें, उन्हें जितना संभव हो जीवित रखें ताकि उनमें वायरस का संरक्षण सुनिश्चित हो सके और डीएनए के क्षरण को रोका जा सके। एकत्र किए गए सॉफ्ट टिक को मिट्टी की थोड़ी मात्रा के साथ एक पेंच-कैप्ड शीशी/ट्यूब में रखा जा सकता है, जिसे जाली के साथ पंक्तिबद्ध किया जा सकता है, और परिवहन के लिए कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है। परीक्षण प्रयोगशाला में पहुंचने पर, -70 डिग्री सेल्सियस पर जमा दें या तरल नाइट्रोजन में रखें। यदि केवल रूपात्मक अवलोकन किया जा रहा है, तो नमूनों को 100% अल्कोहल में संग्रहीत किया जा सकता है।
नोट: यही प्रक्रिया अन्य कीड़ों, जैसे मच्छरों और मक्खियों पर लागू होती है। परीक्षण के लिए उन्हें जितना संभव हो जीवित रखें, या सीधे तरल नाइट्रोजन में संग्रहीत करें।
#05 पर्यावरणीय नमूने
संग्रह: कई पर्यावरणीय स्वाब, जैसे मल, स्वाइल और फ़ीड एकत्र करें, और 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत करें।
#06 लार और स्वाब नमूने
संग्रह: रेलिंग पर एक सूती रस्सी या जाली सुरक्षित करें। सुअर के स्वाभाविक रूप से चबाने के बाद, रस्सी या जाली से निकाले गए तरल को एकत्र करें। नमूने को एक साफ टेस्ट ट्यूब या ज़िपलॉक बैग में स्टोर करें। परिवहन के लिए एक प्रशीतक कंटेनर में सील और स्टोर करें।
नाक के स्वाब के लिए, एक बाँझ सूती झाड़ू का प्रयोग करें। इसे सुअर की नाक गुहा में 45 डिग्री के कोण पर 3-5 सेमी डालें। सुअर की छींकने की प्रतिक्रिया को उत्तेजित करने के लिए झाड़ू को धीरे से 3-5 बार घुमाएँ। जब तक झाड़ू नम न हो जाए तब तक प्रतीक्षा करें। सूती झाड़ू के नमूने को एक अलग साफ टेस्ट ट्यूब या सीलबंद बैग में स्टोर करें। परिवहन के लिए एक प्रशीतित कंटेनर में सील और स्टोर करें।
गुदा स्वाब के लिए, खारा घोल में डूबा हुआ एक बाँझ सूती झाड़ू का प्रयोग करें। नमूने को सुअर के गुदा में 2-3 सेमी डालें। झाड़ू को धीरे से घुमाएँ और रगड़ें। फिर, नमूने को एक साफ टेस्ट ट्यूब या सीलबंद बैग में स्टोर करें। परिवहन के लिए एक प्रशीतित कंटेनर में स्टोर करें।
उच्च गुणवत्ता वाले नमूने प्रयोगशाला परीक्षण परिणामों की सटीकता सुनिश्चित करने का मुख्य आधार हैं। मानकीकृत नमूना संग्रह, संरक्षण और पूर्व उपचार गुणवत्ता नियंत्रण के माध्यम से, जैविक अणुओं की अखंडता को प्रभावी ढंग से बनाए रखा जा सकता है, जो बाद में सटीक न्यूक्लिक एसिड पहचान और विश्वसनीय निदान के लिए पर्याप्त प्रयोगात्मक सहायता प्रदान करता है।
नमूना भंडारण और परिवहन
परीक्षण परिणामों की सटीकता सुनिश्चित करने के लिए, हम अनुशंसा करते हैं कि संग्रह के तुरंत बाद नमूनों को परीक्षण के लिए एक निर्दिष्ट प्रयोगशाला में भेजा जाए। अगले दिन डिलीवरी विधि का उपयोग करें और नमूना गिरावट और प्रभावकारिता के नुकसान को रोकने के लिए कोल्ड चेन परिवहन का उपयोग करें।
व्यक्ति से संपर्क करें: Mr. Huang Jingtai
दूरभाष: 17743230916