أخبار الشركة عن فيروس متلازمة الخنازير التناسلية والتنفسية من النوع 1 شديد الضراوة في الخنازير

لا تزال متلازمة التكاثر والجهاز التنفسي للخنازير (PRRS) واحدة من أهم الأمراض المعدية التي تؤثر على صناعة الخنازير العالمية.قدّم الظهور الأخير للسلالة المسببة للأمراض العالية PRRSV-1 في شمال شرق إسبانيا (التي تم اكتشافها لأول مرة في عام 2020) تحديات جديدة لمكافحة المرض.على الرغم من أن هذه السلالات الخبيثة مدمرة في الميدان، إلا أنّه لم يتمّ تحليل خصائصها التجريبية الشاملة بالكامل بعد.هذه الدراسة بحثت بشكل منهجي في الأصول الوراثية، خصائص التكرار في المختبر وآليات المرضية للسلالة الإسبانية العالية المرضية PRRSV-1 الجديدة ، Lleida 029_22 ،من خلال طرق العدوى المزدوجة (المضغ و المضغ).

تحليلت دراسة حديثة نُشرت في مكتبة وايلي عبر الإنترنت الخصائص الوراثية والمرضوية للسلالة المسببة للأمراض العالية PRRSV-1 Lleida 029_22 في الخنازير.كشف التحليل الوراثي أن سلالة Lleida 029_22 تنتمي إلى فصيلة جديدة مرتبطة بتفشي PRRSV-1 Rosalia وهي متجانسة للسلالة الإيطالية ذات المرضية العالية PR40يكرر هذا السلالة بكفاءة في خلايا الخنازير الكبيرة والخلايا PAM-KNU in vitro، ولكن ليس في خلايا MARC-145.

لتقييم مُسببة الأمراض، تمّ تطعيم خنازير عمرها ثمانية أسابيع بنفس جرعة 2×105 TCID5 من Lleida 029_22 عن طريق الحقن داخل العضلات (IM) والحقن داخل الأنف (IN).أدى التلقيح داخل الجسم إلى وفاة بنسبة 100% خلال 14 يوم، يرافقه ارتفاع نسبة الفيروسات ، وارتفاع نسبة التخلص من الفيروسات ، وارتفاع مستويات السيتوكينات الموالية للالتهابات (وخاصة IL- 6) ، وآفات الرئة الشديدة.كان لدى الخنازير التي تم تطعيمها باللقاح IN معدل وفيات أقل (30%) وأعراض سريرية معتدلةتعافى الناجون بعد 63 يوماً، ولكن أظهروا فيرمياً طويلة الأمد و إزالة، ومستويات منخفضة من السيتوكينات الموالية للالتهابات والجسم المضاد المُحيّد من اليوم 28 فصاعداً.

من المثير للاهتمام أن "التهابات" قد استعادت بشكل صحيح الأعراض السريرية لانتشار المرض الناجم عن سلالة "روزاليا" شديدة الفيروسات في المزارع الإسبانيةبينما أبرزت العدوى الداخلية مخاطر العدوى.

الخلفية: فيروس متلازمة التكاثر والتنفس للخنازير (PRRSV) هو مسبب مرض رئيسي يهدد صناعة الخنازير العالمية.فالتباين الكبير والتنوع يجعل اللقاحات الحالية غير فعالة بشكل متسقفي عام 2020، ظهرت سلالة من فيروس PRRSV-1 شديدة الفيروسية تسمى "روزاليا" في إسبانيا وانتشرت بسرعة، مما تسبب في خسائر كبيرة (على سبيل المثال، زيادة الوفيات خلال موسم النمو).التحليل الجيني يشير إلى أنه ربما نشأ من سلالة إيطالية شديدة الفيروسات، PR40، من خلال إعادة التركيب. هذا السلالة تسبب ارتفاع معدلات الإجهاض والوفيات (> 20٪) في الميدان، ولكن هناك نقص في البيانات التجريبية المنهجية.

أهداف الدراسة وأساليبها: كانت هذه الدراسة تهدف إلى وصف سلالة PRRSV-1 شديدة الفيروسية المعزولة من تفشي روزاليا بشكل شامل باستخدام التجارب في المختبر وفي المخلوقات الحية.تم تطعيم الخنازير البالغة من العمر ثمانية أسابيع عن طريق كل من طرق العدوى داخل العضلات (IM) و داخل الأنف (IN)، في حين أن IN يحاكي العدوى الطبيعية).

أهداف الاختبار: وثائق مفصلة عن العلامات السريرية والوفيات؛ الفحوصات المرضية الكبيرة والمجهرية والهستوكيميائية المناعية للخنازير الميتة/المقتولة؛ الحمولات الفيروسية في المصل،اللعاب، تم إجراء مسحات من الأنف، ومسحات من المستقيم، والأنسجة، فضلا عن عزل الفيروس، لفهم ديناميكية الفيروس والانتقال.و تم تقييم الاستجابات المناعية عن طريق تحليل مستويات الأجسام المضادة الخاصة بـ PRRSV و المحايدة، وكذلك مستويات السيتوكينات في المصل.

الأهمية الرئيسية: ستوفر هذه الدراسة نموذجًا تجريبيًا رئيسيًا وأساسًا للبيانات لتقييم فعالية اللقاحات الحالية، وتطوير اللقاحات الجديدة،وتعزيز فهمنا لتوليد هذه السلالة الشديدة.

النتائج

1تحليل علم النسل للسلالات من فيروس PRRSV-1 ووصف تسلسل الأحماض الأمينية Nsp2

الخصائص الجينومية والوضع الفيلوجيني:

أكد التسلسل العميق (286 ×) أن جينوم سلالة PRRSV-1 Lleida 029_22 يبلغ طوله 14,858 nt (الشكل 1A) ، ينتمي من الناحية الوراثية إلى سلالة PRRSV-1 النوع الفرعي 1.تشكل هذه السلالة فصيلة مستقلة عن ثلاث سلالات أخرى مرتبطة بفيروس روزاليا (الشكل 1A)، يشارك في هوية النيوكليوتيد من 96. 61٪ إلى 97. 26٪ ، وهو متماثل للسلالة الممرضة للغاية PR40.

خصائص حذف Nsp2:

يظهر بروتين Nsp2 من سلالة Lleida 029_22 حذفًا من 63 حمض أميني (المواقف 317-379 بالنسبة لسلالة Lelystad) (الشكل 1B). يتم الحفاظ على هذا الحذف داخل clade Rosalia ،في حين أن الحذف في سلالة مثيل لها، PR40 ، أكبر من ذلك (الشكل 1A) ، مما يشير إلى أن هذا الاختلاف الوراثي نشأ في وقت مبكر من تطور الفصيلة.

الشكل 1. شجرة النسل النباتية للسلالة PRRSV-1 Lleida 029_22 ومحاذاة تسلسل Nsp2
(أ) أقصى احتمال شجرة التناسل البشري التي تم بناؤها على أساس تسلسل الجينوم بأكمله (نموذج GTR ، 1000 اختبار bootstrap).

▲: سلالة ليديا 029_22 المستخدمة في هذه الدراسة.
(ب) محاذاة تسلسل حمض أميني جزئي Nsp2 (CLUSTAL Genomics Workbench 24.0.1).

سلالات مقارنة: سلالة ليديا 029_22، سلالة روزاليا المرتبطة بتفشي المرض، سلالة PR40 شديدة الفيروس، والسلالة النموذجية لليستاد.
*ملاحظة: Nsp2، البروتين غير الهيكلي 2؛ PRRSV-1، فيروس متلازمة التكاثر والتنفس الخنازير من النوع 1.

2خصائص التكرار في المختبر للسلالة PRRSV-1 Lleida 029_22

أولاً، تم تقييم خصائص تكرار سلالة Lleida 029_22 في المختبر. تم تكرار هذه السلالة بكفاءة في خلايا PAMs و PAM-KNU، ولكن ليس في خلايا MARC-145 (الشكل 2A).أظهرت منحنيات نمو الفيروسات في أنواع الخلايا الثلاثة أصول فيروسية مماثلة في الخلايا PAMs و PAM- KNUبعد 72 ساعة، وصل كلا النوعين من الخلايا إلى مستويات فيروسية تبلغ حوالي 105TCID50/ مل.خلايا MARC-145 لم تكن قادرة على الحفاظ على العدوى الفيروسية الفعالةمع انخفاض مستويات الفيروسات إلى مستويات غير قابلة للكشف بعد 72 ساعة.

الشكل 2. حركية نمو PRRSV-1 Lleida 029_22 في ثلاثة خطوط الخلايا
(أ) المجهر الفلوريسسنتي بعد 72 ساعة من العدوى (MOI = 0.1, تلوين مع مضاد البروتينات المضادة للـ N; هدف 20x)
(ب) ديناميكيات العلامات الفيروسية في خلايا PAM-KNU (متوسط ± SD من ثلاث تجارب مستقلة)
*ملاحظة: MOI، تعدد العدوى؛ PAM، الأكروفات الألبيولية الأولية؛ PRRSV-1، فيروس متلازمة التكاثر والتنفس الخنازير من النوع 1.

3المظاهر السريرية والوفيات في الخنازير المصابة بـ Lleida 029_22

تم تقييم مدى مُسببة الأمراض لـ PRRSV-1 Lleida 029_22 عن طريق طرق التلقيح داخل العضلات (IM) و داخل الأنف (IN). أظهرت الخنازير في مجموعة IM زيادة في درجة حرارة الجسم بدءًا من 1 dpi ،أكثر من 41 درجة مئوية عند 7 دبي، واستمر حتى 13 دبي. أظهرت مجموعة التلقيح عن طريق الأنف حمى أخف ، تجاوزت 41 درجة مئوية لفترة وجيزة فقط في 5 أيام بعد التلقيح ، تليها نمط حمى متقطع.لم تظهر في مجموعة التحكم أي درجات حرارة بدنية غير طبيعية طوال التجربة (الشكل 3A).

أظهرت الملاحظات السريرية أن المجموعة المصابة بـ IM عانت من صعوبة تنفسية حادة، وأعراض عصبية، وعسر التنفس الشديد، والتهاب الأذن والكيس،في حين أن المجموعة المصابة بالتهاب الدم في المقام الأول قدمت معدلتشمل العلامات السريرية الإضافية الفراء الممزق والورم (أكثر وضوحاً في الأطراف والرقبة) والالتهاب المفاصل وتدهور الحالة الجسدية العامة في كلتا المجموعتين.لكن هذه كانت أكثر حدة في مجموعة IMكانت هذه المظاهر السريرية الشديدة مركزة بشكل أساسي بين 12 و 14 يومًا بعد التطعيم ، مما يتزامن مع فترة الوفيات العالية أو القتل الرحيم لأسباب رفاهية.

وبشكل عام، كانت النتائج السريرية في المجموعة المصابة بالتهاب الجهاز الدموي أعلى بكثير من تلك الموجودة في المجموعة المصابة بالتهاب الجهاز الدموي في 11، 12، و 14 يومًا بعد التطعيم (p < 0. 05) ،ذروة بعد 14 يومًا من التلقيح (الشكل 3B)كانت النتائج السريرية في مجموعة IN أقل، حيث وصلت إلى ذروتها في 13 يومًا بعد الإصابة.لكن النتائج ظلت أعلى بكثير من تلك الموجودة في مجموعة التحكم (p < 0.05) لم تلاحظ أي أعراض سريرية في مجموعة التحكم طوال التجربة (الشكل 3B).

Linear mixed model analysis (accounting for the non-independence of observations from the same animal at different time points) revealed that group- and day-specific variables significantly influenced body temperature and clinical scores during the first 14 days (p < 0تم العثور على اختلافات كبيرة بين مجموعات IM و IN ، وكذلك بين كل من مجموعات العدوى ومجموعة التحكم.

أظهر تحليل البقاء على قيد الحياة أن جميع الحيوانات في مجموعة العدوى المباشرة توفيت قبل 14 يومًا بعد العدوى ، مع معدل وفيات 100٪.كانت الوفيات الطبيعية أو الناجمة عنها مركزة بين 12 و 14 يوما بعد العدوىفي مجموعة العدوى الداخلية، كانت الوفيات 30% بعد 63 يومًا من العدوى، حيث حدثت الوفيات في 12، 21، و 43 يومًا بعد العدوى.جميع الحيوانات في المجموعة المراقبة نجت حتى نهاية التجربة (الشكل 3C).

الشكل 3. النتائج السريرية في الخنازير المصابة بـ PRRSV-1 Lleida 029_22
(أ) درجات الحرارة اليومية في المستقيم بعد الإصابة (الخط الأحمر المقطوع: عتبة الحمى > 41 درجة مئوية ؛ متوسط ± SD)
(ب) النتيجة السريرية اليومية المتوسطة (المتوسط ± SD؛ الحروف المتطابقة لا تشير إلى اختلافات كبيرة بين المجموعات، p < 0. 05)
(ج) منحنيات البقاء في المجموعات التجريبية
الملاحظة: C، مجموعة التحكم؛ IM، مجموعة داخل العضلات؛ IN، مجموعة داخل الأنف.

4فيريميا و إزالة الفيروسات في الحيوانات المصابة بفيروس الرص

تم تقييم مستويات الفيروسات بعد الإصابة بفيروس PRRSV-1 Lleida 029_22 بواسطة RT- qPCR تم الكشف عن RNA من فيروس PRRSV في مصل جميع الحيوانات المصابة بعد 3 أيام من العدوىمع اختلافات كبيرة بين مجموعات IM و IN مقارنة بمجموعة التحكم، والتي ظلت سلبية (p < 0.05· الشكل 4 أ) ، بلغت أعلى مستوى من الفيروميّة في مجموعة IN بعد 7 أيام من العدوى،بينما كانت الحملات الفيروسية في مجموعة IM أعلى بكثير من تلك الموجودة في مجموعات IN و مجموعات التحكم في كل من 7 و 14 يومًا بعد العدوى (p < 0بعد ذلك، انخفضت الحمل الفيروسي في مجموعة IN تدريجياً، ولكنه كان لا يزال أعلى بكثير من الحمل الفيروسي في مجموعة التحكم عند 28 دبي.

الشكل 4. تم تقييم التفريغ الفيروسي عن طريق البصاقات والمسحوقات الأنفية / المستقيمة. تم اختبار جميع الحيوانات المصابة إيجابياً للفيروس عند 3 دبي في البصاقات والأنفية والمستقيمة.

استمرت إفرازات اللعاب حتى 14 دبي في مجموعة IM وحتى نهاية التجربة في مجموعة IN (الذروة عند 3 دبي؛ الشكل 4B).

بلغ ذروة إفراز الأنف 7 دبي في كلتا المجموعتين، مع ارتفاع الحمل الفيروسي بشكل ملحوظ في مجموعة IM عند 7/14 دبي مقارنةً مع مجموعة IN (* p< 0.05؛ الشكل 4C).

استمر التخلص من الشرج المستقيم حتى 14 دبي في مجموعة IM وحتى 35 دبي في مجموعة IN (مع انتعاش طفيف عند 56 دبي) ، مع ارتفاع كلا القمم عند 7 دبي (الشكل 4D).

أكد تحليل AUC أن الحمولة الفيروسية في جميع العينات من المجموعات المصابة كانت أعلى بكثير من تلك الموجودة في المجموعة المراقبة ،وأن حمولة مسحات الأنف في مجموعة IM كانت أعلى من تلك الموجودة في مجموعة IN (*p<0.05) باختصار ، يحدث التخلص من فيروس PRRSV في وقت مبكر ويتم استمراره بعد العدوى.

5- التحقق من عزل PRRSV المعدي من عينات RT-qPCR الإيجابية

لتأكيد وجود الفيروس المعدي في العينات الإيجابية لـ RT-qPCR، أجريت تجارب عزل الفيروس (VI) باستخدام خلايا PAM-KNU (الشكل 5). the success rate of virus isolation was 100% (10/10) for samples collected between 3 and 14 days post-inoculation (dpi) in the IM group and 100% (10/10) for samples collected between 3 and 7 days post-inoculation (dpi) in the IN groupومع ذلك، انخفض معدل النجاح تدريجياً في 14 يومًا بعد التطعيم (70٪) ، و 21 يومًا بعد التطعيم (55.6٪) ، و 28 يومًا بعد التطعيم (12.5٪).

الشكل 5 تم عزل ثلاث سلالات من الفيروسات المعدية بنجاح من عينات اللعاب التي تم جمعها من الحيوانين المصابين بعد 3 أيام من العدوى بعد مرور مرتين من الزراعة.لم يتم عزل أي فيروس معدي من مسحات الأنف أو المستقيم.

6ردود الفعل السيتوكينية الناجمة عن PRRSV-1 Lleida 029_22 العدوى

تم جمع عينات من المصل خلال الأيام الـ 14 الأولى بعد الإصابة لتقييم مستويات السيتوكين، مما كشف عن اختلافات كبيرة بين المجموعات الثلاثة (الشكل 6).كانت مستويات IFN-α مرتفعة بشكل ملحوظ في كلتا المجموعتينبعد 14 يوماً من العدوى (dpi) ، مع مستويات IFN-α في مجموعة IM أعلى بكثير من المجموعة IN بعد 14 يوماً من العدوى (p< 0. 05).و IL-6 أظهرت اتجاهات مماثلة: IL- 1α ارتفعت في مجموعة IN بعد 3 أيام من العدوى وظلت مستقرةفي حين كانت مستويات IL-6 في مجموعة IM أعلى بكثير من المجموعة المراقبة في 7 و 14 يومًا بعد العدوى (الشكل 6B)من الملاحظة بشكل خاص أن مستويات IL-6 كانت أعلى بكثير في مجموعة IM من مجموعة IN في 14 يومًا بعد العدوى (p< 0. 05).أظهرت IL-1β في كلتا المجموعتين من الحيوانات المصابة اتجاهًا متزايدًا، حيث أظهرت مجموعة IM مستويات أعلى بكثير من مجموعة التحكم عند 3، 7 و 14 دبي، في حين أظهرت مجموعة IN فرقًا كبيرًا عند 14 دبي فقط (الشكل 6C).

الرسم 6. كانت مستويات IL-12 أعلى بكثير في مجموعة IM من مجموعة IN ومجموعة التحكم عند 14 دبي (الشكل 6F).أظهر الاتجاه الكلي استجابة سيتوكينية أقوى في مجموعة IM، وخاصة في مستويات IL-6 عند 7 و 14 dpi ، والتي كانت مرتبطة بشكل إيجابي مع معدل الوفيات بنسبة 100٪ في مجموعة IM.

7ردود الفعل المحددة والمحايدة للأجسام المضادة في الحيوانات المصابة بـ PRRSV-1 Lleida 029_22

تم تقييم الأجسام المضادة الخاصة بـ PRRSV-1 و PRRSV-2 باستخدام مجموعات ELISA التجارية (الشكل 7A).حدثت التحويلات في 70٪ من الحيوانات في مجموعة IM و 90٪ من الحيوانات في مجموعة IN عند 14 dpiكانت نسبة S / P في المجموعتين أعلى بكثير من تلك الموجودة في مجموعة التحكم (p < 0.05). بدأت مستويات الأجسام المضادة في مجموعة IN في الانخفاض عند 21 دبي ، وظلت مستقرة عند 42 دبي ،ارتدّت عند 56 دبي، ثم انخفضت قليلا عند 63 دبي.

الرسم 7. أظهر اختبار الأجسام المضادة المحايدة أنه في مجموعة IN ، تم اكتشاف فقط لقب منخفض من 2 log2 عند 28 dpi ، والذي ارتفع تدريجيا إلى 3.71 log2 عند 56 dpi (الشكل 7B).تغيرت مستويات الأجسام المضادة بين الأفراد في نفس الوقت، وتزامن ظهور الأجسام المضادة المحايدة مع إزالة الفيروس المعدي من المصل بعد 28 دبي (الشكل 4B)..

8اكتشاف و عزل PRRSV-1 Lleida 029_22 في النسيج المتجانس

تم استخدام RT-qPCR لقياس الأحمال الفيروسية في أنسجة مختلفة (الشكل 4F). في مجموعة IM ، كانت الأحمال الفيروسية متسقة نسبيًا عبر الأنسجة ، مع أعلى الأحمال في الرئتين ،الغدد الليمفاوية الوسطىفي المجموعة IN، تختلف الأحمال الفيروسية بشكل كبير عبر الأنسجة، مع أعلى الأحمال في اللوزتين والغدد الليمفاوية الوسطى. كما هو متوقع،كان الحمل الفيروسي الإجمالي في مجموعة IN أقل من مجموعة IM، والتي قد تكون مرتبطة بوقت مختلف من التشريح.وكانت الاختلافات الكبيرة في حمولة الأنسجة في الحيوانات المصابة في مجموعة IN مرتبطة أيضاً بوقت وفاة مختلف (العينات التي أصبحت رمادية عند 12لم يتم الكشف عن أي RNA فيروسي في أي عينة من الأنسجة من مجموعة التحكم.

الجدول 1 الأنسجة التي تم جمعها من الحيوانات التي توفيت بعد 12 أو 21 أو 43 يومًا من العدوى اختبرت إيجابية لـ aVI.

(ملاحظة الجدول: الجدول 1 يلخص نتائج RT-qPCR وعزل الفيروس من عينات الأنسجة. "MLN" تشير إلى الغدد الليمفاوية المتوسطة، و "ILN" تشير إلى الغدد الليمفاوية الحليلية.)

9التحليل المرضي والإمونوهيستوكيميائي للأنسجة المصابة بفيروس السرطان

نتائج التشريح: أظهرت الحيوانات التي توفيت بعد الإصابة بفيروس PRRSV (وخاصة تلك التي توفيت بين 12 و 21 يومًا بعد العدوى) الآفات الجهازية الكبيرة ، بما في ذلك الجلد الأرجواني ،تورم عاممرض الغدد اللمفاوية الشديد ، والتهاب الغدد الدودية (في بعض الأحيان مع تضخم بصيلات) ، والنزيف المعدة.وآلام بنية حمراء، متسقة مع الالتهاب الرئوي المتداخل ، مع آفات أكثر حدة في الحيوانات التي ماتت مبكرا (الشكل 8A).التهاب القلب، والتهاب المفاصل الناجم عن العدوى البكتيرية الثانوية.

الشكل 8. أظهر التحليل التشخيصي أن درجات الالتهاب الرئوي المتداخل في الحيوانات التي توفيت مبكرا (12-21 دبي) في مجموعات IM و IN تتراوح بين 1.83 و 3.33 نقطة.هذه النتائج انخفضت بشكل ملحوظ في الحيوانات المذبحة عند 63 دبي (مجموعة التحكم)من الملاحظة بشكل خاص، كانت النتيجة النسيجية لللوزتين في مجموعة IN أعلى بكثير من النتيجة النسيجية في المجموعة المراقبة عند 63 دبي (p<0.05) ،ولكن لم تلاحظ أي اختلافات كبيرة في الأنسجة الأخرى (الشكل 8C).

(التعليق: يظهر الشكل 8B النتائج التشريحية، والشكل 8C يقارن النتائج التشريحية للمجموعات المختلفة عند 63 دبي)

كشف علم الأمراض المجهري عن الالتهاب الرئوي المتداخل (تكثيف جدار الحبل الخلوي ، وتكاثر الخلايا ، وتسلل الخلايا الالتهابية) في رئتين جميع الحيوانات المصابة.تم العثور على المستنفذات والأنسجة الميتة داخل الحويصلاتأظهرت الأنسجة الليمفاوية (العقد الليمفاوية والطحال) التهاب الليمفاوية الشديد والجفاف ، مصحوبة بتلف الأوعية الدموية (على سبيل المثال ، التخثر والأوعية الدموية).تسلل الخلايا الالتهابية في الأوعية الدمويةتم ملاحظة التهاب الدماغ والورم والجليوز في المادة البيضاء في الدماغ (الشكل 9A).

اكتشف التحليل المناعي الهستوكيميائي (IHC) أنججينات PRRSV في الكاسحات الكبرى ، وفي بعض الأحيان في الخلايا الرئوية من النوع الثاني ، من الرئتين ، العقد الليمفاوية ، اللوزتين ، والطحال من الحيوانات المصابة (الشكل 9B).تم اكتشاف المضادات الفيروسية أيضاً في الخلايا الالتهابية المحيطية في الدماغ.

الشكل 9 - تسبب عدوى PRRSV أضرارًا مرضية واسعة النطاق في الرئتين والأنسجة الليمفاوية والدماغ ، وتتمركز بشكل أساسي داخل الأغشية الكبرى ، مع ظهور سمات أمراضية منهجية.

مناقشة

يحتوي PRRSV على تروبيزم مقيد للخطوط الخلوية أحادية الخلايا وقد تم عزلها وتزرعها تقليديا باستخدام خلايا الكبرى الألفيولية (PAMs) وخلايا MARC-145.من الصعب الحصول على PAMs ولديها اختلاف كبير من دفعة إلى دفعةفي هذه الدراسة، استخدمنا خط الخلايا PAM-KNU، الذي هو حساس لبعض سلالات المجال، بدلا من PAMs.لقد عزلنا بنجاح سلالة ليليدا 029_22، الذي كان منحنى نموه مماثلاً لما لوحظ في PAMs. في الوقت الحالي لا يوجد خط خليوي عالمي مناسب لجميع سلالات PRRSV ،وهناك حاجة إلى جهود مستقبلية لتحديد خطوط الخلايا الأكثر ملاءمة لعزل سلالات مختلفة.

الاستنتاج

نجحت هذه الدراسة في تحديد نموذج للعدوى داخل الأنف بسلالة PRRSV-1 شديدة الخطورة.والفيروسات) تشبه كثيرا تلك التي لوحظت في تفشي الميدانوكانت النتيجة الرئيسية أن طريق العدوى أثر بشكل كبير على النتيجة: العدوى داخل العضلات أدت إلى وفيات حادة بنسبة 100 ٪.في حين أن العدوى داخل الأنف (IN) كان معدل الوفيات من 30% فقط، والخنازير المصابة في نهاية المطاف تعافى تماما.هذا الاختلاف الكبير يسلط الضوء على خطر أن ممارسات حقن IM في المزارع يمكن أن تفاقم بشكل كبير شدة الوباء من خلال الانتقال المرضي.